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公开(公告)号：CN118165990B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410588735.4
申请日：2024-05-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了基于PRRSV基因组dsRNA的siRNA重组质粒及其构建方法和应用。通过对猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组产生的siRNA基因片段进行测序分析，获得能够大量产生siRNA的片段，将得到的基因片段构建至真核表达载体质粒，制备重组质粒及其在猪繁殖与呼吸综合征的防治方面的应用，经实验证明，将重组质粒转染猪肺泡巨噬细胞后感染PRRSV，细胞中PRRSV复制量显著降低，PRRSV病毒的增殖被抑制。在使用仔猪进行的攻毒保护实验中，免疫组实验猪血液中具有更低的病毒载量，且实验组仔猪全部存活，攻毒对照组有实验猪死亡。因此，该重组质粒可作为种猪场净化PRRSV的候选物。
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公开(公告)号：CN118441099A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410575456.4
申请日：2024-05-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测牛病毒性腹泻病毒的引物探针组合、冻干小球及其应用。所述引物探针组合包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的探针；或所述引物探针组合包括核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的正向引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的反向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的探针。所述冻干小球包括上述引物探针组合、荧光定量PCR溶液和冻干保护溶液。本发明的检测牛病毒性腹泻病毒的引物探针组合结合冻干小球技术，用于检测牛病毒性腹泻病毒灵敏度高，特异性强，且冻干小球可常温保存，大大降低了运输和保存成本。
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公开(公告)号：CN117512225B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410010654.6
申请日：2024-01-04
Applicant: 南京农业大学三亚研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测猪流行性腹泻病毒和猪德尔塔冠状病毒并对猪流行性腹泻病毒进行GⅠ、GⅡ分型检测的实时荧光定量qPCR冻干小球检测试剂盒及其应用。针对这两种病原的检测特异性强，灵敏度高，重复性好，能够准确诊断猪群常见冠状腹泻病毒的感染情况。此外，冻干小球形式的诊断试剂较液体诊断试剂稳定性好，可常温保存和运输，大大降低了运输成本，复溶操作简单。
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公开(公告)号：CN116676422A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310533977.9
申请日：2023-05-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测牛病毒性腹泻病毒的引物探针组合、冻干小球及其应用。所述引物探针组合包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的探针。所述冻干小球包括上述引物探针组合、荧光定量PCR溶液和冻干保护溶液。本发明的检测牛病毒性腹泻病毒的引物探针组合结合冻干小球技术，用于检测牛病毒性腹泻病毒灵敏度高，特异性强，且冻干小球可常温保存，大大降低了运输和保存成本。
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公开(公告)号：CN116286978A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310204900.7
申请日：2023-03-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/70 , C12N5/10 , C12N1/21 , C12N1/12 , C07K14/465 , A61K38/17 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了重组质粒、重组菌株或细胞系，重组钙结合蛋白及其应用，具体来源于鸡肠道黏液中的钙结合蛋白，可以在DF1细胞上抵抗M41以及IBDV的。本发明使用重组蛋白、重组质粒分别处理DF1细胞后，细胞中IBDV、IBV‑M41复制量明显降低，IBDV/IBV‑M41病毒的入侵及复制被抑制，且在体内实验上得到了印证。因此，该重组蛋白有望作为预防/治疗鸡传染性支气管炎病毒以及传染性法氏囊病毒的候选蛋白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111647522A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010376156.5
申请日：2020-05-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了抑制多种植物真菌病害的昆虫病原线虫共生菌菌株及应用，该菌株为伯氏致病杆菌的高毒力菌株NN6，保藏编号：CCTCC NO:M 2020097，2020年4月29日保藏于中国典型培养物保藏中心。本发明伯氏致病杆菌NN6具有较强的抑制尖孢镰刀菌西瓜专化型和黄瓜专化型、禾谷镰刀菌、稻瘟菌、灰葡萄孢、辣椒疫霉菌丝生长的能力，且随着体积浓度的增加而增高，抑菌效果显著。该菌株还具有抑制镰刀菌属孢子萌发的作用，抑制效果显著。该菌具有培养条件要求低、持效期长、来源环保无毒性等特点，对于保护生态环境和提高农产品的附加值上具有重要意义，加上抗菌谱更广这个优势，使其具有很好的市场开发应用前景。
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公开(公告)号：CN101985635B
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201010544629.4
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了高效表达山羊生长激素GH的乳腺特异性表达载体，属于生物工程技术领域。GH的cDNA序列见SEQ ID NO.1。生长激素既可以促进乳腺导管形成，也可以促进山羊的乳腺上皮细胞的增殖，从而增加产奶量。将本发明构建的乳腺特异性表达载体pcGH采用脂质体法，导入体外培养的人乳腺癌细胞Bcap-37中，在转染后收集细胞培养上清；采用ELISA的方法检测细胞培养上清中的GH含量。结果显示与未转染pcGH的空白组细胞相比，转染pcGH组细胞GH表达量显著提高。表明pcGH载体可已在乳腺细胞上成功表达GH，为下一步生产转gh基因奶山羊奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN117512225A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202410010654.6
申请日：2024-01-04
Applicant: 南京农业大学三亚研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测猪流行性腹泻病毒和猪德尔塔冠状病毒并对猪流行性腹泻病毒进行GⅠ、GⅡ分型检测的实时荧光定量qPCR冻干小球检测试剂盒及其应用。针对这两种病原的检测特异性强，灵敏度高，重复性好，能够准确诊断猪群常见冠状腹泻病毒的感染情况。此外，冻干小球形式的诊断试剂较液体诊断试剂稳定性好，可常温保存和运输，大大降低了运输成本，复溶操作简单。
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公开(公告)号：CN116665779A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310368843.6
申请日：2023-04-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: G16B30/10 , G16B45/00 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/64 , A61K31/7088 , A61P31/14 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种筛选家禽RNA病毒源siRNA的方法及其应用。本发明筛选家禽病毒源siRNA方法是基于NCBI GEO数据库中GSE数据集的小RNA与相应参考文献的病毒毒株序列进行比对。其次，通过基因组可视化软件IGV比对可知，IBVM41病毒源siRNA富集区为IBV M41 NSP10siRNA富集区序列。我们将IBVM41 NSP10siRNA富集区序列克隆至能高效表达siRNA的pSilencer4.1载体中，构建成PS‑M10质粒。最后，将PS‑M10质粒转染至巨噬细胞，再进行IBVM41感染试验，荧光定量PCR以及蛋白质印迹结果表明，PS‑M10可高效抑制IBV M41的复制，限制病毒的增殖。
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公开(公告)号：CN116426527A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310370313.5
申请日：2023-04-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/66 , G16B30/10 , G16B45/00 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了通过筛选得到鸡传染性法氏囊病毒的siRNA基因库，并将该数据库与鸡传染性法氏囊病毒基因组比对得到一段siRNA富集区的基因片段的方法。我们发现IBDV的基因组上siRNA富集区可以高效产生siRNA并能够作为鸡传染性法氏囊病预防与治疗的应用，所述应用包括：使用pcDNA3.1和PSilence4.1商品质粒构建包含IBDVsiRNA富集区片段的重组质粒。经实验证明，使用重组质粒处理DF1细胞后，细胞中IBDV复制量显著降低，IBDV病毒的增殖被抑制。在使用雏鸡进行的动物保护实验中也能得到了相同结论。因此，该重组质粒可作为预防/治疗鸡传染性法氏囊病的候选疫苗。
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