一种寡核苷酸染液及其应用与用法

    公开(公告)号:CN106520991B

    公开(公告)日:2019-10-01

    申请号:CN201611130825.0

    申请日:2016-12-09

    Abstract: 本发明属于细胞生物学和分子生物学研究领域,具体涉及一种寡核苷酸染液及其应用与用法。所述寡核苷酸染液包括YMPNS‑CentC69‑1、MKnob‑2、YMPNS‑MR68‑3、(ACT)10 4个经过修饰的寡核苷酸探针,按一定比例混合并由2×SSC稀释而成。所述寡核苷酸染液在每张不经变性的染色体制片上加8μl,并加入2.5μl 50%w/v硫酸葡聚糖于37℃培养箱进行杂交2小时,然后在42℃2×SSC中洗5分钟,用DAPI套染后即可在荧光显微镜下进行观察。所述寡核苷酸染液可以开发成商品用于玉米及其亲缘物种的染色体快速鉴定。

    一种利用寡聚核苷酸探针染液涂染染色体的新方法

    公开(公告)号:CN105039542B

    公开(公告)日:2018-06-01

    申请号:CN201510428499.0

    申请日:2015-07-17

    Inventor: 亓增军 杜培

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供了一种开发寡核苷酸探针染液涂染染色体的新方法。以普通小麦中国春和栽培黑麦荆州黑麦为例,利用基于重复序列开发的寡核苷酸探针,通过比较非变性原位杂交信号,确定最佳探针长度和浓度,按照信号强度进行不同探针配比并溶解到2×SSC中形成探针染液,将染色体制片在染液中直接进行染色,获得清晰稳定的中国春和荆州黑麦寡核苷酸涂染核型。方法具有简单快捷、一次可处理多张染色体制片、染液可重复利用的特点,利于提高原位杂交的自动化和商业化水平。同时公布了10个寡核苷酸探针序列和三种鸡尾酒探针染液,为小麦和黑麦染色体工程提供了新的方法,也为其他物种寡核苷酸染液的开发提供了范例。

    一种开发小麦亲缘物种特异分子标记的方法及应用

    公开(公告)号:CN104263826A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410473529.5

    申请日:2014-09-16

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明属于作物遗传育种与农业生物技术领域,提供一种用于开发小麦亲缘物种百萨偃麦草特异分子标记的标记引物和方法,及该标记引物和方法的应用。本发明共提供了157对引物对,经过引物对扩增后的百萨偃麦草特异片段,全部定位于百萨偃麦草染色体上,说明该引物对的特异性;同时,通过本发明提供的百萨偃麦草特异分子标记的开发方法获得的特异扩增片段在百萨偃麦草中的多态率高达40.2%,说明本方法的可行性。本发明通过157对引物获得182个定位于百萨偃麦草染色体的分子标记,数量大,为从中发掘百萨偃麦草有益性状基因进而将有利基因通过分子标记辅助选择转移到栽培小麦中提供了便利。

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