一种高活性纤维二糖酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN104312997A

    公开(公告)日:2015-01-28

    申请号:CN201410449969.7

    申请日:2014-09-04

    Inventor: 李爽 阳芳

    CPC classification number: C12N9/2445 C12Y302/01021

    Abstract: 本发明公开了一种高活性纤维二糖酶及其编码基因与应用,该纤维二糖酶是(a)或(b)的蛋白质:(a)由序列表 SEQ ID No:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中SEQ ID No:2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加且具有纤维二糖酶高活性的由(a)衍生的蛋白质。本发明所述的纤维二糖酶具有很强分解纤维二糖的活性,最大反应速率可达740.39±10.23U/mg。产物葡萄糖抑制方面,该酶显示出很好的耐受性,其抑制常数Ki高达800mM。研究表明,本发明的纤维二糖酶具有高催化活力、高产物耐受及耐热性,具有在生产中推广应用的巨大潜力。

    一种嗜热厌氧杆菌及利用其生产乙醇的方法

    公开(公告)号:CN104263680A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410453513.8

    申请日:2014-09-05

    CPC classification number: C12N1/20 C12P7/06 C12R1/01 Y02E50/17

    Abstract: 本发明涉及微生物菌株领域,特别涉及一种嗜热厌氧杆菌及利用其生产乙醇的方法。本发明菌株为长白云嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterium aotearoense)P8G3#4,已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为CGMCC NO.9000,保藏日期为2014年4月3日。利用所述菌株生产乙醇的方法:首先配制嗜热厌氧杆菌CGMCC9000的种子液,然后将嗜热厌氧杆菌CGMCC9000种子液以10-15%w/w接种量转接到发酵培养基中,在厌氧条件下搅拌培养,最后从发酵液分离出乙醇。该菌株遗传稳定性好,产量性状稳定,发酵迟滞期缩短至原来的1/4,节省了耗能。

    一种双菌固定化厌氧发酵生产丁醇的装置和方法

    公开(公告)号:CN102952745B

    公开(公告)日:2014-05-07

    申请号:CN201210434676.2

    申请日:2012-11-02

    Abstract: 本发明公开了一种双菌固定化厌氧发酵生产丁醇的装置和方法,包括依次由管路串联的发酵培养基储罐、产丁酸固定化反应器A、产丁醇固定化反应器C和产物收集罐。将产丁酸和产丁醇的厌氧菌分别固定于固定化反应器A、C中,即双菌固定化;然后控制发酵培养基从培养基储罐流出,依次流经固定化反应器A、C进行连续厌氧发酵,最后流入产物收集罐即可。产丁酸厌氧菌首先利用底物生产丁酸,然后产丁醇厌氧菌以丁酸为底物发酵产丁醇。本发明生产丁醇的方法可以大大缩短发酵周期,提高丁醇的底物转化率和产率。

    一种檀香烯合酶突变体及其应用
    24.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119391681A

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202411738714.2

    申请日:2024-11-29

    Abstract: 本发明公开一种檀香烯合酶突变体及其应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明通过生物信息学分析筛选到了不同的檀香烯合酶突变体,其中I402C突变使产物檀香烯中α构型占比54.2%,β构型占比32.0%,构型比例符合天然檀香精油构型比例。P460A和P460S突变使产物檀香烯中β构型占比超过50%,这是国内首次报道;实现了天然檀香精油的构型比例和含有更多β构型比例的檀香烯,为工业化生产中能够根据特定需要来生产不同组成的檀香精油提供了可能,具有良好的应用前景。同时,本发明所述檀香烯的生物制备方法,具有操作简便、对环境友好、反应条件温和等优点,在檀香烯生产领域具有很好的应用前景。

    一种连续化联产ε-己内酯和丙酸的方法

    公开(公告)号:CN118026986A

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202410077448.7

    申请日:2024-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种连续化联产ε‑己内酯和丙酸的方法,其包括以下步骤:将微反应器的控温系统打开升温至预定温度,再通入氧气至预定压力,再用蠕动泵泵入环己酮、催化剂和有机溶剂的混合物以及用平流泵泵入丙醛进行连续氧化反应,再将微反应器内的反应液转入降温装置进行降温,再将降温后的反应液转入气液分离器进行气液分离,再从气液分离器接出产物,即得ε‑己内酯和丙酸。本发明的连续化联产ε‑己内酯和丙酸的方法具有反应条件温和稳定、可以连续生产ε‑己内酯、工艺条件可以精确控制、生产安全性高等优点,适合进行大规模工业化应用。

    一种硝基芳烃及其衍生物遗传毒性高通量检测方法

    公开(公告)号:CN117925769A

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202410118545.6

    申请日:2024-01-29

    Abstract: 本发明公开一种硝基芳烃及其衍生物遗传毒性高通量检测方法,涉及遗传毒性高通量筛查的技术领域,该方法是利用硝基芳烃及其衍生物的硝基还原代谢途径,将编码硝基还原酶基因、磺基转移酶基因、DNA损伤检测响应启动子和噬菌体裂解基因插入到大肠杆菌表达载体,得到两个重组载体,并将该重组载体转入到大肠杆菌,得到大肠杆菌检测菌株。再将两个检测菌株应用于遗传毒性物质如硝基芳烃及其衍生物和渔药的高通量检测。本检测方法使用大肠杆菌,无致病风险;检测方法简单,每小时测量OD600一次,再计算菌体存活率即可比较待测样品的遗传毒性;检测快速,检测灵敏度高;因此,该方法操作便利、检测效率高、灵敏度高,易于实现高通量样品检测。

    一种高产T4N5的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN117867005A

    公开(公告)日:2024-04-12

    申请号:CN202410059789.1

    申请日:2024-01-15

    Abstract: 本发明公开一种高产T4N5的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用。本发明以酿酒酵母作为底盘细胞,对其进行位点挖掘,通过在位点XIV‑68上整合不同报告基因(GUS或YPet)并进行表征,确定了XIV‑68位点为酿酒酵母中的高表达位点。将T4N5表达盒敲入至XIV‑68位点后,实现了重组T4N5的高效表达;进一步敲除SED1基因,得到的突变菌株可高效裂解细胞壁,释放细胞内物质至胞外,以亲和层析法、脱盐完成了重组T4N5的有效纯化,本发明中生产的T4N5对由紫外照射而形成DNA损伤有着良好的修复作用。利用本发明所述重组酿酒酵母菌株生产T4N5能够有效解决药源问题,具有节省物质资源,保护环境的优点。

    活性聚集肽及其应用
    28.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116102628A

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202210984387.3

    申请日:2022-08-17

    Abstract: 本发明公开了活性聚集肽及其应用,属于生物工程技术领域。该类活性聚集肽来源于大肠杆菌Escherichia coli CFT073的α‑溶血素HlyA,共包含五个序列,分别为HlyA218、HlyA60、H12、H1和H2。通过将该类活性聚集肽与目的蛋白融合表达,可介导目的蛋白在宿主细胞内形成活性包涵体,且该类短肽诱导蛋白活性聚集率高、具有刺激重组菌快速生长的潜力。该类活性聚集肽可应用于重组蛋白的无柱化纯化和原位固定化,生产成本低,步骤简便。

    一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113481183B

    公开(公告)日:2023-01-06

    申请号:CN202110679849.6

    申请日:2021-06-18

    Abstract: 本发明属于酶工程领域,公开了一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用,脂肪酶嵌合体氨基酸序列如SEQ NO.1所示,编码脂肪酶嵌合体的基因核苷酸序列如SEQ NO.2所示。构建方法如下:(1)pcr扩增出GMGL的N端前160个氨基酸肽段;(2)无缝克隆方式将步骤(1)的氨基酸肽段替换到CoMGL对应肽段得到重组质粒;(3)将测序成功的重组质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞内进行异源表达与纯化,得到脂肪酶嵌合体160。改造后的嵌合体160在最适条件的比酶活为741.8U/mg,是野生型CoMGL的4.9倍,是野生型GMGL的2.7倍;最适反应温度为70℃,具有良好的工业应用前景。

    氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用

    公开(公告)号:CN114480512A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202111517500.9

    申请日:2021-12-13

    Abstract: 本发明公开一种氧化还原酶及其突变体在生物合成圆柚酮中的应用,属于生物工程技术领域。本发明首次从海洋嗜杀酵母(Wickerhamomyces anomalusM15)中获得对圆柚醇具有较高转化能力的氧化还原酶,通过定点突变获得了更高能力的氧化还原酶突变体。与现有的能够催化圆柚醇的氧化还原酶相比,该氧化还原酶及其突变体具有良好的底物耐受度、转化率高及高耐盐性。本发明所提供的氧化还原酶及其突变体,为体外酶催化方式合成圆柚酮提供了条件,实现以绿色、高效的方式催化圆柚醇合成圆柚酮产物。本发明将为圆柚酮的合成提供一种重要的工具酶,并为圆柚酮的合成工业带来巨大的经济效益。

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