一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法

    公开(公告)号:CN101899520B

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201010239919.8

    申请日:2010-07-28

    Abstract: 本发明提供了一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法,包括以下步骤:(1)配制PCR反应体系:取1.0μL 10×buffer、dNTP 25~50μM、MgCl22.0mM、前向引物0.5μM、后向引物0.5μM、Taq酶1个单位、荧光dUTP10pmol和基因组DNA 5ng混合,加超纯水补至10μL;(2)进行降落PCR:94℃4min;20个循环:94℃30s、70~60℃或者66~56℃30s且每个循环降低0.5℃、72℃1min;再26个循环:94℃30s、60或者56℃30s、72℃1min;最后72℃10min,得PCR产物;(3)取PCR产物1.0μL加入9.34μL超纯甲酰胺、0.16μL分子量内标,95℃5min后放置冰上快速冷却,在测序仪上进行标记检测。

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