一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110079541B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN201910373562.3

    申请日:2019-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用,首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段,然后进行分段克隆,再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上,筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于,本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆,为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径,该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题,阳性克隆率高,且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性,拯救效率高,为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。

    一种鸡K亚群禽白血病遗传抗性分子标记tva546G>C及其应用

    公开(公告)号:CN114807388A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210541457.8

    申请日:2022-05-17

    Abstract: 本发明公开了一种鸡K亚群禽白血病遗传抗性分子标记tva546G>C及其应用。该分子标记为tva基因DNA序列(GenBank登录号为AY531262.1)在第546位碱基处的G>C碱基突变。本发明分析了中国鸡种tva受体基因的遗传变异情况,发现中国鸡种中tva受体基因DNA序列第546位碱基存在G>C的突变,并从体外、体内实验两个层面证实了该tva基因自然突变引起宿主抗ALV‑K的感染,并建立了相应可用于K亚群禽白血病抗性鸡品种选育的方法。

    一种制备重组病毒的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110184287A

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201910443328.3

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种制备重组病毒的方法,是以病毒载体为基体,先通过Red/ET重组引入双向筛选基因,进一步重组将双向筛选基因用目的基因替换,得到含有目的基因和病毒基因组的重组质粒,进而拯救获得重组病毒的。其有益效果在于,本方法步骤简单,能准确快速的实现重组病毒的构建,且构建成功的重组病毒可容纳外源基因,实现多位点定向插入,无痕迹插入,筛选标记方便的优点,最终形成一个可表达多种抗原基因的重组病毒,应用于载体疫苗,还具有宿主范围广,生产制备方法容易,安全性好,同时诱导多种免疫反应,无需添加佐剂的优点。

    一种鸡A亚群禽白血病抗性分子标记tva304-305insGCCC及其应用

    公开(公告)号:CN109797229A

    公开(公告)日:2019-05-24

    申请号:CN201910240247.3

    申请日:2019-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种鸡A亚群禽白血病抗性分子标记tva304-305insGCCC及其应用。本发明分析了中国鸡种tva基因的遗传变异,发现中国鸡种tva基因DNA序列(GenBank登录号:AY531262.1)第304与305位碱基之间存在GCCC插入突变,发明人进一步研究证实该tva基因的自然突变能够引起宿主抗ALV-A的感染。本发明利用该分子标记制备了筛选A亚群禽白血病抗性鸡的检测试剂盒,能够准确、快速判定检测样本为A亚群禽白血病抗性鸡还是易感鸡,并可应用于筛选A亚群禽白血病遗传抗性鸡品种(系)的育种素材,从而开展A亚群禽白血病遗传抗性鸡品种(系)的选育,具有很好的应用和推广价值。

    鸡B亚群禽白血病抗性分子标记tvb3667-3668insAG及其分子诊断方法

    公开(公告)号:CN105506088B

    公开(公告)日:2018-09-18

    申请号:CN201511005988.1

    申请日:2015-12-29

    Abstract: 本发明属于抗性品种选育技术领域,具体公开了一种鸡B亚群禽白血病抗性分子标记tvb3667‑3668insAG及其分子诊断方法。本发明首次分析了中国鸡种tvb受体基因的遗传变异,发现中国鸡种中tvb受体基因第3667与3668位存在AG插入突变,发明人从体外、体内实验两个层面证实了该自然突变引起宿主对ALV‑B的感染产生遗传抗性,另外发明人以此建立抗B亚群禽白血病遗传标记的分子诊断方法,该方法可应用于筛选ALV‑B遗传抗性鸡品种(系)的育种素材,从而开展ALV‑B遗传抗性鸡品种(系)的选育。

    鸭腺病毒3型灭活疫苗CH-GD-12-2014株

    公开(公告)号:CN108330108A

    公开(公告)日:2018-07-27

    申请号:CN201711430436.4

    申请日:2017-12-26

    Abstract: 本发明提供了一种鸭腺病毒3型灭活疫苗CH-GD-12-2014株,在2017年11月27保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:V201764,保藏地址为:中国,武汉,武汉大学;全基因序列提交Genebank,Accession No:KR135164;本发明还提供一种多肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;提供编码多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述灭活毒株对各种鸭只均安全,且无副反应,所述灭活株制成疫苗安全有效,可保护同源强毒的攻毒,具有实际和广泛的应用价值。

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