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公开(公告)号：CN103420934A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310226349.2
申请日：2013-06-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D263/26
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种用于兽药残留检测的呋喃它酮残留标志物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮的化学合成新方法，其特征在于：以水合肼与吗啉基环氧丙烷为原料，在碱性条件下反应，得到中间体1-肼基-3-吗啉-2-丙醇，接着在碱性条件下与取代的甲酸酯反应，得到目标产物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮。本发明首次提供了5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)的完整合成方法，其合成步骤简单，易操作，反应条件温和。
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公开(公告)号：CN103420927A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310226391.4
申请日：2013-06-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D241/44
Abstract: 本发明属于兽药制备技术领域，具体涉及一种用于兽药残留检测的卡巴氧残留标志物喹噁啉-2-羧酸的合成方法。其制备步骤包括：1）以邻苯二胺为原料，与丙酮醛缩合，即得中间产物2-甲基喹噁啉；2）将所得中间体2-甲基喹噁啉用二氧化硒进行氧化反应，即生成喹噁啉-2-甲醛；3）将所得喹噁啉-2-甲醛用酸性高锰酸钾进一步氧化，即得目标产物喹噁啉-2-羧酸。本发明的合成方法具有反应路线设计合理、操作简单和产率较高等优点。
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公开(公告)号：CN103288964A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049837.6
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种阿苯达唑-2-氨基砜残留检测用单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞GA/2A11，CCTCCNO:C201142。其步骤是：a、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；b、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与卵清蛋白偶联得到包被原；c、利用免疫原制备得到杂交瘤细胞株；d、用包被原包被固相载体；e、将待测样品用乙酸乙酯在氢氧化钾条件下提取得到待测物；f、对待测物进行酶联免疫检测；试剂盒包括：⑴包被有包被原ABZSO2NH2-GA-OVA的酶标板；⑵ABZSO2NH2标准品溶液；⑷辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液；⑸浓缩磷酸盐缓冲液；⑹浓缩洗涤液；⑺底物混合液；⑼终止液。试剂盒在阿苯达唑-2-氨基砜残留检测中的应用。具有简便、快速、灵敏、准确的特点。
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公开(公告)号：CN103288962A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049821.5
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种呋喃西林残留标示物氨基脲单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞SEM/4G6，CCTCC，CCTCCNO:C201150。其步骤：A、将半抗原CPSEM与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；B、将半抗原CPSEM与卵清蛋白偶联得到包被原；C、利用步骤A的免疫原制备得到保藏号为CCTCCNO:C201150杂交瘤细胞株SEM/4G6所分泌的单克隆抗体；D用步骤B的包被原包被固相载体；E、将待测样品用酸处理，加入苯甲醛超声衍生后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层氮气吹干、正己烷净化和样品稀释液重新溶解得到待测物；F、对待测物进行酶联免疫检测。试剂盒在动物可食性组织中呋喃西林残留检测中的应用。方法简便、快速、灵敏、准确，可用于开发能检测动物可食性组织中氨基脲残留的酶联免疫试剂盒。
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公开(公告)号：CN103288960A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049798.X
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N15/13 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用，其步骤：A、取液氮保存的杂交瘤细胞株KA/2A9，提取脾细胞总RNA，得到mRNA，在逆转录得到cDNA。B、扩增得到重链可变区、轻链可变区基因；以重链和轻链抗体片段互为引物，利用多肽链将抗体重链和轻链连接；C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中，加入M13K07培养，得到吉他霉素特异性抗体的噬菌体抗体文库。D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中，IPTG诱导，得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序，得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。方法易行，操作简便，便于基因工程抗体的大批量生产。广泛应用于动物可食性组织中吉他霉素的残留检测，提供动物可食性组织中吉他霉素的残留量信息。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103288959A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049794.1
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N15/13 , C12N15/70 , G01N33/577 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种泰乐菌素和替米考星的基因工程抗体及制备方法和应用，其步骤：A、取液氮保存的杂交瘤细胞株P3C4，提取脾细胞总RNA，得到mRNA；B、扩增，以重链和轻链抗体片段互为引物，利用多肽链将抗体重链和轻链连接；C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中，加入M13K07培养，得到能展示泰乐菌素和替米考星特异性抗体的噬菌体抗体文库；D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中，IPTG诱导，得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序，得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。基因工程抗体在动物源性食品的泰乐菌素和替米考星残留检测中的应用。方法易行，操作简便，大批量生产，检测准确率高，应用于动物可食性组织中泰乐菌素和替米考星的残留检测。
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公开(公告)号：CN101368154B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200810048065.8
申请日：2008-06-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种人肠道菌群连续培养系统及方法。系统包括一组发酵罐，培养基输入、废液输出、液位控制系统和气路系统。建立了一种人肠道菌群连续培养系统及方法，构建了一种模拟人肠道环境的离体模型，连续培养的装置通过电脑控制，模型具有操作简单、使用方便、体系稳定性好等特点，经检测表明人肠道菌群不仅能在系统中稳定生长，且优势菌数量和主要的代谢产物(SCFA)浓度也与健康人相似。该模型的建立不仅为抗菌药残留对人肠道菌群影响的安全性评价构建了平台，也为新药、功能食品等的安全评价研究提供了更科学的方法和途径。
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公开(公告)号：CN1971279B
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN200610164837.5
申请日：2006-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/544
Abstract: 本发明属于免疫化学分析技术领域。公开了一种用于喹噁啉-2-羧酸残留检测的酶联免疫方法及试剂盒，本发明的方法主要包括药物改造，免疫原、包被原、抗体的制备以及样品前处理和ELISA检测方法的建立。本发明的试剂盒主要由喹噁啉-2-羧酸(QCA)特异性抗体、QCA标准品、包被有QCA与γ-氨基丁酸反应后与卵清蛋白偶联物的酶标板组成。检测时，样品经偏磷酸水解处理，释放QCA，MAX柱净化，丁胺衍生处理，采用间接竞争ELISA方法测定。本发明的方法及试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等优点，能同时快速检测大批样品，组织最低检测限为0.6μg/kg。
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公开(公告)号：CN101323599B
公开(公告)日：2010-11-03
申请号：CN200810048645.7
申请日：2008-07-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D241/52 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于药物合成领域，具体涉及一种饲料添加剂2-甲酰氰基乙酰腙-喹噁啉-1，4-二氧化物(喹赛多)的化学合成方法。本发明的步骤包含以苯并氧化呋咱为原料，N，N-二甲基甲酰胺为反应介质，在催化剂吡咯烷的作用下与丙酮醛缩二甲醇反应，合成中间体喹噁啉-1，4-二氧-2-甲醛缩二甲醇；将该中间体在甲醇和浓盐酸中进行醇解，与氰乙酰肼反应合成最终产物2-甲酰氰基乙酰腙-喹噁啉-1，4-二氧化物(喹赛多)。本发明反应条件温和，原料廉价易得，所用试剂均为低毒或无毒，合成产品收率较高，纯度较好，适于工业化条件下的扩大生产。
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公开(公告)号：CN101016267B
公开(公告)日：2010-08-11
申请号：CN200710051391.X
申请日：2007-01-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D241/44
Abstract: 本发明属于化学合成技术领域，具体涉及一种3-甲基喹喔啉-2-羧酸的化学合成方法。以2-[(N-2-羟乙基)氨基甲酰]-3-甲基喹喔啉-1，4-二氧化物(喹乙醇)为原料，用还原剂碘化钾或连二亚硫酸钠还原，产物用碱水解，再用酸调节其pH，得到目标产物3-甲基喹喔啉-2-羧酸。本发明的合成方法具有反应步骤少、原料价廉易得、收率高、易操作、反应条件温和等优点。
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