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公开(公告)号：CN103421892B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310198811.2
申请日：2013-05-24
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明属细菌耐药性分子检测领域。涉及一种鉴别空肠弯曲杆菌及其大环内酯类耐药突变的多重实时荧光PCR方法。设计了特异性的引物和MGB探针及其组合，不仅能够特异性鉴定空肠弯曲杆菌，而且可同时检测空肠弯曲杆菌23SrRNA基因第2074和2075位的核苷酸突变以及核糖体蛋白L4鞭毛基因rplD上第170和221位的核苷酸突变。首次在同一反应体系里，实现了对空肠弯曲杆菌的特异性鉴定和对多种大环内酯类耐药突变点的快速检测。本发明极大地缩短了临床空肠弯曲杆菌鉴定和耐药性检测的时间，为临床感染的治疗用药和空肠弯曲杆菌耐药性监测提供了新的手段。
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公开(公告)号：CN103897046A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201310196144.4
申请日：2013-05-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/32 , G01N33/68 , G01N33/543
CPC classification number: C07K14/32 , G01N33/566 , G01N33/9446
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种β-内酰胺类抗生素残留检测的受体分析方法与试剂盒及应用。本发明的试剂盒含可同时检测15种β-内酰胺类药物残留的受体蛋白。本发明的受体蛋白BlaR-CTD是由大肠杆菌(Escherichia？coli)BlaRC所表达，包含受体蛋白BlaR-CTD的大肠杆菌保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC？NO：M2013173。本发明还公开了受体蛋白、酶标药物的制备方法和受体分析方法。本发明的试剂盒可同时检测青霉素类和头孢菌素类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简便、快速、灵敏和准确等突出优点。
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公开(公告)号：CN102768279B
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210177239.7
申请日：2012-05-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种胶体金试纸条，该试纸条由吸收垫、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次层叠粘贴在塑料衬板上构成，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述金标垫包被有胶体金标记的能识别磺胺类药物的单克隆抗体，所述检测线包被有磺胺包被原，所述质控线包被有羊或兔抗鼠IgG。本发明还公开了一种胶体金试纸条的使用方法及其在磺胺类药物残留检测中的应用。本发明的胶体金试纸条可用于对牛奶、猪肉、鸡肉、牛肉、羊肉、鱼肉、虾肉、猪肝、鸡肝、鸡蛋和蜂蜜等组织样品进行磺胺类药物残留检测，能同时检测16种磺胺类药物，具有检测灵敏度高，特异性强，操作简便，快速准确和费用低廉的特点。
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公开(公告)号：CN103592167A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310578673.0
申请日：2013-11-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种基于荧光素酶标记基因工程菌的氟喹诺酮类药物残留的检测方法和应用。本发明包含一种能同时检测11种氟喹诺酮类药物残留的荧光素酶标记基因工程菌的构建及应用。该工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)pK12，保藏号为CCTCC NO：M2013385，由含有recA启动子和荧光素酶报告基因luxCDABE的质粒pRecAlux3转化大肠杆菌K12所得。与现有技术相比，本发明构建的基因工程菌可以同时识别多种氟喹诺酮类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简单、快速、灵敏、准确和半定量功能等突出优点。
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公开(公告)号：CN103570631A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201310589520.6
申请日：2013-11-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D239/49 , C07B59/00
CPC classification number: C07D239/49
Abstract: 本发明属于放射性化学合成领域，具体涉及一种氚标记二甲氧苄啶的制备方法。二甲氧苄啶是一种抗菌增效剂。本发明以3,4-二甲氧基-5-溴-苯甲醛为原料，经过Knoevenagel反应和成环反应，合成得到5-溴-二甲氧苄啶，最后采用微量合成方法，以钯碳(Pd/C)为催化剂，5-溴-二甲氧苄啶与氚气发生还原脱溴反应，同时交换上氚，生成高比活度（22.08Ci/g）、高放化纯度（≥98%）和高化学纯度（≥98%）的5-3H-二甲氧苄啶。本发明合成的氚标记二甲氧苄啶作为放射性示踪剂可以为系统展开二甲氧苄啶在动物体内吸收、分布、代谢及残留消除规律研究提供物质基础，同时也为同类药物的氚标记提供了方法参考。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103424481A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310162769.9
申请日：2013-05-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及林可霉素、克林霉素和大观霉素的残留分析方法。林可胺类药物包括林可霉素、克林霉素，将上述药物与硅烷基化试剂进行衍生化反应，所得到的产物更容易气化。奔发明对反应的条件进行优化选择，结果表明，在75～85℃水浴中，林可霉素、克林霉素与硅烷基化试剂衍生化反应0.5～1.5h，室温冷却后，即可直接进行气相色谱质谱分析。最小检出量5μg/L，结果重现性良好，3个浓度，5次单独重复的变异系数小于17％。该方法各项指标均能满足该兽药残留量分析对检测水平的要求，灵敏度有较大的提高。
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公开(公告)号：CN103424478A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310159490.5
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种吡利霉素的残留检测方法。采用仲胺基化合物氢取代衍生反应高效液相色谱柱前衍生化反应分析。在室温下，衍生化试剂氯甲酸-9-芴基甲酯的浓度为10-2mol/L，将0.1mol/L的硼酸缓冲液调至pH为9，该反应为即时反应，由于只有一个仲胺作为单一的反应位点，不需加反应终止剂即可达到衍生化的目的，衍生产物稳定。衍生产物经高效液相色谱检测，衍生产物的紫外检测波长为266nm时有最大紫外强度，最小检出量为5μg/L，在20～4000μg/L范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，3个浓度、15次重复的变异系数小于8％。
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公开(公告)号：CN103421857A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210246635.0
申请日：2012-07-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12P17/18 , C07D493/10 , C12R1/77
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明属于生物毒素合成技术领域，与生物发酵技术领域有关。本发明以大米颗粒为原料，经接种镰刀菌复苏、产分生孢子、分生孢子接种大米产毒培养基培养，培养基甲醇液提取、饱和、萃取、柱层析、水解和结晶等工艺过程，制备出一种单端孢酶类毒素-3Ac-DON和DON毒素结晶。一次结晶后毒素经核磁和质谱结构鉴定准确无误，含量不低于94%。传统提取工艺相比，本发明的一步法柱层析即可分离纯化出3Ac-DON毒素，步骤简单快捷产量高，制备的毒素性质稳定纯度高，显著降低了毒素合成成本，合成的3Ac-DON毒素经一步水解可得到DON，整个过程操作避免了色素干扰，简单，省时省力。得到的两种毒素均可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素领域。
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公开(公告)号：CN103421060A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310162855.X
申请日：2013-05-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07H15/26 , C07H19/044 , C07H1/00 , G01N30/06
Abstract: 本发明属于兽药残留分析技术领域，公开了一种氨基苷类化合物与邻苯二甲醛柱后衍生化反应检测分析方法。氨基苷类化合物与邻苯二甲醛发生反应，形成荧光试剂，具有独特的激发波长和发射波长。对该反应的条件进行优化选择，结果表明，在碱性条件下，氨基苷类化合物与邻苯二甲醛极易发生快速反应，适合柱后衍生。衍生产物在λex＝235nm、λem＝465nm时具有最大的荧光强度。最小检出量为10μg/L，结果重现性良好，4个浓度，5次单独重复的变异系数小于15％。本发明各项指标均能满足氨基苷类抗生素残留量分析对检测水平的要求，灵敏度有较大的提高。
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公开(公告)号：CN103420928A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210551221.9
申请日：2012-12-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D241/52 , C07B59/00
Abstract: 本发明属于兽药制备技术领域，具体涉及一种兽药喹烯酮的氚标记和氘标记制备方法。本发明采用微量合成方法，使氚气或氘气与4-溴-2-硝基苯胺或4-碘-2-硝基苯胺在催化剂和酸接受体作用下发生脱卤反应，同时交换上氚或氘，生成4-3H-2-硝基苯胺或4-2H-2-硝基苯胺；再经过氧化反应、Beirut反应、醛酮缩合反应，采用微量合成方法，制得制得C-6位氚或氘标记喹烯酮。获得的产物标记位点明确，比活度高，放化纯度达98以上，化学纯度达99.5％以上。本发明所制备的氚标记喹烯酮为系统开展喹烯酮在动物体内吸收、分布、代谢及残留消除规律研究提供了物质基础，同时制备的氘标记可作为喹烯酮痕量定性、定量分析方法研究的内标物质。
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