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公开(公告)号：CN113462697A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202010235661.8
申请日：2020-03-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了一种降解型抗草甘膦基因、植物表达载体、降解型抗草甘膦转基因水稻的培育方法和应用，属于植物基因工程技术领域，所述降解型抗草甘膦基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。培育得到的降解型抗草甘膦水稻，其外源基因插入位点的侧翼序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供的降解型抗草甘膦基因具有降解草甘膦的作用。本发明提供的降解型抗草甘膦基因与原基因BceGO‑B3S1(SEQ ID No.6)编码的氨基酸序列完全相同；亮氨酸和谷氨酸等氨基酸的最优密码子使用频率提高。
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公开(公告)号：CN110951702B
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911332024.6
申请日：2019-12-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及水稻DMNT和TMTT合成相关蛋白OsCYP92C21及其编码基因与应用。本发明所提供的水稻DMNT和TMTT合成相关蛋白OsCYP92C21的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，编码该蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，本发明的水稻萜烯同系物合成酶基因OsCYP92C21转入水稻中并与DMNT和TMTT前体合酶PTH3‑PlTPS4转基因植株杂交后得到的双基因聚合水稻，与野生型水稻相比，获得的转基因水稻能够释放出较多的DMNT和TMTT，并且显著吸引二化螟盘绒茧蜂，对水稻合成DMNT和TMTT以及培育新型抗虫水稻具有重要的理论和应用意义。
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公开(公告)号：CN111139228B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201911422900.4
申请日：2019-12-31
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种通过基因突变技术对来源于甘蓝型油菜的EPSPS酶进行定向进化，以对其草甘膦抗性进行改良，并公开该突变体及其编码基因在新型耐草甘膦作物培育领域中的应用。本发明所述抗草甘膦植物EPSPS酶双突变体，通过体外定向进化技术改造甘蓝型油菜EPSPS基因BnEPSPS，使之对草甘膦抗性的提高，进而获得具有草甘膦抗性的植物来源的EPSPS双突变体BnEV1和BnEV2。突变体BnEV1和BnEV2酶学性质测定表明草甘膦耐受性显著提升，并验证其应用到植物中提高植物的抗性，可为培育消费者更易接受的转基因抗草甘膦油菜新品种，提供重要的遗传资源，具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN110144360B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201910491005.1
申请日：2019-06-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/53 , C12N9/04 , C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04 , C12N15/82 , C12N15/11 , A01H5/00 , A01H5/10 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种二化螟SDR基因及其编码的蛋白质和应用、dsRNA及其扩增的引物对和应用，属于昆虫基因工程技术领域，所述二化螟SDR基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本发明提供的二化螟SDR基因参与了二化螟的生长发育过程，该基因的缺失显著提高了二化螟幼虫的死亡率。在本发明中，所述二化螟SDR基因的dsRNA抑制二化螟SDR基因的表达。
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公开(公告)号：CN110951770A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911205309.3
申请日：2019-11-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明提供一种简单快速高效的CRISPR/Cas9载体构建方法及应用，包括：构建骨架载体并对骨架载体进行线性化处理得到线性化的骨架载体，制备靶点引物后将所述靶点引物接入所述线性化的骨架载体中得到连接产物，将所述连接产物转接至大肠杆菌后得到阳性CRISPR/Cas9载体；其中，所述骨架载体连接有OsU3启动子或OsU6b启动子、gRNA1及Bsa I酶切位点，所述gRNA1上5’端的碱基5’-gtttt-3’被删除；所述靶点引物可包含一个或多个靶点引物片段，并通过粘性末端设计与骨架载体连接。本发明的有益效果是该方法适用于单双靶点CRISPR/Cas9载体的构建；利用Bsa I线性化的载体和酶切回收的外源片段可以长期存放于，用于大量CRISPR/Cas9载体构建。本载体系统构建CRISPR/Cas9降低了外源片段突变概率，可以确保重组质粒测序正确率为100％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110699374A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201810522008.2
申请日：2018-06-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。涉及一种抗草甘膦油菜的培育方法。构建包含目标基因I.variabilis-EPSPS*的表达载体pTGH-1，利用农杆菌介导的遗传转化将转化载体导入甘蓝型油菜受体细胞中，在含有草甘膦的愈伤组织诱导培养基上筛选得到抗性愈伤组织；将抗性愈伤组织转移至分化培养基上诱导分化，当分化的外植体上再生出完整的芽时，置于生根培养基上得到再生苗。提取T0代转基因植株叶片总DNA，通过Southern杂交鉴定基因的拷贝数，发展单拷贝植株为株系，挑选转基因纯合株系进行抗草甘膦试验，利用侧翼序列进行反向PCR和Tail-PCR，筛选出对抗草甘膦抗性好、农艺性状与原品种没有差别的甘蓝型油菜。
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公开(公告)号：CN110195067A
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201910491859.X
申请日：2019-06-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及一种抗草铵膦油菜的培育方法。本发明将抗草铵膦基因Syn1-Rep导入受体甘蓝型油菜基因组中，外源基因能在后代中稳定遗传并保持相应的抗草铵膦除草剂特性，可节省劳动力资源，提高油菜种植效益，同时对环境友好。其技术要点包括：获取外源基因Syn1–Rep片段；构建表达载体，并与外源基因连接，得到重组载体；将重组载体导入大肠杆菌DH5α中验证；提取验证成功的质粒，导入农杆菌菌株中，得到转化工程菌；利用农杆菌介导的遗传转化方法将转化工程菌导入到植物组织中；转基因植株检测。
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公开(公告)号：CN110093349A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910375501.0
申请日：2019-05-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一组利用CRISPR/Cas9系统特异性剪切水稻xal3基因启动子的sgRNA及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明所述sgRNA包括g1RNA和g2RNA；所述g1RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述g2RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用本发明提供的sgRNA组合构建得到的重组表达载体转染水稻植株，能特异性地将xal3基因的启动子区域149nt进行缺失，从而使水稻体内xal3基因失去被白叶枯病菌诱导表达的能力，使缺失该启动子片段的转基因水稻对白叶枯病菌表现出抗性。另外，本发明提供的方法不影响转基因水稻的其他性状，转基因水稻育性良好。
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公开(公告)号：CN108546704A
公开(公告)日：2018-09-18
申请号：CN201810368609.2
申请日：2018-04-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12Q1/6895 , A01H1/02 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明涉及植物育种领域，具体涉及一种无功能的OsC1基因及其应用。本发明所述无功能的OsC1基因的基因型为Hap 2，在OsC1基因的第791-800bp位置发生10bp缺失。本发明还提供了上述无功能OsC1基因在去除叶片花青素中的应用，利用分子标记技术结合常规育种流程，将无功能的OsC1基因导入叶片中含花青素的黑米品种中，可以特异性去除叶片中花青素的积累，但不影响黑米种子中花青素的含量。
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公开(公告)号：CN108277209A
公开(公告)日：2018-07-13
申请号：CN201710008580.2
申请日：2017-01-05
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种控制水稻耐冷性的基因及其应用。从水稻中分离了一种受冷胁迫诱导的基因OsCPK24，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO：2所示。将OsCPK24的CDS克隆到pC1300s上，得到超表达载体；将含有SEQ ID NO：3的序列克隆到pDS1301上，得到RNAi抑制表达载体，分别转入水稻品种日本晴中，获得OsCPK24超表达转基因系和抑制表达系。冷胁迫下，获得的超表达转基因系存活率比野生型要高，抑制转基因系存活率比野生型要低，表明OsCPK24基因具有调节水稻耐冷性的功能。本发明为植物和水稻抗寒育种提供了新的资源。
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