公开(公告)号：CN110699374A

公开(公告)日：2020-01-17

申请号：CN201810522008.2

申请日：2018-06-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 周永明 ,  李杰华 ,  黄会斌 ,  林拥军 ,  刘子铎 ,  范楚川 ,  張椿雨

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6895 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。涉及一种抗草甘膦油菜的培育方法。构建包含目标基因I.variabilis-EPSPS*的表达载体pTGH-1，利用农杆菌介导的遗传转化将转化载体导入甘蓝型油菜受体细胞中，在含有草甘膦的愈伤组织诱导培养基上筛选得到抗性愈伤组织；将抗性愈伤组织转移至分化培养基上诱导分化，当分化的外植体上再生出完整的芽时，置于生根培养基上得到再生苗。提取T0代转基因植株叶片总DNA，通过Southern杂交鉴定基因的拷贝数，发展单拷贝植株为株系，挑选转基因纯合株系进行抗草甘膦试验，利用侧翼序列进行反向PCR和Tail-PCR，筛选出对抗草甘膦抗性好、农艺性状与原品种没有差别的甘蓝型油菜。

公开(公告)号：CN110699374B

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN201810522008.2

申请日：2018-06-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 周永明 ,  李杰华 ,  黄会斌 ,  林拥军 ,  刘子铎 ,  范楚川 ,  張椿雨

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6895 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。涉及一种抗草甘膦油菜的培育方法。构建包含目标基因I.variabilis‑EPSPS*的表达载体pTGH‑1，利用农杆菌介导的遗传转化将转化载体导入甘蓝型油菜受体细胞中，在含有草甘膦的愈伤组织诱导培养基上筛选得到抗性愈伤组织；将抗性愈伤组织转移至分化培养基上诱导分化，当分化的外植体上再生出完整的芽时，置于生根培养基上得到再生苗。提取T0代转基因植株叶片总DNA，通过Southern杂交鉴定基因的拷贝数，发展单拷贝植株为株系，挑选转基因纯合株系进行抗草甘膦试验，利用侧翼序列进行反向PCR和Tail‑PCR，筛选出对抗草甘膦抗性好、农艺性状与原品种没有差别的甘蓝型油菜。