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公开(公告)号：CN117965500B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410363299.0
申请日：2024-03-28
Applicant: 北京理工大学
IPC: C12N9/24 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/80 , C12N1/19 , C12N1/15 , C12P19/44 , C12P19/60 , C12R1/84 , C12R1/67
Abstract: 本发明一种α‑L鼠李糖苷酶AfRhase及其产品、应用和生产工艺属于基因工程及生物医药技术领域。本发明提供的一种α‑L鼠李糖苷酶AfRhase的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供基于所述α‑L鼠李糖苷酶AfRhase及其基因的重组表达载体、转化体，以及它们在生产药效活性成分方面的应用和药物生产工艺。本发明提供的α‑L鼠李糖苷酶AfRhase能够高效生产羟基红景天苷，并高效转化芦丁、柚皮苷、橙皮苷和朝霍定C，具有良好的工业化应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN115418323B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202211220324.7
申请日：2022-10-08
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“一种巴斯德毕赤酵母菌株AtAc3及其应用、发酵剂与甘草次酸制备方法”，属于微生物技术领域。本发明提供一种巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株AtAc3，其保藏编号为CGMCC No.25102。本发明还提供菌株AtAc3在水解单葡萄糖醛酸甘草次酸和/或水解甘草酸方面的用途，基于该菌株AtAc3的制备甘草次酸的发酵剂和方法。本发明菌株AtAc3的对甘草酸的转化率高达96.58％，具有转化效率高、中间产物积累量少、发酵黏度低等优点，为绿色生产甘草次酸的工业应用奠定了重要基础。
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公开(公告)号：CN109706091B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201811564910.7
申请日：2018-12-20
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“一种工业生产甘草次酸的工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix及方法”，属于酶工程及微生物技术领域。所述工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix的保藏号为CGMCC No.16731。同时基于所述工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix本发明还提供一种工业化生产甘草次酸的方法，其包括：采用工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix对底物进行催化反应。本发明的工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix性能优良、可用于工业生产GA且GA得率高达94.9％，为甘草次酸大规模工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号：CN108410839B
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN201810071464.X
申请日：2018-01-24
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一株热稳定性提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体，属于生物工程领域。将来源于嗜松篮状菌Talaromyces pinophilum Li‑93(保藏号:CGMCC No.11765)的β‑葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第212位缬氨酸、220位苏氨酸、238位半胱氨酸及348位缬氨酸均突变为精氨酸，并对该酶N端23个氨基酸进行截除，将突变基因的重组质粒转入毕赤酵母GS115中进行表达，得到热稳定性提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体在55℃和70℃条件下的半衰期较野生型延长81min和25min，为野生型的3倍和2.3倍。并利用该突变体建立了高温转化GL的工艺。本发明所得到的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN104694543A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201510060877.4
申请日：2015-02-05
Applicant: 北京理工大学
IPC: C12N15/115 , C12N9/24 , C12N11/14
Abstract: 本发明提供了一组β-葡萄糖醛酸苷酶核酸适配体及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明采用SELEX技术结合Ni2+修饰的磁珠的筛选方法，以β-葡萄糖醛酸苷酶PGUS-E为筛选靶标，筛选获得能够特异性结合PGUS-E的核酸适配体SEQ ID No.1和SEQ ID No.2。在核酸适配体与β-葡萄糖醛酸苷酶PGUS-E特异性结合的基础上，可用于检测、分离、纯化及固定化β-葡萄糖醛酸苷酶。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101603057A
公开(公告)日：2009-12-16
申请号：CN200910089427.2
申请日：2009-07-20
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明提供了一种生物法合成1，3－丙二醇的生产工艺，属于生物化工技术领域。本发明采用微生物好氧发酵，以兼性厌氧的克雷伯氏肺炎杆菌为出发菌株，依次含有以下步骤：克雷伯肺炎杆菌的种子活化；好氧条件下种子培养；微好氧条件下，以上述克雷伯肺炎杆菌菌体为生物催化剂，在发酵温度30～50℃，pH 7.0～9.0条件下，以葡萄糖辅助的甘油培养基进行发酵生产1，3－丙二醇，发酵18～36h后结束发酵。利用本发明方法合成1，3－丙二醇具有生产周期短，生产强度高，发酵控制简单，操作方便，成本低的特点。
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公开(公告)号：CN119570760A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202510130783.3
申请日：2025-02-05
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明一种荧光传感器蛋白设计方法及其产品和检测方法属于生物技术领域。所述荧光传感器蛋白设计方法的特征是，蛋白的变构结构域两端的氨基酸距离在10Å以下，距离变化在2Å以上。基于该设计方法，本发明还提供一种荧光传感器蛋白及其基因、重组表达载体、转化体和荧光传感器及高通量实时检测胞内代谢产物的方法，荧光传感器蛋白包括变构后的甾醇O‑酰基转移酶和循环荧光蛋白cpEGFP；变构后的甾醇O‑酰基转移酶具有如SEQ ID NO. 1所示的氨基酸序列；循环荧光蛋白cpEGFP具有如SEQ ID NO. 2所示的氨基酸序列。该荧光传感器蛋白应用于胞内固醇类物质的浓度检测，检测更为实时，为相关代谢流的解析提供更为精准的工具。
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公开(公告)号：CN115786133A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211228897.4
申请日：2022-10-08
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明一株热焦曲霉菌株CLH‑22及其用途、发酵剂和制备3‑氧代甘草次酸的方法，属于微生物与生物技术领域。本发明提供一株热焦曲霉(Aspergillus calidoustus)菌株CLH‑22，其保藏编号为：CGMCC No.40213。本发明还提供该菌株CLH‑22在制备3‑氧代甘草次酸方面的用途以及基于该菌株的发酵剂和制备3‑氧代甘草次酸的方法。本发明的菌株CLH‑22，具有底物特异性强，转化效率高，无副产物生成的特点，在常规条件下制备3‑O‑GA产率为94.6％，为目前最高水平。本发明填补了国内3‑O‑GA产品的生产空缺，为制备3‑O‑GA提供了一种简单有效的方法。
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公开(公告)号：CN109628427B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201811564903.7
申请日：2018-12-20
Applicant: 北京理工大学
IPC: C12N9/24 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P33/00 , C12R1/19 , C12R1/84
Abstract: 本发明“一种高效制备甘草次酸的重组酶及方法”，属于酶工程领域。所述重组酶包括来源于土曲霉的β‑葡萄糖醛酸苷酶AtGUS的TIM桶结构域、及来源于米曲霉的β‑葡萄糖醛酸苷酶PGUS的糖基结构域SBD和免疫球蛋白状β‑三明治结构域IMD。该重组酶AtGUS‑mix性状优良，60℃下的热稳定性比野生酶AtGUS高550％，且比酶活比野生酶AtGUS和PGUS分别高2和6.9倍。重组酶AtGUS‑mix的底物转化率达到95.06％，GA的收率达到98.82％。产物GA终浓度为19.22mM，是野生酶PGUS的5.7倍、AtGUS的2.6倍。
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公开(公告)号：CN110358754B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201910023085.8
申请日：2019-01-10
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明涉及一种提高毕赤酵母表面展示β‑葡萄糖醛酸苷酶活性的方法。该方法包括：(1)将来自于酿酒酵母基因组的Agα1蛋白的编码基因与来源于米曲霉β‑葡萄糖醛酸酶(PGUS)的编码基因融合，导入到毕赤酵母细胞中，得到通过Agα1表面展示PGUS的重组酵母细胞；(2)将来自于酿酒酵母基因组的Pir1蛋白的编码基因与PGUS的编码基因融合，导入(1)获得的重组毕赤酵母细胞中，得到Agα1与Pir1两种锚定蛋白共同展示PGUS的重组酵母菌株。实验证明，这种方法能够显著增加毕赤酵母表面展示PGUS蛋白的量，且大幅提高了PGUS的稳定性。该方法解决了通过酶解法转化甘草酸为甘草次酸过程中存在的GUS不稳定与低效率的问题，同时对优化酵母表面展示效率的研究提供了方法指导。
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