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公开(公告)号:CN113684188B
公开(公告)日:2023-02-10
申请号:CN202110819767.7
申请日:2021-07-20
Applicant: 中国计量大学
Abstract: 本发明公开了苦楝树缩叶病毒全基因组序列及其检测方法。该病毒全基因组序列如序列表SEQNO:1所示;该病毒的全基因组序列包含编码gp1、gp2、gp3以及gpY四个蛋白的核苷酸序列,四个核苷酸序列分别如序列表SEQ NO:2‑5所示,gp1、gp2、gp3以及gpY的氨基酸序列分别如SEQ NO:6‑9所示。本发明还提供了检测所述苦楝树缩叶病毒的特异性检测引物,本发明设计的引物具有特异性强、结果可靠,在普通PCR检测中都有稳定可靠的表现。
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公开(公告)号:CN110169492B
公开(公告)日:2022-02-11
申请号:CN201910506563.0
申请日:2019-06-12
Applicant: 中国计量大学
IPC: A23K10/18 , A23K10/20 , A23K10/30 , A23K20/111 , A23K20/158 , A23K20/163 , A23K20/174 , A23K50/90 , A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种异色瓢虫幼虫人工饲料及其制备方法和应用。它的步骤如下:(1)将福寿螺卵块,置于匀浆器中,加入适量灭菌水匀浆,过滤去掉卵壳,作为A组分。(2)将复合维生素B和维生素C粉碎,过滤去掉大颗粒;(3)将葡萄糖、蔗糖、复合维生素B及维生素C放入烧杯中,加入蒸馏水溶解,作为B组分;(4)大豆粉、二化螟蛹粉和酵母粉混匀,作为C组分;(5)用水将琼脂加热融化,再加入山梨酸,蜂蜜,煮沸,冷却,加入胆固醇,作为D组分备用;(6)将A组分,B组分和C组分加在一起,搅拌均匀,再加入D组分,继续充分搅拌均匀。本发明具有价格低廉、经济实用、配制简便等特点,适于标准试虫的大规模、长期、继代饲养。
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公开(公告)号:CN110907368B
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN201911225846.4
申请日:2019-12-04
Applicant: 中国计量大学
IPC: G01N21/359 , G01N21/31 , G01N27/62 , G01N1/44
Abstract: 本发明公开了一种联合多种检测技术的龙井茶真伪识别方法,包括:a、茶叶样本光谱采集前的处理;b、茶叶样本近红外光谱的采集;c、测定不同产地龙井茶样品的氢、氧、氮、碳四种稳定同位素质谱数据;d、测定不同地域龙井茶的铯、铜、钙、铷四种微量元素数据;e、测定不同产地龙井茶样品的氨基酸数据;f、联合近红外、稳定同位素、微量元素、氨基酸数据建立不同产地龙井茶鉴别数据库;g、测定近红外特征光谱数据、稳定同位素质谱数据、微量元素数据和氨基酸数据,将测得数据代入上述PLSDA模型,若预测结果小于0,则判断待测样品为龙井茶产地外样品;若预测结果大于0,则判断待测样品为龙井茶产地内样品。
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公开(公告)号:CN113293232A
公开(公告)日:2021-08-24
申请号:CN202110576568.8
申请日:2021-05-26
Applicant: 中国计量大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了检测番茄环斑病毒的引物组合物、试剂盒及应用。所述引物组合物由引物ToBF1、引物ToBR1、引物ToDR1、引物ToMBR1和引物ToCPF1组成;本发明设计并筛选了具有高特异性的检测番茄环斑病毒的CPA引物组合物,建立了CPA的检测方法并提供了番茄环斑病毒的检测试剂盒。本发明提供的试剂盒和方法更快速、准确,特异性好,灵敏度高,实时荧光检测方法最低可以检测到浓度为5×10‑2ng/μL的番茄环斑病毒总RNA,核酸检测试纸条方法最低可以检测到浓度为0.5ng/μL的番茄环斑病毒总RNA。非常适用于医疗卫生、食品安全以及进出口检疫的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN110885370B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201911141647.5
申请日:2019-11-20
Applicant: 中国计量大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种分泌番茄环斑病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其抗体和抗体制备方法,其特征在于:以抗原肽CAFGKGVEEIEQTST免疫BALB/c小鼠,获得杂交瘤细胞株,并从中筛选出能够产生特异性识别该抗原肽单克隆抗体的细胞株,并通过腹水制备法获得特异性识别番茄环斑病毒外壳蛋白AFGKGVEEIEQTST肽段的单克隆抗体,该单克隆抗体重链可变区和轻链可变区长度分别为185个和103个氨基酸;单克隆抗体的产量为500‑5000mg/L腹水,纯度为85%‑99.5%。本发明单克隆抗体具有特异性识别番茄环斑病毒外壳蛋白的特性,在番茄环斑病毒进出口检验检疫方面具有广阔应用前景。
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公开(公告)号:CN111019950A
公开(公告)日:2020-04-17
申请号:CN201911130298.7
申请日:2019-11-18
Applicant: 中国计量大学
IPC: C12N15/12 , C07K14/435 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明公开了一种褐飞虱NlAtg1基因、编码蛋白及其应用。NlAtg1基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1 所示,该基因功能受到抑制会影响褐飞虱线粒体结构和功能,导致褐飞虱存活率下降。NlAtg1基因编码的蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述的NlAtg1基因或蛋白的应用,可以用于褐飞虱防治中新型RNA杀虫剂开发或以NlAtg1蛋白为把标的农药研发。本发明对该基因成功实施了RNA干扰,结果表明害虫的存活率下降,由于RNA干扰片段可以针对物种做特异设计,有望在实现抑制害虫的同时,减少对非靶标生物的杀伤,是一种环境友好型杀虫剂。
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公开(公告)号:CN110885370A
公开(公告)日:2020-03-17
申请号:CN201911141647.5
申请日:2019-11-20
Applicant: 中国计量大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种分泌番茄环斑病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其抗体和抗体制备方法,其特征在于:以抗原肽CAFGKGVEEIEQTST免疫BALB/c小鼠,获得杂交瘤细胞株,并从中筛选出能够产生特异性识别该抗原肽单克隆抗体的细胞株,并通过腹水制备法获得特异性识别番茄环斑病毒外壳蛋白AFGKGVEEIEQTST肽段的单克隆抗体,该单克隆抗体重链可变区和轻链可变区长度分别为185个和103个氨基酸;单克隆抗体的产量为500-5000mg/L腹水,纯度为85%-99.5%。本发明单克隆抗体具有特异性识别番茄环斑病毒外壳蛋白的特性,在番茄环斑病毒进出口检验检疫方面具有广阔应用前景。
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公开(公告)号:CN110845608A
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201911141637.1
申请日:2019-11-20
Applicant: 中国计量大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种番茄环斑病毒单克隆抗体及其制备方法,以抗原肽CQAAQQAGKNPFGRG免疫BALB/c小鼠,获得杂交瘤细胞株,并从中筛选出能够产生特异性识别该抗原肽单克隆抗体的细胞株,并通过腹水制备法获得特异性识别番茄环斑病毒外壳蛋白QAAQQAGKNPFGRG肽段的单克隆抗体,该单克隆抗体重链可变区和轻链可变区长度分别为181个和118个氨基酸;单克隆抗体的产量为500-5000mg/L腹水,纯度为85%-99.5%。本发明单克隆抗体具有特异性识别番茄环斑病毒外壳蛋白的特性,在番茄环斑病毒进出口检验检疫方面具有广阔应用前景。
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公开(公告)号:CN105462910B
公开(公告)日:2019-03-01
申请号:CN201510936494.9
申请日:2015-12-16
Applicant: 中国计量大学
Abstract: 本发明公开了一种在体外研究昆虫卵巢吸收外来微粒的方法。该方法首先解剖虫体获得卵巢,置于细胞培养基中,之后在上述培养基中加入外来微粒,进行外来微粒和昆虫卵巢的共培养,最后在显微镜下观察外来微粒进入昆虫卵巢的情况。利用本方法,可以研究昆虫卵巢吸收外来微粒的位置特异性;并可将外来微粒作为共生菌的对照,从而为在体外研究昆虫共生菌经卵垂直传播机制提供实验对照。
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公开(公告)号:CN107475780A
公开(公告)日:2017-12-15
申请号:CN201710874253.5
申请日:2017-09-25
Applicant: 中国计量大学
CPC classification number: C40B50/06 , C12Q1/6816 , C12Q2525/191 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,具体公开了一种低温胁迫下福寿螺SSH文库的构建、鉴定方法。方法包括如下步骤:(1)福寿螺低温胁迫处理;(2)福寿螺样品处理;(3)福寿螺组织总RNA提取;(4)反转录合成cDNA;(5)cDNA纯化;(6)cDNA酶切及纯化;(7)接头连接;(8)消减杂交;(9)差减PCR鉴定及纯化;(10)PCR产物与pMD18-T载体连接;(11)连接产物转化大肠杆菌DH5a;(12)文库鉴定;本发明方法所构建的低温胁迫下福寿螺SSH文库,为大量发现和研究入侵生物福寿螺的表达基因奠定基础。同时,本发明的SSH文库对于深入研究入侵生物福寿类的耐逆机制具有重要的理论及实际意义。
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