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公开(公告)号：CN112626075A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN201910948116.0
申请日：2019-10-08
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条参与调控丹参酮合成的AP2/ERF转录因子SmAP2/ERF152的编码基因序列；本发明提供的SmAP2/ERF152基因具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列。本发明检测了SmAP2/ERF152在丹参植株中的表达情况，发现其在丹参根和根的周皮部高丰度表达；亚细胞定位实验表明SmAP2/ERF152定位于细胞核；转录激活实验表明SmAP2/ERF152具有转录激活活性；构建了SmAP2/ERF152‑RNAi载体及SmAP2/ERF152‑过表达(SmAP2/ERF152‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在SmAP2/ERF152‑RNAi株系中，隐丹参酮和丹参酮IIA含量降低，而在SmAP2/ERF152‑oe株系中，隐丹参酮和丹参酮IIA的含量显著升高。本发明提供的SmAP2/ERF152具有正向调控丹参酮生物合成的功能，为利用生物技术提高丹参酮类化合物含量奠定基础。
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公开(公告)号：CN116103274B
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202211216081.X
申请日：2022-09-30
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明涉及了一种蛋白，包括如下1)‑3)所示：1)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示的序列具有相同功能，且通过取代缺失或增加一个或多个氨基酸而获得的序列；3)与SEQ ID NO.1所示的蛋白质具有相同功能，且N端或C端连接标签得到的融合蛋白质；还公开了AarTPS89基因在催化前体物质香叶基焦磷酸GPP生成龙脑基二磷酸，进一步通过磷酸酶的催化作用生成龙脑的应用；其中，AarTPS89基因序列如SEQ ID NO.2所示。
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公开(公告)号：CN115786294B
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202211212194.2
申请日：2022-09-30
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明涉及了一种蛋白，包括如下1)‑3)所示：1)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示的序列具有相同功能，且通过取代缺失或增加一个或多个氨基酸而获得的序列；3)与SEQ ID NO.1所示的蛋白质具有相同功能，且N端或C端连接标签得到的融合蛋白质；本发明从艾叶片中克隆得到AarBDH4基因，AarBDH4基因是首次从艾中得到的单萜类化合物樟脑生物合成的关键酶基因。通过实验证明：本发明的AarBDH4蛋白能够催化龙脑(Borneol)形成樟脑(Camphor)，对艾中樟脑类成分的合成研究、艾叶药材的品质提高、调节和生产植物单萜类化合物具有重要的理论及实际意义。
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公开(公告)号：CN113186205B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202010030601.2
申请日：2020-01-13
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP76AK5v2的编码基因序列；本发明所提供的CYP76AK5v2基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP76AK5v2在丹参组织中的表达情况，发现其在丹参根和根周皮高丰度表达；构建了CYP76AK5v2‑RNAi载体及CYP76AK5v2‑过表达(CYP76AK5v2‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP76AK5v2‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP76AK5v2‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP76AK5v2具有反调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究有助于解析植物次生代谢途径分子机制，为丹参酮的合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN108893482B
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN201810647879.7
申请日：2018-06-22
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了一条主要催化合成丹参中倍半萜类化合物反式橙花叔醇和单萜类化合物桧烯、β‑月桂烯等的萜类合酶基因序列(SmTPS8)；本发明所提供的SmTPS8基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明利用获得的SmTPS8基因序列，通过检测该基因的催化产物，验证基因功能。结果表明SmTPS8在丹参转基因植株中主要具有单萜合酶活性，而在大肠杆菌中主要具有倍半萜合酶活性。反式橙花叔醇([E]‑nerolidol)具有较强的香气和生物活性，是医药、食品、香料和化妆品工业的重要原料。本发明为基于SmTPS8基因功能的丹参萜类次生代谢途径研究奠定基础，有利于开发SmTPS8催化合成的倍半萜化合物、单萜类化合物在医药、香料以及生物防治方面的商业用途。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108893483B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN201810648181.7
申请日：2018-06-22
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本申请公开了一条主要参与合成丹参挥发性产物石竹烯等多种倍半萜的萜类合酶基因序列(SmTPS11)；本申请提供的SmTPS11基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列以及SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。基于丹参基因组和转录组数据获得SmTPS11基因，通过构建pET28a‑SmTPS11原核表达载体，在大肠杆菌体内检测SmTPS11的催化产物，验证SmTPS11的功能。结果证明SmTPS11具有催化合成石竹烯等多种倍半萜的功能。SmTPS11具有催化产生丹参石竹烯的功能。本申请为明确丹参中挥发性成分石竹烯合成的分子机制奠定基础，有利于利用SmTPS11进行定向且大量合成石竹烯，用于开发该化合物的商业用途及其在生物防治方面的应用。
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公开(公告)号：CN108795915B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN201810647880.X
申请日：2018-06-22
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了一条参与合成丹参次生代谢产物——β‑榄香烯的萜类合酶基因序列(SmTPS21)；本发明所提供的SmTPS21基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明基于丹参基因组注释数据获得SmTPS21基因，通过构建pET28a‑SmTPS21原核表达载体，在大肠杆菌(Escherichia coli，E.coli)体内验证SmTPS21的催化功能，结果证明SmTPS21酶具有主要催化合成β‑榄香烯等倍半萜类化合物的功能。本实验提供的SmTPS21具有在E.coli中主要催化产生β‑榄香烯化合物的功能。已有研究表明β‑榄香烯具有直接杀伤肿瘤细胞或干扰肿瘤细胞生长代谢的功能。本发明为开展丹参萜类合酶基因功能鉴定及应用SmTPS21催化生产β‑榄香烯的研究奠定基础，有利于促进医药产品研发。
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公开(公告)号：CN112143742A
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910571191.X
申请日：2019-06-28
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因序列；本发明所提供的CYP72A395基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP72A395的转录表达谱，发现其在丹参花和根周皮高丰度表达；构建了CYP72A395‑RNAi载体及CYP72A395‑过表达(CYP72A395‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP72A395‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP72A395‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP72A395具有负调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究为提高丹参中丹参酮产量提供了新思路，并为丹参酮合成生物学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN108893483A
公开(公告)日：2018-11-27
申请号：CN201810648181.7
申请日：2018-06-22
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
Abstract: 本发明公开了一条主要参与合成丹参挥发性产物石竹烯等多种倍半萜的萜类合酶基因序列(SmTPS11)；本发明所提供的SmTPS11基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明基于丹参基因组和转录组数据获得SmTPS11基因，通过构建pET28a-SmTPS11原核表达载体，在大肠杆菌体内检测SmTPS11的催化产物，验证SmTPS11的功能。结果证明SmTPS11具有催化合成石竹烯等多种倍半萜的功能。本发明提供的SmTPS11具有催化产生丹参石竹烯的功能。石竹烯在驱除蚊虫、抗炎、抗焦虑、抗抑郁、镇咳、祛痰、镇痛、芳香剂等方面有显著作用。本发明为明确丹参中挥发性成分石竹烯合成的分子机制奠定基础，有利于利用SmTPS11进行定向且大量合成石竹烯，用于开发该化合物的商业用途及其在生物防治方面的应用。
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公开(公告)号：CN108795960A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810647877.8
申请日：2018-06-22
Applicant: 中国医学科学院药用植物研究所
CPC classification number: C12N9/88 , C12N15/70 , C12P5/002 , C12Y402/03
Abstract: 本发明公开了一条主要参与合成丹参次生代谢产物姜烯等多种倍半萜合成的萜类合酶基因序列(SmTPS3)；本发明所提供的SmTPS3基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明基于丹参的基因组和转录组数据获得SmTPS3基因序列，通过构建pET28a‑SmTPS3原核表达载体，在大肠杆菌体内检测SmTPS3的催化产物，验证SmTPS3的基因功能。研究结果表明，SmTPS3具有催化合成多种倍半萜类化合物的功能。本发明提供的SmTPS3具有催化产生姜烯、α‑佛手柑油烯、β‑倍半水芹烯等多种倍半萜类化合物的功能。姜烯具有抗病毒、抗生育、抗溃疡等多种活性，还可作为食品调味剂和化妆品的原料；佛手柑精油在缓解焦虑、抑郁等情绪中具有良好疗效。本发明为基于丹参萜类合酶基因合成倍半萜类化合物的研究奠定基础，促进基于SmTPS3催化合成的产物——姜烯、α‑佛手柑油烯等倍半萜类化合物的药物研发和产业开发。
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