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    一种生产莽草酸的重组菌株及其制备方法与应用
    23.
    发明公开
    一种生产莽草酸的重组菌株及其制备方法与应用 有权

    公开(公告)号：CN106282078A

    公开(公告)日：2017-01-04

    申请号：CN201510317035.2

    申请日：2015-06-10

    Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    Inventor： 朱宝泉 ,  刘向磊 ,  林军 ,  胡海峰 ,  周斌

    IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/42 ,  C12R1/19

    Abstract: 本发明提供了一种生产莽草酸的重组菌株及其制备方法与应用。所述重组菌株自身不包含下述基因：aroK、aroL、tyrR与ptsHIcrr；其ptsHIcrr位点与tyrR位点包含下述基因：aroG、aroB、tktA、aroE、glk、galP和ppsA，所述基因aroG、aroB、tktA、aroE、glk、galP和ppsA转录表达由大肠杆菌内具有活性的启动子驱动，由大肠杆菌内具有活性的终止子终止。所述应用包括：发酵培养所述重组大肠杆菌菌株，获得莽草酸；发酵培养基中葡萄糖与甘油的质量比为1∶5～5∶1。本发明重组菌株莽草酸的发酵产量高，生产莽草酸时无需抗生素及诱导剂，生产成本低，工艺简单。

    一种麦角固醇类化合物的制备方法和纯化方法
    24.
    发明公开
    一种麦角固醇类化合物的制备方法和纯化方法 有权

    公开(公告)号：CN106032547A

    公开(公告)日：2016-10-19

    申请号：CN201510104892.4

    申请日：2015-03-10

    Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    Inventor： 朱宝泉 ,  杨丽鸳 ,  林军 ,  胡海峰 ,  周斌

    IPC: C12P33/00 ,  C07J9/00 ,  C12R1/77

    Abstract: 本发明公开了一种如式I所示的5,8-(14),22-三烯-7-酮,3-羟基,(3β,22E)麦角固醇的制备方法，其包括下列步骤：将镰刀菌(Fusarium)的种子液接种进行发酵培养，得发酵液；其中，发酵培养的时间为144～240h；发酵培养基包括20～40g/L葡萄糖、10～30g/L(NH4)SO4、5～15g/L酵母提取物、0.5～2g/LMgSO4·7H2O和0～1g/LFeSO4·7H2O。本发明的制备方法和纯化方法均工艺简单、条件温和环境友好、成本低、生产周期短、可在人工控制的条件下实现大规模生产、利于工业化。本发明的纯化方法能够获得HPLC纯度在90％以上的目标化合物，纯度高。

    一种菌丝霉素及其基因和制备方法
    25.
    发明授权
    一种菌丝霉素及其基因和制备方法 失效

    公开(公告)号：CN103374579B

    公开(公告)日：2016-06-29

    申请号：CN201210109366.3

    申请日：2012-04-13

    Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    Inventor： 胡又佳 ,  谢丽萍 ,  梁文 ,  张伟 ,  朱宝泉

    IPC: C12N15/31 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K1/36 ,  C07K1/22 ,  C07K1/20 ,  C12R1/19

    Abstract: 本发明公开了一种菌丝霉素及其基因和制备方法。所述的菌丝霉素的基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示。本发明公开了菌丝霉素融合蛋白的基因序列、氨基酸序列、包含该基因的重组表达载体以及包含编码菌丝霉素融合蛋白基因的重组表达转化体；所述融合蛋白基因序列中含His-tag和TEV酶的酶切位点。所述菌丝霉素的制备方法包括以下步骤：培养本发明所述的重组表达转化体；分离纯化所得的菌丝霉素融合蛋白；加入TEV酶进行酶切；分离纯化得到菌丝霉素蛋白即可。本发明使菌丝霉素表达量大大提高，分离纯化也更简单易行。本发明纯化得到的菌丝霉素可以有效抑制革兰氏阳性菌枯草杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的生长。

    一种顶头孢霉噻唑合成酶及其基因和应用
    26.
    发明公开
    一种顶头孢霉噻唑合成酶及其基因和应用 无效

    公开(公告)号：CN104946672A

    公开(公告)日：2015-09-30

    申请号：CN201410114940.3

    申请日：2014-03-25

    Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    Inventor： 胡又佳 ,  刘艳 ,  谢丽萍 ,  朱宝泉 ,  张伟 ,  龚桂花

    IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15 ,  C12P35/06 ,  C12R1/645

    Abstract: 本发明公开了一种顶头孢霉噻唑合成酶及其基因和应用。该基因是一种分离的核酸，其是(1)由序列表中SEQ ID No:1所示核苷酸序列组成的核酸；(2)编码如序列表中SEQ ID No:2所示氨基酸序列组成的蛋白质，一种分离的蛋白质，由序列表中SEQ ID No:2所示氨基酸序列组成。本发明还公开了一种包含如上所述核酸的重组表达载体，一种包含如上所述重组表达载体的重组表达转化体，上述重组表达载体以及重组表达转化体在制备头孢霉素C中的应用以及一种产头孢霉素C菌株的培养方法。本发明公开的顶头孢霉噻唑合成酶基因及其编码的蛋白质能够有效地调节头孢菌素C的合成速率和产量，具有很好的工业应用前景。

    一种二噁英类化合物的制备方法、纯化方法及应用
    28.
    发明公开
    一种二噁英类化合物的制备方法、纯化方法及应用 失效

    公开(公告)号：CN104805147A

    公开(公告)日：2015-07-29

    申请号：CN201410036260.4

    申请日：2014-01-26

    Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    Inventor： 朱宝泉 ,  陈乙铨 ,  林军 ,  舒永志 ,  胡海峰 ,  周斌

    IPC: C12P17/06 ,  C07D319/06 ,  A61K31/366 ,  A61P31/16 ,  C12R1/66

    Abstract: 本发明公开了一种二噁英类化合物的制备方法、纯化方法及应用。本发明公开的如式I所示的化合物的制备方法，包含下列步骤：（1）将土曲霉（Aspergillus terreus）孢子粉溶液接种至种子培养基中培养，得种子液；其中，土曲霉孢子粉溶液的添加量为0.5%～1.0%；（2）将所述的种子液接种至发酵培养基中培养7～10天，即得含有如式I所示的化合物的发酵液；其中，所述的种子液与发酵培养基的体积比为1:120～1:180。本发明的制备方法中的原料易得、制备周期短、工艺简单，并且更加绿色环保；且本发明制得的目标化合物收率高、纯度高；同时，该化合物对神经氨酸酶具有较强的抑制作用。

    一种A40926的发酵工艺
    29.
    发明授权
    一种A40926的发酵工艺 失效

    公开(公告)号：CN103060405B

    公开(公告)日：2015-04-08

    申请号：CN201110324632.X

    申请日：2011-10-21

    Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    Inventor： 胡海峰 ,  陈昌发 ,  张长清 ,  朱宝泉

    IPC: C12P21/00 ,  C12R1/01

    Abstract: 本发明公开一种A40926的发酵工艺。该发酵工艺包括如下步骤：将产A40926的菌种接种到发酵培养基中进行发酵培养，其中，所述的发酵培养在培养至72h～112h，流加含有葡萄糖、蛋白胨和L-缬氨酸的溶液控制葡萄糖0.5％～1.2％，蛋白胨0.3％～0.8％，L-缬氨酸0.05％～0.12％，百分比为各成分占发酵培养基总量的质量百分比。该工艺操作简单、成本低、能够大规模生产，最高可生产720mg/L达巴万星中间体A40926。

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