用于牛、羊X/Y精子快速分离的UTY抗体纳米颗粒的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN105646707B

    公开(公告)日:2019-01-22

    申请号:CN201610107323.X

    申请日:2016-02-26

    Inventor: 华松 张涌 付明哲

    Abstract: 本发明公开了一种用于牛、羊X/Y精子快速分离的UTY抗体纳米颗粒的制备方法及应用:利用Y精子UTY抗原重组蛋白制备抗Y精子UTY抗原的单克隆抗体;将所述单克隆抗体用胃蛋白酶进行酶切,并分离得到抗UTY抗原的Fab’片段;制备包含Fab’片段的磷酸钙纳米颗粒。本发明制备得到的UTY抗体纳米颗粒,具有在Y精子表面和进入其内部进行抗原抗体反应的能力,从而导致Y精子凝集,对X、Y精子的分离效率达到80~95%,具有X、Y精子分离简单、快速、廉价及效率高等特点,且损害极小。

    一种通用型牛β-酪蛋白位点基因打靶载体及其制备方法

    公开(公告)号:CN103160534B

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201310100213.7

    申请日:2013-03-26

    Abstract: 本发明公开了一种通用型牛β-酪蛋白位点基因打靶载体及其构建方法。所构建的载体包括5’同源臂和3’同源臂,以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700~850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明通过锌指核酸酶在DNA的特定位点产生缺口,通过同源重组末端接合来实现基因敲除,从而大大提高了基因敲除的效率;然后利用同源重组的方法将目的基因整合到体细胞的靶位点上,在打靶载体筛选基因和标记基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除筛选基因和标记基因,从而提高体细胞克隆的效率。

    一种增加奶山羊X精子比率的饲喂方法及营养添加剂

    公开(公告)号:CN103858821A

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201410113923.8

    申请日:2014-03-25

    Abstract: 本发明公开了一种增加奶山羊X精子比率的饲喂方法及营养添加剂,将雄性奶山羊在第6周断奶,然后将其生长过程分为以下5个生长阶段进行饲喂,在各个生长阶段每日喂养基础日粮,所述的基础日粮包括干草和混合精料,并以基础日粮中的混合精料为基准按补充比例进行叶酸、VB12和蛋氨酸的补充,补充比例自断奶后阶段到体成熟期阶段阶梯式递减。本发明可以直接利用外界营养因素增加奶山羊X精子比率,从而达到简便、快速地实现精子中X精子的分离,大幅度降低了分离成本,能够获得更多的雌性胚胎,从而有助于提高养殖业经济效益,同时也有利于性控技术在畜牧业领域的推广和应用。

    一种牛体细胞克隆胚胎培养液及其培养方法

    公开(公告)号:CN101851602A

    公开(公告)日:2010-10-06

    申请号:CN200910021760.X

    申请日:2009-03-31

    Abstract: 一种牛体细胞克隆胚胎培养液及其培养方法,该培养液包括市售牛体细胞克隆胚胎输卵管培养液(mSOF),还包括激活素A,该激活素A的浓度是20~80ng/mL;其培养方法是用常规条件培养牛体细胞颗粒细胞单层3天,从第4天开始,向市售牛体细胞克隆胚胎输卵管培养液(mSOF)加入浓度为20~80ng/mL的激活素A,得到牛体细胞克隆胚胎培养液,再用该牛体细胞克隆胚胎培养液5天既得牛体细胞克隆胚胎。本发明提高了胚胎的8/16细胞率、囊胚率、孵化率,使得Na/K-ATPase、Glut-1、ActR II、Smad2等基因表达水平显著提高。特别适用于牛体细胞克隆领域的应用。

    一种动物卵母细胞成熟培养皿

    公开(公告)号:CN202022941U

    公开(公告)日:2011-11-02

    申请号:CN201020631949.9

    申请日:2010-11-25

    Abstract: 一种动物卵母细胞成熟培养皿,包括一凹底皿本体,还包括一与该凹底皿本体匹配的底座,凹底皿本体的凹底内嵌于底座,并固定于底座上。本实用新型操作简单,有底座支撑凹底皿本体,就不需要手来固定,稳定性好;特别适合用于实验室动物卵母细胞放的成熟培养。

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