一种利用角质酶促进蛋白在枯草芽孢杆菌中胞外表达的方法

    公开(公告)号:CN112301015A

    公开(公告)日:2021-02-02

    申请号:CN202011208395.6

    申请日:2020-11-03

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 吴敬 宿玲恰 黄燕

    Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶促进蛋白在枯草芽孢杆菌中胞外表达的方法,属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明采用角质酶突变体和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达,目标蛋白包括木糖异构酶、4,6‑α‑葡萄糖基转移酶、4‑α‑糖基转移酶、海藻糖合酶和分支酶等,可实现胞内定位目标蛋白胞外表达,提高生产效率、简化后提取工艺,具有较高的学术意义和应用价值。

    GOS转化率提升的β-半乳糖苷酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN114214304B

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202111219626.8

    申请日:2021-10-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了GOS转化率提升的β‑半乳糖苷酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。本发明中所使用的野生型β‑半乳糖苷酶已经具备良好的GOS合成能力,在此基础上,对其进行改造,得到的突变体在制备GOS的总转化率上相较于野生型有着一定的提升,其中突变体Y406F、R441K和Y563F的转化率分别为63.81%、64.27%以及63.58%,此转化率已属于行业内领先水平。同时,在本发明中,野生型生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖产率为23.33%,突变体Y406F和Y563F生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖的产率较野生型有进一步的提升。长链GOS产率也较野生型有了显著提升,增加了GOS的益生作用。

    一种利用角质酶突变体促进重组蛋白胞外表达的方法

    公开(公告)号:CN114410605B

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202210090842.5

    申请日:2020-11-03

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 吴敬 宿玲恰 黄燕

    Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶突变体促进重组蛋白胞外表达的方法,属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明采用角质酶突变体和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达,目标蛋白包括木糖异构酶、4,6‑α‑葡萄糖基转移酶、4‑α‑糖基转移酶、海藻糖合酶和分支酶等,可实现胞内定位目标蛋白胞外表达,提高生产效率、简化后提取工艺,具有较高的学术意义和应用价值。

    一种噬热β-葡萄糖苷酶的制备及应用

    公开(公告)号:CN111500560B

    公开(公告)日:2022-12-27

    申请号:CN202010342426.0

    申请日:2020-04-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种噬热β‑葡萄糖苷酶的制备及应用,属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过构建重组菌,异源表达了来源于嗜热真菌Talaromyces piceae的β‑葡萄糖苷酶TpBgl3A,所述重组菌在3.6L发酵罐中产酶可达2324U/mL。生产得到的β‑葡萄糖苷酶TpBgl3A能在较低加酶量下利用葡萄糖为底物高转化率制备低聚龙胆糖,显著降低生产成本;在以葡萄糖和纤维二糖为底物的反应体系中,低聚龙胆糖转化率达到26.2%,具有工业化生产低聚龙胆糖的潜力。

    一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用

    公开(公告)号:CN112063605B

    公开(公告)日:2022-03-04

    申请号:CN202011015802.1

    申请日:2020-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用,属于酶工程技术领域。本发明在Thermotoga sp.KOL6来源的β‑葡萄糖苷酶基础上,通过定点突变的方式获得突变体,以巴斯德毕赤酵母KM71为表达宿主,实现突变体基因在毕赤酵母中的高效表达。同时,本发明的复合酶可有效转化纤维素生成低聚龙胆糖;以磷酸膨胀纤维素和葡萄糖为底物酶催化转化制备低聚龙胆糖,复配纤维素酶和β‑葡萄糖苷酶突变体Q34G/Y200F时,原料的总转化率19.1%,相比野生型β‑葡萄糖苷酶分别提高74.7%。本发明的技术方案具有很高的工业应用价值。

    一种信号肽及其在生产α-淀粉酶中的应用

    公开(公告)号:CN111499688B

    公开(公告)日:2021-05-04

    申请号:CN202010290289.0

    申请日:2020-04-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种信号肽及其在生产α‑淀粉酶中的应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明提供了一种氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的信号肽AspB’,以枯草芽孢杆菌为宿主,将此信号肽与超高温α‑淀粉酶进行共表达,可显著提升超高温α‑淀粉酶的产量;将本发明的共表达了信号肽AspB’与超高温α‑淀粉酶的重组枯草芽孢杆菌B.subtilis WS9/pHY300PLK‑AspB’‑pfa接种至发酵培养基中进行发酵,发酵60h,就可使发酵液中超高温α‑淀粉酶的酶活高达119.01U/mL,在此基础上,对含菌体的发酵液进一步进行高温热处理,可有效提高发酵液中超高温α‑淀粉酶的可溶性酶活。

    一种发酵型罗汉果酒风味饮品及其生产方法

    公开(公告)号:CN112322429A

    公开(公告)日:2021-02-05

    申请号:CN202011360812.9

    申请日:2020-11-27

    Abstract: 本发明公开了一种发酵型罗汉果酒风味饮品及其生产方法,属于发酵型饮料技术领域。本发明以新鲜的罗汉果肉为原料,包括原料处理、成分调整、发酵、冷藏、过滤,添加果肉,除菌等步骤,用红或白葡萄酒酵母发酵罗汉果肉浓缩浆,所酿造的风味饮品呈浅黄色,口感柔和,酸甜适中,无苦涩味,略有后甜味,具有典型的罗汉果风味和香味。本发明工艺简单,不需添加蛋白酶和果胶酶,生产周期短,罗汉果苷V和维生素C损失少。

    一种应用溶菌酶制备发酵型罗汉果酒的方法

    公开(公告)号:CN112195082A

    公开(公告)日:2021-01-08

    申请号:CN202011283921.5

    申请日:2020-11-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种应用溶菌酶制备发酵型罗汉果酒的方法,属于食品工程领域。本发明以提取罗汉果甜苷的萃余物为原料,用食品用溶菌酶将萃余物中的纤维素分解为可供发酵使用的葡萄糖,代替了纤维素酶的使用;同时溶菌酶还可替代二氧化硫作为杀菌剂,抑制对发酵有影响的杂菌的生长,然后用葡萄酒酵母接种发酵,制备发酵型罗汉果酒酒,发酵结束后,果酒中残余的溶菌酶还可继续抑制杂菌的生长,有利于延长货架期。

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