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公开(公告)号：CN112094794B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202011015129.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产MTSase和MTHase的方法及应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得地衣芽孢杆菌来源的鼠李糖诱导启动子和古细菌嗜热硫化叶菌来源的MTSase、MTHase编码基因，并构建重组质粒pBSL‑Prha‑MTSase和pBSL‑Prha‑MTHase；将两个重组质粒分别转化至地衣芽孢杆菌，得到两种重组地衣芽孢杆菌；以两种重组地衣芽孢杆菌为混合发酵菌种，利用鼠李糖诱导发酵生产MTSase和MTHase。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主，以发酵原料中不常用的鼠李糖作为诱导剂，实现MTSase和MTHase的重组表达，且菌株生长迅速，产酶水平高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN114250153A
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202111537482.0
申请日：2021-12-15
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/14 , C12N1/36 , C12N3/00 , C12P19/04 , A23L31/00 , A23L33/10 , A23L33/16 , A23K10/12 , A23K20/20 , A61K8/9789 , A61K8/73 , A61Q19/00 , A61K36/074 , A61K31/715 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了高耐硒灵芝Ganoderma lucidum JNUSE‑200及其富硒发酵策略，属于生物技术领域。本发明提供的灵芝菌株Ganoderma lucidum JNUSE‑200已于2021年9月17日保藏于中国典型培养物保藏中心。硒耐受能力的提升对其富硒至关重要，而本发明的灵芝菌株Ganoderma lucidum JNUSE‑200在整个液体发酵生长周期中，均能稳定耐受200ppm亚硒酸钠，菌丝体生长正常，菌丝细胞没有出现凋亡，且没有出现刺激性难闻气味，菌丝体富硒总量可以达到2000mg/kg，因此本菌株具有很广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112062821B
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202011015122.X
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A，属于蛋白质工程技术领域。本发明对从地衣芽孢杆菌基因组中克隆的CcpA基因进行突变，得到一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体K31A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码其的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了包含编码上述CcpA突变体K31A基因的重组表达载体，并将构建的表达载体转化到地衣芽孢杆菌CcpA基因缺陷株中获得重组地衣芽孢杆菌。所获得的重组地衣芽孢杆菌能够明显改变由于葡萄糖存在而产生的碳分解代谢阻遏现象，能够降低地衣芽孢杆菌对木糖的偏好性。
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公开(公告)号：CN112080440A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011028630.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌及其应用，属于合成生物学技术领域。本发明筛选获得了在酿酒酵母中转化效率较高的法尼烯合成酶Fsso；构建不同拷贝数HMG1和甲羟戊酸途径全部基因强化法尼烯合成菌株，确认单拷贝和双拷贝HMG1最有利于法尼烯的持续合成积累；用GAL启动子同时控制HMG1和Fsso的表达可进一步提高法尼烯的积累量。本发明构建的法尼烯合成菌株基因操作简单，摇瓶发酵最高能够积累1.11g/L法尼烯。
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公开(公告)号：CN112062822A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202011017359.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体I42A，属于蛋白质工程技术领域。本发明对从地衣芽孢杆菌基因组中克隆的CcpA基因进行突变，得到的一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体I42A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码其的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了包含编码上述CcpA突变体I42A基因的重组表达载体，并将构建的表达载体转化到地衣芽孢杆菌CcpA基因缺陷株中获得重组地衣芽孢杆菌；所获得的重组地衣芽孢杆菌能够明显改变由于葡萄糖存在而产生的碳分解代谢阻遏现象，能够降低地衣芽孢杆菌对木糖的偏好性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107400677B
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN201710590555.X
申请日：2017-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统的地衣芽孢杆菌基因组编辑载体，所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体的制备方法为：将Cas9蛋白表达框和sgRNA scaffold表达框整合在出发载体pHY xyl中，获得pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以amyL为靶位点设计合成的多条sgRNA片段中的任意一条整合到所述的pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold中，制得所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体。本发明可以大幅改善当前地衣芽孢杆菌基因编辑困难的现状，显著提高基因编辑的效率。
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公开(公告)号：CN107746805B
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201711147462.6
申请日：2017-11-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种液体静置培养食药用真菌的方法，属于生物发酵技术领域。本发明采用可多次重复利用的无菌液体发酵装置进行食药用真菌液体静置培养，可以实现其低成本、高营养价值、高活性的食药用真菌产品需求，为其在食品、医药、化妆品等领域广泛应用提供基础。
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公开(公告)号：CN109136208A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201811044790.8
申请日：2018-09-07
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485 , C07K2319/02 , C07K2319/21 , C12N15/70 , C12Y304/17002
Abstract: 本发明公开了一种羧肽酶B分泌表达的方法，所述方法包括如下步骤：(1)以信号肽OmpA、PelB、Endoxylanase和OmpT序列为出发序列，分别进行定点突变；(2)制备核苷酸序列SDB‑pCPB‑6×His；(3)制备重组表达载体；(4)将重组表达载体转化至宿主大肠杆菌E.coli BL21并诱导表达pCPB；(5)酶切上述pCPB并纯化CPB。本发明通过对信号肽的改造，能够将羧肽酶原B直接分泌到培养基中，相比于胞内和周质表达，不需要破碎细胞，回收与纯化更能容易操作。另外，培养基中空间足够大，利于重组蛋白的过量表达。
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公开(公告)号：CN108998486A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810870120.5
申请日：2018-08-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种木糖诱导型地衣芽孢杆菌产蛋白的诱导方法，该方法采用RT-qPCR技术对不同条件下发酵过程中木糖启动子基因转录水平进行实时检测，并据检测结果提出木糖诱导型地衣芽孢杆菌诱导产蛋白的方法。本发明依据启动子转录水平提供的诱导方法可以从基因表达最基础的层面指导木糖诱导型重组地衣芽孢杆菌产蛋白，满足实际生产的不同诱导需求；此外，该方法也可以应用于不同的宿主菌产不同蛋白的研究，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108641983A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810478143.1
申请日：2018-05-18
Applicant: 江苏大有生物科技发展有限公司 , 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/16 , C12R1/07 , C12R1/01 , C12R1/125 , C12R1/10 , C12R1/25 , C12R1/23 , C12R1/225 , C12R1/865 , C12R1/72
Abstract: 一种多效粉状复合EM菌剂和预混合固体发酵培养基及其简易扩培方法，包括以下步骤：(1)复合EM菌剂和预混合固体发酵培养基分别包装；(2)在农田、塘口、河道、圈舍等需要使用EM菌液的地方，预混合固体发酵培养基用水充分溶解、氢氧化钠调节pH 5-8后，将复合EM菌剂按0.01‰-1‰的比例加入、搅拌均匀并用盖子将容器盖好密封；(3)在合适温度的环境中(25-40℃)，放置5-7天后，即可使用；(4)发酵终点pH3.5-4.0。本发明精选了高效的微生物，使其协同作用，达到环境保护、改良水质、绿色养殖的目的。
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