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公开(公告)号:CN113214365A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110516677.0
申请日:2021-05-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种基于多肽的检测鸡传染性贫血病病毒抗体的ELISA试剂盒,一种基于CIAV经典毒株CUX‑1中的VP1序列,利用PROTEAN软件分析,选取同源性、抗原性和亲水性较高的一段多肽序列,前端加保护性氨基酸C进行多肽抗原合成,其氨基酸序列为CRLRRRYKFRHRRRQRYRRRAF。一种基于CIAV‑VP1一段多肽的检测鸡传染性贫血病病毒抗体的间接ELISA试剂盒,所述试剂盒由特异性抗原多肽中的一段多肽片段的酶标板。通过本发明,所提供的抗原多肽反应性较好。
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公开(公告)号:CN113005101A
公开(公告)日:2021-06-22
申请号:CN202110332197.9
申请日:2021-03-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法,其载体骨架为野生型血清4型禽腺病毒SD株;本发明所述的一种基于CRISPR‑Cas9技术的F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒的构建及其应用,选择当下流行的血清4型禽腺病毒作为骨架,通过银染、质谱和免疫共沉淀等技术发现并鉴定FAdV‑4中F2基因与宿主蛋白互作的功能区,随后将功能区删除后成功获得了F2部分缺失型重组FAdV‑4病毒,在体内及体外实验结果均显示,FA4‑Del重组病毒毒力显著降低,能够为SPF鸡提供很好的免疫保护。
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公开(公告)号:CN112048006B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202010937821.3
申请日:2020-09-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种IBV特异性中和表位抗原多肽,所述多肽为环状多肽,所述多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。本发明还公开了一种IBV特异性抗体及其制备方法。本发明还公开了一种替代中和效力测定的ELISA方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒,本发明应用建立的pELISA方法检测IBV抗体,并发现其与抗IBV中和抗体呈正相关,本发明可以用于IBV疫苗免疫效果的评价,IBV感染鸡的抗体水平测定,从而有益于鸡群健康管理等。
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公开(公告)号:CN108752434B
公开(公告)日:2020-07-21
申请号:CN201810724849.1
申请日:2018-07-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种抗原多肽,属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白22K抗体,进而能够检测FAdV‑4病毒感染,而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。
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公开(公告)号:CN109957575A
公开(公告)日:2019-07-02
申请号:CN201910278888.8
申请日:2019-04-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法,利用双酶切获得pGEX‑6p‑1线性化载体以及通过设计扩增山羊痘病毒p32基因片段的引物,利用T4连接酶连接,直接在体外快速重组,获得重组质粒pGEX‑6p‑1‑P32,并将其转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达、实现山羊痘病毒的p32蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的可溶性蛋白GST‑P32;本发明设计的引物及基于T4连接酶的克隆策略,可快速构建山羊痘病毒p32基因的原核可溶性表达载体。本发明获得的山羊痘病毒p32可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供p32可溶性蛋白作为山羊痘病毒诊断抗原;作为免疫原获得抗p32蛋白多克隆抗体;为开展山羊痘病毒流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究p32蛋白的生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109082423A
公开(公告)日:2018-12-25
申请号:CN201810910732.2
申请日:2018-08-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种流感病毒HA融合肽+helix A蛋白表达载体的制备方法及其应用与引物。本发明的原理和最核心的关键技术是科学地设计扩增出pGEX-6p-1线性化载体以及流感病毒HA融合肽-helix A基因片段的引物,利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆HA融合肽-helix A,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、实现流感病毒HA融合肽-helix A蛋白与GST的融合表达,并获得纯化的HA融合肽-helix A融合蛋白。
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公开(公告)号:CN108752434A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810724849.1
申请日:2018-07-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种抗原多肽,属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白22K抗体,进而能够检测FAdV‑4病毒感染,而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。
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公开(公告)号:CN108727478A
公开(公告)日:2018-11-02
申请号:CN201810568218.5
申请日:2018-06-05
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K7/08 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒(IBV)特异性多肽抗原,所述IBV特异性多肽抗原具有氨基酸序列如SEQ ID NO:1~9中的任意一条或几条所示,或者具有经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸序列。本发明还公开了一种IBV特异性多肽抗原组合物。本发明还公开了一种IBV抗体及其制备方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒及其检测方法和应用。该抗原表位具有很好的抗体反应性,可以用来特异性检测抗IBV的抗体,具有应用价值。
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公开(公告)号:CN108414750A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810063994.X
申请日:2018-01-23
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种血清4型禽腺病毒双单抗夹心ELISA抗原检测试剂盒,其中包括:包被抗FAdV-4纤突蛋白蛋白单克隆抗体(捕获抗原的抗体)的酶标板、酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体(检测抗体)。捕获抗体和检测抗体分别针对FAdV-4纤突蛋白2种不同的抗原决定簇:包被在酶标板的抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体和酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体。本发明试剂盒操作简便、快速,能特异性检测出4型禽腺病毒,而与流感病毒(AIV)、马立克病毒(MDV)、血清8型禽腺病毒(FAdV-8)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)以及SPF鸡肝组织研磨液等均不反应。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。
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公开(公告)号:CN106442982B
公开(公告)日:2018-06-08
申请号:CN201610796060.8
申请日:2016-08-31
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种禽白血病病毒J亚群(ALV‑J)特异抗原多肽及其应用。该抗原多肽氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或者其衍生序列,由病毒的囊膜蛋白基因(env)的gp85部分基因编码;其特异性强、亲水性较好,反应性好、纯度高。此外,将该抗原多肽用于制备特异性检测ALV‑J抗体的间接ELISA检测试剂盒,所述检测试剂盒包括包被由一个或者几个如上所述的ALV‑J特异抗原多肽的酶标板以及相关试剂,该试剂盒检测ALV‑J抗体,特异性高,成本低,有利于推广使用,其效果明显优于常规试剂盒和进口试剂盒。上述ALV‑J特异抗原多肽,和由其制备的间接ELISA检测试剂盒适用于评价ALV‑J感染或者净化结果;上述ALV‑J特异抗原多肽适用于制备特异性抗ALV‑J的抗体。
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