一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法

    公开(公告)号:CN113005101A

    公开(公告)日:2021-06-22

    申请号:CN202110332197.9

    申请日:2021-03-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法,其载体骨架为野生型血清4型禽腺病毒SD株;本发明所述的一种基于CRISPR‑Cas9技术的F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒的构建及其应用,选择当下流行的血清4型禽腺病毒作为骨架,通过银染、质谱和免疫共沉淀等技术发现并鉴定FAdV‑4中F2基因与宿主蛋白互作的功能区,随后将功能区删除后成功获得了F2部分缺失型重组FAdV‑4病毒,在体内及体外实验结果均显示,FA4‑Del重组病毒毒力显著降低,能够为SPF鸡提供很好的免疫保护。

    一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN109957575A

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201910278888.8

    申请日:2019-04-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法,利用双酶切获得pGEX‑6p‑1线性化载体以及通过设计扩增山羊痘病毒p32基因片段的引物,利用T4连接酶连接,直接在体外快速重组,获得重组质粒pGEX‑6p‑1‑P32,并将其转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达、实现山羊痘病毒的p32蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的可溶性蛋白GST‑P32;本发明设计的引物及基于T4连接酶的克隆策略,可快速构建山羊痘病毒p32基因的原核可溶性表达载体。本发明获得的山羊痘病毒p32可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供p32可溶性蛋白作为山羊痘病毒诊断抗原;作为免疫原获得抗p32蛋白多克隆抗体;为开展山羊痘病毒流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究p32蛋白的生物学功能具有重要意义。

    一种IBV特异性多肽抗原、抗体、ELISA检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN108727478A

    公开(公告)日:2018-11-02

    申请号:CN201810568218.5

    申请日:2018-06-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒(IBV)特异性多肽抗原,所述IBV特异性多肽抗原具有氨基酸序列如SEQ ID NO:1~9中的任意一条或几条所示,或者具有经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸序列。本发明还公开了一种IBV特异性多肽抗原组合物。本发明还公开了一种IBV抗体及其制备方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒及其检测方法和应用。该抗原表位具有很好的抗体反应性,可以用来特异性检测抗IBV的抗体,具有应用价值。

    一种检测血清4型禽腺病毒的双单抗夹心ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN108414750A

    公开(公告)日:2018-08-17

    申请号:CN201810063994.X

    申请日:2018-01-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种血清4型禽腺病毒双单抗夹心ELISA抗原检测试剂盒,其中包括:包被抗FAdV-4纤突蛋白蛋白单克隆抗体(捕获抗原的抗体)的酶标板、酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体(检测抗体)。捕获抗体和检测抗体分别针对FAdV-4纤突蛋白2种不同的抗原决定簇:包被在酶标板的抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体和酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体。本发明试剂盒操作简便、快速,能特异性检测出4型禽腺病毒,而与流感病毒(AIV)、马立克病毒(MDV)、血清8型禽腺病毒(FAdV-8)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)以及SPF鸡肝组织研磨液等均不反应。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。

    一种禽白血病病毒J亚群特异抗原多肽及其应用

    公开(公告)号:CN106442982B

    公开(公告)日:2018-06-08

    申请号:CN201610796060.8

    申请日:2016-08-31

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种禽白血病病毒J亚群(ALV‑J)特异抗原多肽及其应用。该抗原多肽氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或者其衍生序列,由病毒的囊膜蛋白基因(env)的gp85部分基因编码;其特异性强、亲水性较好,反应性好、纯度高。此外,将该抗原多肽用于制备特异性检测ALV‑J抗体的间接ELISA检测试剂盒,所述检测试剂盒包括包被由一个或者几个如上所述的ALV‑J特异抗原多肽的酶标板以及相关试剂,该试剂盒检测ALV‑J抗体,特异性高,成本低,有利于推广使用,其效果明显优于常规试剂盒和进口试剂盒。上述ALV‑J特异抗原多肽,和由其制备的间接ELISA检测试剂盒适用于评价ALV‑J感染或者净化结果;上述ALV‑J特异抗原多肽适用于制备特异性抗ALV‑J的抗体。

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