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公开(公告)号:CN106148376A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201610536854.0
申请日:2016-07-09
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , A61K35/74 , C07K14/245 , C12N15/66
Abstract: 本发明提供了一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株的构建方法,包括如下步骤:1)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因进行无痕点突变:对无抗生素抗性基因的K88ac+产肠毒素大肠杆菌的LT I基因上的TCT突变成AAA,使其对应编码的63号位的丝氨酸(S)突变成赖氨酸(K);2)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因的敲除:在步骤1)的基础上,敲除K88ac+产肠毒素大肠杆菌的STⅡ基因,从而达到致弱K88ac+产肠毒素大肠杆菌的目的。使用本发明方法构建的致弱菌粘附性强、体内定植时间长、接种后能防止致病菌株的感染,可用于K88ac+ETEC引起的大肠杆菌病的生物预防。
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公开(公告)号:CN105906719A
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201610301779.X
申请日:2016-05-09
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/705 , C07K14/00 , C07K2319/00 , C12N7/00 , C12N2770/10051
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域,具体涉及一种自聚肽融合CD151蛋白及其制备方法和应用。所述的自聚肽融合CD151蛋白由猪CD151蛋白PRRSV结合片段和ELK16自聚肽组成,其制备方法包括表达载体构建、融合蛋白表达与纯化、PRRSV结合片段确定以及病毒浓缩、纯化和检测。所述自聚肽融合CD151蛋白可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)浓缩、纯化和环境监测中。与其他方法相比,用本发明的自聚肽融合CD151蛋白浓缩、纯化和检测PRRSV具有敏感、简单和经济等优点,不仅可用于组织样品的PRRSV浓缩和纯化,还可用于环境样品的PRRSV检测和分离培养。
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公开(公告)号:CN102296069A
公开(公告)日:2011-12-28
申请号:CN201110255463.9
申请日:2011-08-31
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明设计的有效抑制不同毒株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的非翻译区特异人工微小RNA(miRNA)属于基因工程和生物制品研究领域,所述微小RNA序列如SEQIDNO:1-4之一所示。本发明还公开了包括基于RNA聚合酶II的人工miRNA表达载体构建、miRRNAi设计、双链寡核苷酸合成与克隆、miRNA表达检测及其对不同毒株PRRSV复制的抑制作用。与针对其它PRRSV基因的siRNA相比,本发明筛选的人工miRNA针对病毒RNA基因组的非翻译区保守序列,既能抑制同源毒株复制,也能抑制异源毒株复制,既可用于抗PRRSV感染制剂开发,也可用于转基因猪抗病品系培育。
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公开(公告)号:CN101402945A
公开(公告)日:2009-04-08
申请号:CN200810234683.1
申请日:2008-11-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明建立的表达抗传染性法氏囊病病毒miRNA的重组禽腺联病毒制备方法属于基因工程和生物制品研究领域,包括siRNA的选择、双链短发夹寡核苷酸的合成与克隆、含miRNA表达盒禽腺联病毒转移载体的构建、重组禽腺联病毒的产生与鉴定、重组病毒表达的miRNA对传染性法氏囊病病毒复制和基因表达抑制作用的检测。与现有的其他技术相比,该系统不仅能在禽源细胞中有效、持久地表达miRNA,对传染性法氏囊病病毒复制和基因表达具有特异、持久的抑制作用,而且对家禽无任何致病作用,不仅可用于体外实验,而且可作为抗禽病毒感染的新型生物制剂进行开发。
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公开(公告)号:CN107082814A
公开(公告)日:2017-08-22
申请号:CN201710445015.2
申请日:2017-06-12
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/555 , C07K2319/31 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N2800/22
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域,具体涉及一种长效干扰素及其制备方法。所述的长效干扰素由干扰素与链球菌G蛋白C2结构域组成,其制备方法包括融合表达载体构建、融合干扰素表达与纯化、纯化标签切除和融合干扰素回收。与现有的重组干扰素相比,本发明的长效干扰素具有制备工艺简单、成本低和半衰期长等优点,可以用于人和动物长效干扰素的制备。
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公开(公告)号:CN105175554A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510700114.1
申请日:2015-10-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域,具体涉及一种类弹性蛋白多肽与热应激蛋白90α融合蛋白及其制备方法和在传染性法氏囊病病毒浓缩与纯化中的应用。所述类弹性蛋白多肽(ELP)与热应激蛋白90α(Hsp90α)融合蛋白由ELP和Hsp90α的传染性法氏囊病病毒(IBDV)结合片段M167a组成。其制备方法包括融合表达载体的构建、融合蛋白的表达与纯化、IBDV结合片段的确定以及IBDV的浓缩与洗脱。与其他方法相比,用本发明的融合蛋白浓缩和纯化传染性法氏囊病病毒具有简单、快速和经济等优点,制备的传染性法氏囊病病毒可用于实验研究和疫苗制备。
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公开(公告)号:CN103923942B
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201410193534.0
申请日:2014-05-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明的一种表达猪端粒酶反转酶转座子载体的构建方法与在建立猪永生化细胞系中的应用属于生物技术研究领域,包括猪蛋白翻译延伸因子1a启动子的克隆与转录活性检测、SB转座子表达载体构建及其外源基因整合、猪端粒酶反转录酶cDNA克隆、活性检测以及猪成纤维永生化细胞系建立。与其他方法相比,用本发明转座子载体建立的猪永生化细胞系为非转化正常细胞,不含抗性基因、病毒基因和癌基因,适用于细胞生理功能研究、猪病毒分离培养和疫苗生产。
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公开(公告)号:CN104725515A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510124638.0
申请日:2015-03-20
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域,具体涉及一种类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白及其制备方法和在重组腺病毒浓缩和纯化中的应用。所述类弹性蛋白多肽(ELP)与柯萨奇腺病毒受体(CAR)融合蛋白(ELP-CAR),由ELP、间隔区和CAR-D1区组成。其制备方法包括类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合表达载体的构建、融合蛋白的表达与纯化以及重组腺病毒的纯化与洗脱。与其他方法相比,用本发明的类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白浓缩和纯化重组腺病毒具有简单、快速和经济等优点,制备的重组腺病毒可以用于动物实验研究和基因工程疫苗。
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公开(公告)号:CN103293306B
公开(公告)日:2015-04-08
申请号:CN201310197035.4
申请日:2013-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及的一种非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测胶体金免疫层析试纸条制备方法属于生物工程和动物疫病诊断领域,包括ASFV重组抗原p54表达、纯化、抗体制备、胶体金免疫层试纸条制备及其检测ASFV抗体的灵敏性和特异性。与现有的其他血清学方法相比,用本发明建立的胶体金免疫层析试纸条具有方便、快速、灵敏和特异等优点,能在5分钟内获得明确的诊断结果,并能直接检测可疑猪血清(或抗凝血)的病毒抗体,特别适合现场ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验。
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公开(公告)号:CN103923942A
公开(公告)日:2014-07-16
申请号:CN201410193534.0
申请日:2014-05-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明的一种表达猪端粒酶反转酶转座子载体的构建方法与在建立猪永生化细胞系中的应用属于生物技术研究领域,包括猪蛋白翻译延伸因子1a启动子的克隆与转录活性检测、SB转座子表达载体构建及其外源基因整合、猪端粒酶反转录酶cDNA克隆、活性检测以及猪成纤维永生化细胞系建立。与其他方法相比,用本发明转座子载体建立的猪永生化细胞系为非转化正常细胞,不含抗性基因、病毒基因和癌基因,适用于细胞生理功能研究、猪病毒分离培养和疫苗生产。
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