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公开(公告)号：CN104017856B
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201410233471.7
申请日：2014-05-29
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明属于兽医生物学技术领域，涉及一种猪肺炎支原体选择性分离培养基及其制备方法。本发明提供的一种猪肺炎支原体选择性分离培养基，其主要成分为水解乳蛋白，酵母浸粉，MEM培养基，Hank’s液，0.1％酚红溶液，健康马血清，青霉素和去离子水，特异性生长抑制血清。本发明的猪肺炎支原体选择性培养基能够用于猪肺炎支原体的快速分离鉴定，配制方法简单可行，试验结果可靠，分离时间缩短为103h～122h，时间缩短17%～23%，分离成功率高达75%以上，是现有培养基分离成功率的10倍以上。
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公开(公告)号：CN105063172A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510459749.7
申请日：2015-07-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种生物化学和分子生物学相结合快速筛选鉴定猪链球菌的方法，该方法分成两部分组装完成。首先利用自然界中链球菌属触酶试验阴性的特点，在30秒内即可快速排除触酶阳性的待测菌株，然后使用设计猪链球菌特异性引物，对待测菌株进行PCR检测。本发明综合利用生物化学和分子生物学相结合的优势，相比于国内外现行的检测方法，开展大规模的临床病原菌筛选鉴定时，能够节约50％以上的人工时，能够满足众多检测领域要求，在未来快速诊断检测领域会有好的应用前景。
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公开(公告)号：CN120005927A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510151084.7
申请日：2025-02-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
Abstract: 本发明提供了一种高效表达猪链球菌广谱抗原GDH的方法，属于生物技术领域。本发明结合代谢工程原理与蛋白高效表达理论，通过宿主菌理性改造、培养基组分筛选、以及发酵过程调控，实现了具有免疫原性GDH蛋白的高效表达；在500 L发酵罐上，应用pH值及溶氧分阶段控制策略，结合溶氧反馈控制补料策略，乙酸积累量降低至2.48 g/L，细胞浓度为48.47（OD600），GDH蛋白表达水平为4.13 g/L，实现了GDH蛋白高效表达的工业化生产。本发明高效表达GDH蛋白以可溶性表达为主，且具有良好的免疫原性，以采用蜂胶作为佐剂，免疫保护率达到70%，可作为猪链球菌亚单位疫苗的有效抗原成分。
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公开(公告)号：CN118745212A
公开(公告)日：2024-10-08
申请号：CN202410963840.1
申请日：2024-07-18
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本申请涉及一种猪链球菌病保护性抗原及其应用，属于生物疫苗技术领域。本申请中提供的SEQ ID No.1所示的氨基酸序列作为一种猪链球菌病保护性抗原，通过对SEQ ID No.2所示的核苷酸序列进行密码子优化、构建表达载体和原核表达后得到保护性抗原，并通过不同方式验证了其可对2型、7型猪链球菌感染提供较好的免疫交叉保护作用。本申请方案对开展猪链球菌多血清型通用疫苗候选抗原的研究，以及对该病的科学防控具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN107561279A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710557997.4
申请日：2017-07-10
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/532
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种马链球菌兽疫亚种胶体金抗体检测试纸条。马链球菌兽疫亚种胶体金抗体检测试纸条包括在底板上依次贴附的样品垫、金标结合物垫、带有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫；结合物垫为包被有金标葡萄球菌A蛋白复合物的玻璃纤维膜；硝酸纤维素膜上的检测线包被有马链球菌兽疫亚种抗原；硝酸纤维素膜上的质控线包被有猪IgG。该胶体金使用马链球菌兽疫亚种冻融超声抗原作为测试线包被抗原，具有特异性强，灵敏度高、方便快捷等特点，对马链球菌兽疫亚种检测不需要复杂的检测仪器，特别适合猪场养殖人员和基层兽医工作者使用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113588946B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202110844473.X
申请日：2021-07-26
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种猪肺炎支原体抗体间接ELISA检测用的重组蛋白，所述重组蛋白的氨基酸序列包括依次连接的标签载体氨基酸、猪肺炎支原体P46蛋白氨基酸、间隔蛋白氨基酸和猪肺炎支原体P36蛋白氨基酸。利用本发明所提供的重组蛋白能够作为包被抗原，进而建立一种操作简单、成本低、能有效鉴别阴阳性血清的间接ELISA检测方法，经检测该方法符合率高，且具有良好的特异性和重复性，为猪肺炎支原体的综合防治提供新思路和新方法。
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公开(公告)号：CN107129934B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201710357560.6
申请日：2017-05-19
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及快速筛选好氧微生物最适pH调节剂以及确定上述的好氧微生物最适生长pH值的方法。本发明的方法包括下述的步骤：（1）选择好氧微生物培养所适宜的碱性及酸性pH调节剂；（2）验证最适pH调节剂和确定好氧微生物的生长稳定期；（3）筛选最适生长pH值；（4）验证该微生物的最适生长pH值。通过本发明的方法筛选及确定，得到了好氧微生物最适pH调节剂和以及确定了好氧微生物生长最适的pH值，采用本发明的方法具有操作简单、快速，且准确度高的特点。
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公开(公告)号：CN109207397B
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN201811088534.9
申请日：2018-09-18
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，尤其涉及一种副猪嗜血杆菌培养基及高密度发酵培养方法。本发明得到利于副猪嗜血杆菌培养的培养基组分：葡萄糖2.5 g/L，蛋白胨10.0 g/L，酵母粉10.0 g/L，K2HPO4 2.5 g/L，NaCl 5.0 g/L，三甲基甘氨酸1.5 g/L，氯化胆碱1.0 mL/L，VB1 30.0 mg/L，VH 10.0 mg/L，NAD 50 mg/L，3.0%牛血清，余量是水；本发明还提供了基于上述培养基组分的副猪嗜血杆菌发酵培养方法，在不含辅酶培养基中以牛血清作为限制性生长因子，建立电容值与牛血清消耗的线性关系，则可实时调节牛血清补加速率并维持在一定浓度。采用该方法，副猪嗜血杆菌活菌数目均达到x1010 CFU/mL以上，实现了其高密度发酵，且该方法可应用于多种情形副猪嗜血杆菌的规模化生产。
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公开(公告)号：CN106754981B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201710049003.8
申请日：2017-01-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌系统可溶性表达小鹅瘟VP2蛋白制备小鹅瘟病毒样颗粒方法，一种可溶性表达小鹅瘟病毒VP2蛋白的方法，对鹅细小病毒VP2基因进行密码子优化，定点突变包括将密码子AGA突变为CGC和GGA突变为GGT,并克隆到pET‑Sumo载体上，构建重组表达载体pET‑Sumo‑VP2，并将pET‑Sumo‑VP2转化至原核表达菌，通过IPTG在37℃下诱导，获得可溶性重组VP2重组蛋白；将重组蛋白用ULP酶酶切后通过Ni柱纯化得到纯化的VP2蛋白。电镜结果显示酶切后的VP2蛋白可形成小鹅瘟病毒样颗粒，并且纯化后的VP2蛋白具有良好的反应原性，可用于小鹅瘟病毒基因工程亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN109207397A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811088534.9
申请日：2018-09-18
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，尤其涉及一种副猪嗜血杆菌培养基及高密度发酵培养方法。本发明得到利于副猪嗜血杆菌培养的培养基组分：葡萄糖2.5 g/L，蛋白胨10.0 g/L，酵母粉10.0 g/L，K2HPO4 2.5 g/L，NaCl 5.0 g/L，三甲基甘氨酸1.5 g/L，氯化胆碱1.0 mL/L，VB1 30.0 mg/L，VH 10.0 mg/L，NAD 50 mg/L，3.0%牛血清，余量是水；本发明还提供了基于上述培养基组分的副猪嗜血杆菌发酵培养方法，在不含辅酶培养基中以牛血清作为限制性生长因子，建立电容值与牛血清消耗的线性关系，则可实时调节牛血清补加速率并维持在一定浓度。采用该方法，副猪嗜血杆菌活菌数目均达到x1010 CFU/mL以上，实现了其高密度发酵，且该方法可应用于多种情形副猪嗜血杆菌的规模化生产。
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