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公开(公告)号：CN104356238B
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201410546621.X
申请日：2014-10-15
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供一种重组蛋白A亲和配基的定点固定化方法。该方法是通过基因工程手段将FGE识别基因序列插入到编码目的蛋白质的基因序列末端，构建该目的蛋白质的表达载体，再将目的蛋白质与FGE在大肠杆菌中共表达，实现目的蛋白质的胞内醛基催化转化。再通过介质表面的酰肼基团与蛋白质表面醛基的选择性反应实现定点固定化。本发明的方法能够将目的重组蛋白从细胞破碎上清中直接固定，条件温和，步骤简单，大大减少固定化的时间与成本。
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公开(公告)号：CN103977772A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410208552.1
申请日：2014-05-16
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精修饰磁性纳米吸附剂的制备方法及其在血液透析吸附系统中的应用，属于生物医学材料领域。本发明以FeCl3·6H2O、FeCl2·4H2O、氨水为原料，柠檬酸钠作为分散剂、聚乙烯亚胺作为修饰基质、β-环糊精作为吸附功能基团，通过反向化学共沉淀的方法，合成了粒径小、分散好和磁性强的柠檬酸钠修饰的磁性纳米颗粒，并通过静电相互作用，在Fe3O4-TSC的表面吸附上PEI修饰层，再通过席夫碱反应，接枝上β-CD，制得环糊精修饰的磁性纳米吸附剂Fe3O4-β-CD。由于该吸附剂具有磁性，使分离纯化过程较方便、快速，且分离纯化成本低，在血液吸附透析系统中体现了对疏水性毒素的较好吸附能力。
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公开(公告)号：CN102676562B
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201210118134.4
申请日：2012-04-21
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/63 , C12N1/21 , C07K19/00 , C07K1/22 , C07K1/18 , B01J20/26 , B01D15/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种对抗体具有广谱吸附能力的融合蛋白制备方法及其应用，通过基因工程手段，经过PCR扩增，连接T载体，双酶切得到蛋白A和蛋白G免疫球蛋白结合区基因，然后一起连接到表达载体pET-23a上构成重组质粒，并转化E.coli BL21(DE3)，诱导表达后得到大量含有融合蛋白AG的菌体。通过超声破碎、高温加热、沉淀DNA、弱阴离子交换层析和亲和层析纯化得到融合蛋白AG。该蛋白具有蛋白A和蛋白G的双重优点，结合谱更为广泛，且对血清中白蛋白等非免疫球蛋白物质非特异性吸附低。将该蛋白作为配基连接到固相载体基质上制成吸附剂，解决了蛋白A吸附剂对IgG3结合力弱的不足，可用于抗体纯化以及血液净化等领域。
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公开(公告)号：CN103333911A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310232528.7
申请日：2013-06-11
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明涉及一种利用重组毕赤酵母生产金黄色葡萄球菌蛋白A的工艺，所述生产工艺为利用质粒pPIC9K将蛋白A抗体结合区基因整合入毕赤酵母GS115基因组中，并经筛选、表达及纯化条件优化获得有活性的外泌表达蛋白A。本发明提供了所述重组菌的制备、筛选，以及利用该菌株表达蛋白A的培养、发酵方法及其所表达的蛋白A纯化方法。该菌株首先在BMGY培养基中培养约17小时后，再在pH2.6-5.6，含0.5%-2.0%甲醇的培养基BMMY中进行表达筛选和优化。然后在发酵罐中对重组蛋白A表达进行进一步优化，最终蛋白A表达量可达每升菌液8-10g，约占外泌总蛋白的80%。并通过除盐柱过滤和离子交换层析纯化得到高纯度的蛋白A，收率近80%。此工艺为低成本大规模生产高纯度蛋白A创造了有利条件。
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公开(公告)号：CN101921818B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201010227290.5
申请日：2010-07-15
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明涉及一种生产重组蛋白A的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供了利用一种基因工程菌进行高密度发酵表达重组蛋白A的工艺条件，以及利用以IgG的Fc片段为亲和配基的亲和层析一步法高纯度分离纯化重组蛋白A的方法。应用以上方法生产重组蛋白A，高密度发酵的重组菌体培养密度达到OD600nm＝80-100，菌体干重40-50g/L，蛋白A表达量占菌体总蛋白的30-50％，每升菌液生产的蛋白A量最高达3g，SDS-PAGE及HPLC检测蛋白A纯度达95％以上。该方法具有生产量大，成本低，产品质量高等优点，为重组蛋白A的制备提供了一条切实可行的途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102660569A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210119420.2
申请日：2012-04-21
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/735 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/16 , C07K16/28 , C07K16/00 , C07K1/22 , A61K38/17 , A61P37/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种重组人IgE受体蛋白的制备方法及应用，涉及生物工程领域和血液净化技术。其通过基因重组技术高表达与IgE有高结合力的受体FcεRIα-D2，纯化得到重组蛋白并将其作为一种吸附剂的配基，固定于固相载体上制备得的吸附剂可用于高亲和力结合IgE。本发明解决了血液净化技术去除IgE领域现有技术所存在的安全性低和成本较高的问题。在利用血液净化技术去除过敏反应病人血液中过量的IgE，治疗由IgE介导的过敏反应及IgE的纯化方面等方面有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN119738238A
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202510001056.7
申请日：2025-01-02
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 一种基于体声波的快速富集装置及方法，其属于声波器件应用的技术领域。该装置包括富集组件、控制组件和提升装置；通过两个压电陶瓷片正对设置，其间距为压电陶瓷片产生声波波长的整数倍，使其在凸型结构内部的介质溶液内形成驻波，将离心管内的生物颗粒固定在声波节点上，随后通过提升离心管的方式实现富集。在装置外壳底部设置冷却平台，凸型装置外壳内部设置温度传感，随时调控介质溶液温度。该装置具有低损伤性、操作灵活性以及高效富集的优点，在生物医学、临床检测、药物开发等领域的应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN114716726A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210354967.4
申请日：2022-04-06
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种大孔丝素蛋白水凝胶的制备方法，属于生物高分子材料技术领域。本发明通过冷冻光交联法制备丝素蛋白水凝胶，该方法能有效利用丝素蛋白自身氨基酸的交联反应，实现大孔结构的固定，无需引入额外的交联剂；并且制得的水凝胶具有较大的贯通孔结构和较强的抗压缩能力。同时，光交联反应速度快，可以在数分钟内完成交联，使用可见光不会对细胞或生物活性分子造成损伤。该水凝胶制备方法简单易行，适用于生物医学领域。
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公开(公告)号：CN110698615A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201910993563.8
申请日：2019-10-16
Applicant: 大连理工大学
IPC: C08F289/00 , C08F220/56 , C08F222/38 , A61L27/22 , A61L27/56 , A61L27/52 , A61L27/50 , C12N5/07 , C12N7/02 , C07K1/22
Abstract: 本发明提供一种蛋白质功能化冰胶材料的制备方法，该方法包括以下步骤：(a)在蛋白质的非活性结构域连接可聚合性基团，得到经修饰的蛋白质；(b)将该经修饰的蛋白质与可共聚单体和交联剂混合，并在低温下使其聚合得到聚合物；(c)将所得聚合物放在室温下或对其真空干燥后得到蛋白质功能化冰胶材料。此外，本发明提供一种通过该制备方法得到的冰胶材料及其用途。
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公开(公告)号：CN108479738A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810434501.9
申请日：2018-05-09
Applicant: 大连理工大学
IPC: B01J20/286 , B01J20/30 , B01D15/34
CPC classification number: B01J20/286 , B01D15/34
Abstract: 本发明提供了一种疏水层析介质、制备方法及其应用，属于生物化工领域中的蛋白质层析分离技术领域。1-萘乙酸固载于亲水性凝胶载体可制备成一种新型的疏水层析介质，用于蛋白质的分离纯化。相对于常规的疏水层析介质，本发明采用1-萘乙酸为固定化配基制备的疏水介质可实现低盐浓度条件下pH调控的蛋白质吸附和洗脱，且具有载量高的特点。通过调节缓冲液的pH值，可以分别实现溶菌酶及抗体等蛋白质的吸附及解吸。
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