环糊精修饰磁性纳米吸附剂的制备方法及其在血液透析吸附系统中的应用

    公开(公告)号:CN103977772B

    公开(公告)日:2016-01-13

    申请号:CN201410208552.1

    申请日:2014-05-16

    Abstract: 本发明公开了一种环糊精修饰磁性纳米吸附剂的制备方法及其在血液透析吸附系统中的应用,属于生物医学材料领域。本发明以FeCl3·6H2O、FeCl2·4H2O、氨水为原料,柠檬酸钠作为分散剂、聚乙烯亚胺作为修饰基质、β-环糊精作为吸附功能基团,通过反向化学共沉淀的方法,合成了粒径小、分散好和磁性强的柠檬酸钠修饰的磁性纳米颗粒,并通过静电相互作用,在Fe3O4-TSC的表面吸附上PEI修饰层,再通过席夫碱反应,接枝上β-CD,制得环糊精修饰的磁性纳米吸附剂Fe3O4-β-CD。由于该吸附剂具有磁性,使分离纯化过程较方便、快速,且分离纯化成本低,在血液吸附透析系统中体现了对疏水性毒素的较好吸附能力。

    一种重组蛋白A亲和配基的定点固定化方法

    公开(公告)号:CN104356238A

    公开(公告)日:2015-02-18

    申请号:CN201410546621.X

    申请日:2014-10-15

    Abstract: 本发明提供一种重组蛋白质亲和配基的定点固定化方法。该方法是通过基因工程手段将FGE识别基因序列插入到编码目的蛋白质的基因序列末端,构建该目的蛋白质的表达载体,再将目的蛋白质与FGE在大肠杆菌中共表达,实现目的蛋白质的胞内醛基催化转化。再通过介质表面的酰肼基团与蛋白质表面醛基的选择性反应实现定点固定化。本发明的方法能够将目的重组蛋白从细胞破碎上清中直接固定,条件温和,步骤简单,大大减少固定化的时间与成本。

    抗人β2微球蛋白的单域抗体及其制备方法和用途

    公开(公告)号:CN104098694A

    公开(公告)日:2014-10-15

    申请号:CN201410342951.7

    申请日:2014-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种新的抗人β2微球蛋白的单域抗体及其制备方法和用途。本发明利用噬菌体展示技术对羊驼噬菌体抗体库进行多轮筛选富集具有β2微球蛋白特异性的噬菌体,通过对噬菌体培养制备抗体,并且鉴定获得阳性克隆,通过测序获得其相应的编码序列,然后在大肠杆菌中表达获得可溶性的抗体片段。本发明的抗体具有如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列。本发明提供的抗体对β2微球蛋白具有很高的结合能力,可应用于血液净化及β2微球蛋白检测领域,有助于促进和改善对透析相关淀粉样变等疾病的诊断和治疗。

    一种抗人甲状旁腺激素的纳米抗体及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN104004093A

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201410243295.5

    申请日:2014-06-03

    Abstract: 本发明公开了一种抗人甲状旁腺激素(PTH)的纳米抗体及其制备方法和应用。本发明采用定点固载抗原后用于筛选抗体的方法,即在人甲状旁腺激素基因的碳末端加上一个半胱氨酸,进行原核表达纯化,并通过该半胱氨酸与马来酰亚胺的反应固定到ELISA板上,解决了传统筛选过程中亲水性抗原不易结合的问题,也解决了小分子抗原结构容易改变这一问题,更有利于筛选到针对正确结构的抗体,筛选出的抗体更具竞争力。本发明的纳米抗体对PTH具有很高的特异性亲和活性,其亲和常数在109M-1以上,可应用于纯化蛋白、制备吸附剂材料、制备血液净化吸附材料、进行蛋白浓度检测等方面。

    一种重组人IgE受体蛋白的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN102660569B

    公开(公告)日:2013-11-06

    申请号:CN201210119420.2

    申请日:2012-04-21

    Abstract: 本发明公开一种重组人IgE受体蛋白的制备方法及应用,涉及生物工程领域和血液净化技术。其通过基因重组技术高表达与IgE有高结合力的受体FcεRIα-D2,纯化得到重组蛋白并将其作为一种吸附剂的配基,固定于固相载体上制备得的吸附剂可用于高亲和力结合IgE。本发明解决了血液净化技术去除IgE领域现有技术所存在的安全性低和成本较高的问题。在利用血液净化技术去除过敏反应病人血液中过量的IgE,治疗由IgE介导的过敏反应及IgE的纯化方面等方面有很好的应用前景。

    一种对抗体具有广谱吸附能力的融合蛋白制备方法及应用

    公开(公告)号:CN102676562A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210118134.4

    申请日:2012-04-21

    Abstract: 本发明公开一种对抗体具有广谱吸附能力的融合蛋白制备方法及其应用,通过基因工程手段,经过PCR扩增,连接T载体,双酶切得到蛋白A和蛋白G免疫球蛋白结合区基因,然后一起连接到表达载体pET-23a上构成重组质粒,并转化E.coli BL21(DE3),诱导表达后得到大量含有融合蛋白AG的菌体。通过超声破碎、高温加热、沉淀DNA、弱阴离子交换层析和亲和层析纯化得到融合蛋白AG。该蛋白具有蛋白A和蛋白G的双重优点,结合谱更为广泛,且对血清中白蛋白等非免疫球蛋白物质非特异性吸附低。将该蛋白作为配基连接到固相载体基质上制成吸附剂,解决了蛋白A吸附剂对IgG3结合力弱的不足,可用于抗体纯化以及血液净化等领域。

    一种抗人淀粉样β肽的纳米抗体及其应用

    公开(公告)号:CN105542005B

    公开(公告)日:2018-11-09

    申请号:CN201610076553.4

    申请日:2016-02-03

    Abstract: 本发明公开了一种新的抗人淀粉样β肽(Aβ)的纳米抗体及其应用。本发明利用噬菌体展示技术对羊驼噬菌体抗体库进行多轮筛选富集具有Aβ特异性的噬菌体,通过对噬菌体培养制备抗体,并且鉴定获得阳性克隆,通过测序获得其相应的编码序列,然后在大肠杆菌中表达获得可溶性的抗体片段。本发明的抗体具有如SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。本发明提供的抗体对Aβ具有特异的结合能力,可应用于以Aβ为靶标的疾病的治疗和诊断药物或试剂的制备。

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