公开(公告)号：CN101921320A

公开(公告)日：2010-12-22

申请号：CN201010227638.0

申请日：2010-07-15

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 贾凌云 ,  侯率 ,  林雪 ,  张嘉玉 ,  任军 ,  谢键

IPC: C07K14/31 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明涉及一种重组蛋白A的分离纯化方法，包括批量IgG Fc片段的制备，Fc片段的定向固定化以及利用以Fc片段为配基的亲和色谱技术分离纯化重组蛋白A的方法，属生物工程技术领域。最终获得的蛋白A经SDS-PAGE及HPLC检测蛋白A纯度为95％以上。该方法具有低成本、高效率和操作简便的优点，既可用于实验室规模纯化蛋白A，也可用于工业化蛋白A的生产。

公开(公告)号：CN101921818B

公开(公告)日：2013-04-10

申请号：CN201010227290.5

申请日：2010-07-15

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 贾凌云 ,  林雪 ,  侯率 ,  张嘉玉 ,  任军 ,  谢键

IPC: C12P21/00 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生产重组蛋白A的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供了利用一种基因工程菌进行高密度发酵表达重组蛋白A的工艺条件，以及利用以IgG的Fc片段为亲和配基的亲和层析一步法高纯度分离纯化重组蛋白A的方法。应用以上方法生产重组蛋白A，高密度发酵的重组菌体培养密度达到OD600nm＝80-100，菌体干重40-50g/L，蛋白A表达量占菌体总蛋白的30-50％，每升菌液生产的蛋白A量最高达3g，SDS-PAGE及HPLC检测蛋白A纯度达95％以上。该方法具有生产量大，成本低，产品质量高等优点，为重组蛋白A的制备提供了一条切实可行的途径。

公开(公告)号：CN101921818A

公开(公告)日：2010-12-22

申请号：CN201010227290.5

申请日：2010-07-15

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 贾凌云 ,  林雪 ,  侯率 ,  张嘉玉 ,  任军 ,  谢键

IPC: C12P21/00 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生产重组蛋白A的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供了利用一种基因工程菌进行高密度发酵表达重组蛋白A的工艺条件，以及利用以IgG的Fc片段为亲和配基的亲和层析一步法高纯度分离纯化重组蛋白A的方法。应用以上方法生产重组蛋白A，高密度发酵的重组菌体培养密度达到OD600nm＝80-100，菌体干重40-50g/L，蛋白A表达量占菌体总蛋白的30-50％，每升菌液生产的蛋白A量最高达3g，SDS-PAGE及HPLC检测蛋白A纯度达95％以上。该方法具有生产量大，成本低，产品质量高等优点，为重组蛋白A的制备提供了一条切实可行的途径。