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公开(公告)号:CN108410870A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810153537.X
申请日:2018-02-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母启动子,其至少包括:a)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列;或b)如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列;或c)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。还公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母分泌信号肽,其至少包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列,以及一种优化的组合体,其至少包括如SEQ ID No.6所示的核苷酸序列。本发明还公开了含有上述马克斯克鲁维酵母启动子和/或分泌信号肽的重组表达载体、基因工程菌及其制备方法与应用。本技术方案可显著提升马克斯克鲁维酵母高效重组表达外源蛋白的能力,为推动马克斯克鲁维酵母表达系统在工业蛋白制造领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN107661496A
公开(公告)日:2018-02-06
申请号:CN201711009865.4
申请日:2017-10-25
Applicant: 复旦大学
CPC classification number: A61K39/12 , A61K9/0019 , A61K2039/54 , A61K2039/552 , A61K2039/55566 , A61K2039/575 , C07K14/005 , C12N15/815 , C12N2750/14023 , C12N2750/14034
Abstract: 本发明公开了一种猪细小病毒疫苗组合物,其包含以下a)和b)、基本上由以下a)和b)组成、或者由以下a)和b)组成:a)、由马克斯克鲁维酵母重组工程菌表达的猪细小病毒VP2蛋白自组装形成的类病毒颗粒;b)、药学上或兽医学上可接受的用于注射制剂的辅料。本发明还公开了上述猪细小病毒疫苗组合物的制备方法和应用。本发明提供的猪细小病毒类病毒颗粒疫苗注射免疫可获得高水平血清IgG抗体,具有良好的免疫原性,能够减少和预防猪细小病毒感染所引起相关性疾病。
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公开(公告)号:CN104946555B
公开(公告)日:2017-12-01
申请号:CN201510220300.5
申请日:2015-05-04
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域,具体为一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用。本发明发现一株微杆菌可以降解赤霉烯酮,命名为Microbacteriumsp. FY1538。该微杆菌属于微杆菌属(Microbacterium sp.),分离自青藏高原青海湖边的草皮(N36.34.243 E100.32.285)。Microbacteriumsp. FY1538在LB培养基中培养,添加终浓度10ul/ml的甲醇,培养基pH 7.4,培养温度30 ℃,摇瓶震荡培养48 h,转速220rpm,发酵上清液具有完全降解赤霉烯酮的能力。本发明提供的微杆菌可应用于玉米等发霉农作物的脱毒。
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公开(公告)号:CN106399350A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610806538.0
申请日:2016-09-07
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N15/81 , C12N1/19 , C12N7/04 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒II型衣壳蛋白重组表达的马克斯克鲁维酵母工程菌,将猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因克隆到表达载体中,并在马克斯克鲁维酵母中重组表达获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒。本发明还提供了一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗的制备方法,通过重组马克斯克鲁维酵母的高密度发酵,获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒,经分离纯化制备疫苗。本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗,注射免疫一次即可获得高水平血清IgG抗体,具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单,产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点,可应用于减少、预防感染猪圆环病毒PCV2所引起相关性临床症状。
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公开(公告)号:CN106399138A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610807435.6
申请日:2016-09-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供一种马克斯克鲁维酵母重组工程菌及其在生产口服猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗中的应用,该重组工程菌是通过马克斯克鲁维酵母表达载体表达猪圆环病毒II型衣壳蛋白,制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗。本发明提供的马克斯克鲁维酵母重组表达载体的调控元件均来源于食品安全级的克鲁维酵母,具有无抗生素抗性基因和大肠杆菌序列特征。本发明还提供一种制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗的方法,利用本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗,能够减少和预防感染PCV2所引起相关性临床症状,具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单,产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点。
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公开(公告)号:CN102041252B
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN200910197704.1
申请日:2009-10-26
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/46 , C12N15/56 , C12N15/63 , C12P19/16 , C12R1/645 , C12R1/01 , C12R1/685 , C12R1/125 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程领域,涉及一种新型内切葡聚糖酶RuCelB、其编码基因、制备方法与应用。RuCelB含有SEQ ID NO.2的第25-336位的氨基酸残基序列。通过对牦牛瘤胃微生物宏基因组cosmid文库的活性筛选,获得能够水解羧甲基纤维素钠的阳性克隆,进一步通过构建亚克隆、测序、同源比对的方法获得RuCelB的全长cds序列;重组表达获得RuCelB。RuCelB以羧甲基纤维素钠为底物的比活高达158.8U/mg,对滤纸、纤维三糖等底物也具有降解能力。本发明的RuCelB可广泛应用于纤维素的降解,包括纤维素生物转化、化工、纺织、食品、生物能源、饲料添加、医药工业方面应用等领域。
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公开(公告)号:CN105063080A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510562496.6
申请日:2015-09-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种不含有信号肽的在马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株中进行外源基因表达的重组载体、及其制备方法和应用,所述重组载体按照顺序包括氨苄抗性基因、PKD1载体、菊粉酶启动子、多克隆位点、菊粉酶终止子、营养基因启动子、营养基因开放阅读框。本发明构建的不含信号肽的重组载体、及其制备方法,可用于构建转化子,来实现外源基因的表达。
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公开(公告)号:CN102041251A
公开(公告)日:2011-05-04
申请号:CN200910197703.7
申请日:2009-10-26
Applicant: 复旦大学 , 武汉新华扬生物股份有限公司
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/63 , C12P19/14 , C12R1/645 , C12R1/01 , C12R1/685 , C12R1/125 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/19
Abstract: 本发明属生物工程领域,涉及一种新型β葡萄糖苷酶/木糖苷酶双功能纤维素降解酶RuBGX2及其编码基因与应用。RuBGX2的氨基酸编码序列包含SEQ ID NO 2序列第18-755位。RuBGX2来源于中国牦牛瘤胃微生物,通过对瘤胃宏基因组cosmid文库和亚克隆文库的功能筛选、测序分析获得编码一种新型β葡萄糖苷酶/木糖苷酶双功能纤维素降解酶RuBGX2的新基因。本发明的β葡萄糖苷酶/木糖苷酶双功能酶可广泛应用于纤维素的降解,包括纤维素生物转化、化工、纺织、食品、生物能源、饲料添加、医药工业方面应用等领域。利用本发明的RuBGX2双功能酶降解木质纤维,能够减少添加酶的种类,简化酶解工艺。
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公开(公告)号:CN101870966A
公开(公告)日:2010-10-27
申请号:CN200910171716.7
申请日:2009-08-26
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N15/81 , A23K1/165 , C12P7/10 , C12P19/14 , C12R1/645 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/19
CPC classification number: Y02E50/16 , Y02E50/343
Abstract: 本发明属生物工程领域,涉及一种葡萄糖苷酶/木糖苷酶双功能纤维素降解酶RuBGX1,其重组载体、菌株、制备方法及应用。RuBGX1能够水解葡萄糖苷、半乳糖苷、木糖苷、纤维二糖及三糖等底物,在木聚糖酶中加入适量的RuBGX1,可以明显增加木聚糖的还原产量。RuBGX1可用于纤维素生物转化、化工、纺织、食品、生物能源、饲料添加、医药工业方面应用等领域。利用本发明的RuBGX1降解木质纤维,能够减少添加酶的种类,简化酶解工艺。本发明的RuBGX1用作饲料添加剂,能够提高动物对粗纤维的消化程度,改善单胃动物消化道环境,增加饲料利用率,促进饲料的良好消化。
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公开(公告)号:CN101063089A
公开(公告)日:2007-10-31
申请号:CN200710040392.4
申请日:2007-04-30
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将菊粉外切酶基因克隆到真核表达载体pUKDS上,并转化鹰嘴豆克鲁维酵母Y179U,形成表达菊粉外切酶的克鲁维酵母基因工程菌株。发酵时,取上述基因工程菌株在常温常压下发酵2-8天,然后去除菌体,即得;发酵液初始菌浓度为OD600=0.2-1.6;发酵液pH值为5.5-8.0;发酵液中含有0.5-2%的酵母粉和浓度不低于2%的碳源。用本发明的方法生产的菊粉外切酶,活性可达2500u/ml以上,发酵产量高,发酵周期短,发酵成本低,适用于推广至大规模工业化生产。
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