马克斯克鲁维酵母启动子、分泌信号肽及其制备与应用

    公开(公告)号:CN108410870A

    公开(公告)日:2018-08-17

    申请号:CN201810153537.X

    申请日:2018-02-22

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 吕红 余垚 周峻岗

    Abstract: 本发明公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母启动子,其至少包括:a)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列;或b)如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列;或c)如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。还公开了一种优化的马克斯克鲁维酵母分泌信号肽,其至少包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列,以及一种优化的组合体,其至少包括如SEQ ID No.6所示的核苷酸序列。本发明还公开了含有上述马克斯克鲁维酵母启动子和/或分泌信号肽的重组表达载体、基因工程菌及其制备方法与应用。本技术方案可显著提升马克斯克鲁维酵母高效重组表达外源蛋白的能力,为推动马克斯克鲁维酵母表达系统在工业蛋白制造领域的应用奠定了基础。

    一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN104946555B

    公开(公告)日:2017-12-01

    申请号:CN201510220300.5

    申请日:2015-05-04

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于微生物技术领域,具体为一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用。本发明发现一株微杆菌可以降解赤霉烯酮,命名为Microbacteriumsp. FY1538。该微杆菌属于微杆菌属(Microbacterium sp.),分离自青藏高原青海湖边的草皮(N36.34.243 E100.32.285)。Microbacteriumsp. FY1538在LB培养基中培养,添加终浓度10ul/ml的甲醇,培养基pH 7.4,培养温度30 ℃,摇瓶震荡培养48 h,转速220rpm,发酵上清液具有完全降解赤霉烯酮的能力。本发明提供的微杆菌可应用于玉米等发霉农作物的脱毒。

    一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN106399350A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610806538.0

    申请日:2016-09-07

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒II型衣壳蛋白重组表达的马克斯克鲁维酵母工程菌,将猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因克隆到表达载体中,并在马克斯克鲁维酵母中重组表达获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒。本发明还提供了一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗的制备方法,通过重组马克斯克鲁维酵母的高密度发酵,获得猪圆环病毒II型病毒样颗粒,经分离纯化制备疫苗。本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗,注射免疫一次即可获得高水平血清IgG抗体,具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单,产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点,可应用于减少、预防感染猪圆环病毒PCV2所引起相关性临床症状。

    猪圆环病毒II型口服病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN106399138A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610807435.6

    申请日:2016-09-07

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供一种马克斯克鲁维酵母重组工程菌及其在生产口服猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗中的应用,该重组工程菌是通过马克斯克鲁维酵母表达载体表达猪圆环病毒II型衣壳蛋白,制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗。本发明提供的马克斯克鲁维酵母重组表达载体的调控元件均来源于食品安全级的克鲁维酵母,具有无抗生素抗性基因和大肠杆菌序列特征。本发明还提供一种制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗的方法,利用本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗,能够减少和预防感染PCV2所引起相关性临床症状,具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单,产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点。

    一种含有菊粉外切酶基因序列的基因工程菌株及其用于制备菊粉外切酶的方法

    公开(公告)号:CN101063089A

    公开(公告)日:2007-10-31

    申请号:CN200710040392.4

    申请日:2007-04-30

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将菊粉外切酶基因克隆到真核表达载体pUKDS上,并转化鹰嘴豆克鲁维酵母Y179U,形成表达菊粉外切酶的克鲁维酵母基因工程菌株。发酵时,取上述基因工程菌株在常温常压下发酵2-8天,然后去除菌体,即得;发酵液初始菌浓度为OD600=0.2-1.6;发酵液pH值为5.5-8.0;发酵液中含有0.5-2%的酵母粉和浓度不低于2%的碳源。用本发明的方法生产的菊粉外切酶,活性可达2500u/ml以上,发酵产量高,发酵周期短,发酵成本低,适用于推广至大规模工业化生产。

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