公开(公告)号：CN119220457B

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411729786.0

申请日：2024-11-29

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 姜延龙 ,  张格瑞 ,  王占楠 ,  高宇鹏 ,  张玉喜 ,  温馨 ,  王春凤

IPC: C12N1/20 ,  A61K35/744 ,  A61P1/00 ,  A61P31/04 ,  A61P33/02 ,  A23K10/18 ,  A23K50/75 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株粪肠球菌YL‑EF32及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供的粪肠球菌YL‑EF32保藏编号为CCTCC NO：M 20242241。该菌株能有效抑制鸡源产气荚膜梭菌的增殖，对胆盐、人工胃液、苯酚有较好的耐受能力，能够代谢果胶、葡聚糖及纤维二糖等膳食纤维。在肉鸡日粮中添加粪肠球菌YL‑EF32可通过增强肠道屏障，平衡肠道菌群稳定以及缓解炎症反应等方式显著改善球虫和产气荚膜梭菌诱导的坏死性肠炎，可在畜禽养殖中用于抗产气荚膜梭菌感染。

公开(公告)号：CN108410900B

公开(公告)日：2020-07-14

申请号：CN201810148983.1

申请日：2018-02-13

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  刘琼 ,  姜延龙 ,  刘永仕 ,  杨桂连 ,  刘晶

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了无抗性植物乳杆菌锚定表达载体pLPSa，它是生物安全外源蛋白表达系统，以asd缺失株E.coli 6212/Δasd和alr缺失L.plantarum NC8/Δalr为宿主菌，将来源于乳酸乳球菌（Lactococcus lactis subsp.cremoris strain JM4）基因组上P23启动子作为alr基因表达的启动子，以pYA4545，pLP‑1261 Inv，pSIP409PgsA’‑IL‑10，pSIP409PgsA’‑EGFP为基础载体，构建以表面蛋白（S_achoring）为锚定模型的营养互补筛选标记大肠杆菌‑乳酸菌无抗锚定表达载体pLPSa，并以EGFP作为报告基因进行筛选及锚定表达验证。

公开(公告)号：CN108410901B

公开(公告)日：2020-06-30

申请号：CN201810148987.X

申请日：2018-02-13

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  刘琼 ,  姜延龙

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了无抗性植物乳杆菌锚定表达载体pLQ2a，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；它是生物安全外源蛋白表达系统，以asd缺失株E.coli 6212/Δasd和alr缺失L.plantarum NC8/Δalr为宿主菌，将来源于乳酸乳球菌（Lactococcus lactis subsp.cremoris strain JM4）基因组上P23启动子作为alr基因表达的启动子，以pYA4545，pYA4545‑Mcherry，pLP‑1261 Inv，pSIP409PgsA’，pSIP409PgsA’‑IL‑10，pSIP409PgsA’‑EGFP为基础载体，构建以PgsA’和LP‑1261为双锚定模型的营养互补筛选标记大肠杆菌‑乳酸菌无抗锚定表达载体pLQ2a，并以EGFP及Mcherry作为报告基因进行筛选及锚定表达验证；解决了植物乳杆菌连接转化效率低，很难筛选到阳性重组子的问题，构建表达载体pLQ2既能在E.coli 6212/Δalr中复制表达，又能在L.plantarum NC8/Δalr中表达。

公开(公告)号：CN109536521A

公开(公告)日：2019-03-29

申请号：CN201811415132.5

申请日：2018-11-26

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 姜延龙 ,  王春凤 ,  杨桂连 ,  高兴 ,  许可

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/65 ,  C12N15/66 ,  A61K48/00 ,  A61K39/17 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供一种微环DNA及其制备方法与应用,该微环DNA含有编码EGFP绿色荧光蛋白报告基因。制备方法包括：在CMV-EGFP-polyA阅读框两侧分别引入lox66及lox71位点；用SacII和StuI双酶切扩增产物一，连接后，转化大肠杆菌Top10感受态细胞；将pYL19完整质粒进行PCR扩增，并引入XmaI和PacI酶切位点；将PGK-cre-polyA质粒进行PCR扩增，并引入XmaI和PacI酶切位点；用XmaI和PacI双酶切扩增产物二和扩增产物三，连接后，转化大肠杆菌Top10感受态细胞；对pYL46完整质粒提取重组质粒，然后瞬时转染至培养状态良好的人胚肾HEK-293 T细胞。

公开(公告)号：CN108588107A

公开(公告)日：2018-09-28

申请号：CN201810307288.5

申请日：2018-04-08

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 姜延龙 ,  王春凤 ,  杨桂连 ,  高兴 ,  张洁

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12N15/66 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明公开了一种缺失asd及表达lacI的猪霍乱沙门菌C500株，是以猪霍乱沙门菌C500株为载体，对其染色体进行基因改造，使猪霍乱沙门菌C500的asd基因缺失，构建猪霍乱沙门菌C500Δasd缺失株；同时将araC PBAD-lacI序列置于缺失的asd基因阅读框中，使C500株在缺失asd基因的同时，引入araC PBAD-lacI表达框，可在阿拉伯糖存在时表达LacI蛋白；此外，构建了含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP，通过western blot实验检测LacI对Ptrc启动子的负调控作用；本发明提供一种全新的基于平衡-致死系统的调控表达外源抗原基因的C500菌株及表达质粒，为将来利用C500菌株表达外源抗原成分奠定基础。