基于液相芯片定量检测Alu基因甲基化水平的方法

    公开(公告)号:CN104498591B

    公开(公告)日:2016-06-29

    申请号:CN201410676539.9

    申请日:2014-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种基于液相芯片定量检测Alu基因甲基化水平的方法,包括(1)针对亚硫酸氢钠转化后的Alu序列设计相应引物;(2)标本血清DNA提取和亚硫酸氢钠处理;(3)对处理后的标本进行BSP测序;(4)根据测序结果,分析筛选出检测位点,并针对该位点设计相应探针;(5)制备标准品和样品PCR产物;(6)将探针包被到微球上(7)将包被了探针的微球与PCR产物杂交孵育,并在液相芯片机器上进行检测,读取数据;(8)根据标准品绘制标准曲线后,计算出每个样品的甲基化水平。本发明方法相较于现有的检测方法,是一种高通量、操作简便、准确可靠的定量检测Alu基因甲基化水平的方法。

    基于液相芯片定量检测Alu基因甲基化水平的方法

    公开(公告)号:CN104498591A

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201410676539.9

    申请日:2014-11-24

    CPC classification number: C12Q1/6827 C12Q2523/125 C12Q2563/149

    Abstract: 本发明公开了一种基于液相芯片定量检测Alu基因甲基化水平的方法,包括(1)针对亚硫酸氢钠转化后的Alu序列设计相应引物;(2)标本血清DNA提取和亚硫酸氢钠处理;(3)对处理后的标本进行BSP测序;(4)根据测序结果,分析筛选出检测位点,并针对该位点设计相应探针;(5)制备标准品和样品PCR产物;(6)将探针包被到微球上(7)将包被了探针的微球与PCR产物杂交孵育,并在液相芯片机器上进行检测,读取数据;(8)根据标准品绘制标准曲线后,计算出每个样品的甲基化水平。本发明方法相较于现有的检测方法,是一种高通量、操作简便、准确可靠的定量检测Alu基因甲基化水平的方法。

    一种用于非小细胞肺癌筛查的circRNA标志物

    公开(公告)号:CN118345172B

    公开(公告)日:2025-05-02

    申请号:CN202410608457.4

    申请日:2024-05-16

    Abstract: 本发明提供一种用于非小细胞肺癌筛查的circRNA标志物,涉及生物医学技术领域,所述标志物为hsa_circ_0016601,所述hsa_circ_0016601的序列号如SEQ ID NO:01所示。首先通过高通量测序构建非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织的circRNA差异表达谱,RT‑qPCR检测hsa_circ_0016601在非小细胞肺癌中的表达情况,从而首次发现hsa_circ_0016601可作为非小细胞肺癌诊断的生物标志物,并且,与正常人相比,该circRNA生物标志物在临床大样本非小细胞肺癌患者血清中的表达升高。非小细胞肺癌患者血清中高表达的上述circRNA生物标志物与组织学类型,分化程度,肿瘤大小,TNM分期,远端转移,细胞增殖相关抗原Ki‑67表达及胸膜浸润有关。本发明提供的生物标志物,其区分血清中非小细胞肺癌患者和健康正常人的AUC可达0.810,灵敏度和特异度分别为72%和77%,截断值为2.4180。

    一种CTC-497E21.4作为铁死亡调控靶点在制备胃癌靶向药物中的应用

    公开(公告)号:CN115006424A

    公开(公告)日:2022-09-06

    申请号:CN202210456735.X

    申请日:2022-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种CTC‑497E21.4作为铁死亡调控靶点在制备胃癌靶向药物中的应用,属于生物医药技术领域。本发明公开CTC‑497E21.4作为铁死亡调控靶点在制备胃癌靶向药物中的应用,通过干扰CTC‑497E21.4表达调控SLC7A11表达降低,以促进胃癌细胞铁死亡。本发明根据实验结果推断CTC‑497E21.4与胃癌细胞中的铁死亡相关,其对胃癌细胞铁死亡具有抑制作用,并进一步研究发现,SLC7A11可以作为CTC‑497E21.4影响胃癌细胞铁死亡的靶分子,阐明了CTC‑497E21.4调控胃癌细胞铁死亡的作用机制,为胃癌靶向治疗提供了新的作用靶点及技术支持。

    转录因子CEBPB结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法

    公开(公告)号:CN112708635A

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN202011620055.4

    申请日:2020-12-30

    Abstract: 本发明提供一种转录因子CEBPB和TFCP2竞争结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法,包括如下步骤:S1、通过实验验证转录因子CEBPB可结合CPEB1基因启动子区,而当CPEB1基因启动子区高甲基化状态,转录因子CEBPB无法结合,影响CPEB1基因的染色质可及性,从而抑制CPEB1基因的表达;S2、通过实验验证CPEB1基因启动子区高甲基化状态时,转录因子TFCP2可结合CPEB1基因启动子区,从而阻止转录因子CEBPB的结合。本发明的实验结果表明CPEB1基因启动子区的高DNA甲基化状态可增加转录因子TFCP2的结合活性,使其启动子区不能结合CEBPB,同时证明转录因子TFCP2是一新的DNA甲基化识别因子。

    结直肠癌抑癌基因及其启动子区高DNA甲基化的验证方法

    公开(公告)号:CN112481273A

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN202011585665.5

    申请日:2020-12-29

    Abstract: 本发明提供一种结直肠癌抑癌基因,为CPEB1基因。本发明还提供一种结直肠癌抑癌基因的启动子区高DNA甲基化的验证方法,通过DNA甲基化靶向测序技术检测甲基化程度、荧光定量PCR技术检测基因mRNA表达、Western印迹技术检测蛋白水平、流式细胞术检测细胞凋亡情况、CCK‑8实验和细胞克隆形成实验评估细胞增殖克隆能力、损伤修复实验评估细胞迁移能力、Transwell小室实验评估细胞侵袭能力、裸鼠成瘤实验模拟CPEB1基因在体内的致瘤能力等实验,证明CPEB1基因是一新的结直肠癌抑癌基因,且其启动子区存在高DNA甲基化位点,基因表达呈低表达模式。

    一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA含量的方法

    公开(公告)号:CN112342271A

    公开(公告)日:2021-02-09

    申请号:CN202011122900.5

    申请日:2020-10-20

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA含量的方法。首先公开了一种肽核酸探针,所述肽核酸探针中的核酸部分序列如SEQ ID NO:1所示,所述肽核酸探针中的肽部分序列如SEQ ID NO:2所示。还公开了一种同位素稀释质谱法定量检测游离DNA单链含量的方法包括:形成游离DNA‑生物素‑链霉亲和素磁珠复合物;加入肽核酸探针捕获所述游离DNA‑生物素‑链霉亲和素磁珠复合物;酶解;复溶;根据峰面积比间接计算样本中DNA含量;修正DNA浓度得到最终浓度值等步骤。本发明同位素稀释质谱法定量检测游离DNA单链含量的方法具有准确度高,结果可靠等优点。

    肽段同位素稀释质谱法定量重组肌钙蛋白I含量的方法

    公开(公告)号:CN106770821B

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201611144062.5

    申请日:2016-12-13

    Abstract: 肽段同位素稀释质谱法定量重组肌钙蛋白I含量的方法,它涉及一种准确定量重组肌钙蛋白I含量的方法;包括以下步骤:特征肽段设计;特征肽段质谱分析离子对的确定;LC‑MRM条件研究;样本分析前处理:主要步骤有:重组蛋白变性、还原烷基化、酶解、纯化样品、浓缩样品;数据分析:cTnI特异性肽段浓度,cTnI蛋白肽出峰时间4.20min;回收率及精密度:回收率及精密度符合规定要求,对重组cTnI特异性肽段液相质谱条件进行研究和改进,所建方法准确度好,速度快,出峰时间为4.20min。

    肽段同位素稀释质谱法定量重组肌钙蛋白I含量的方法

    公开(公告)号:CN106770821A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611144062.5

    申请日:2016-12-13

    Abstract: 肽段同位素稀释质谱法定量重组肌钙蛋白I含量的方法,它涉及一种准确定量重组肌钙蛋白I含量的方法;包括以下步骤:特征肽段设计;特征肽段质谱分析离子对的确定;LC‑MRM条件研究;样本分析前处理:主要步骤有:重组蛋白变性、还原烷基化、酶解、纯化样品、浓缩样品;数据分析:cTnI特异性肽段浓度,cTnI蛋白肽出峰时间4.20min;回收率及精密度:回收率及精密度符合规定要求,对重组cTnI特异性肽段液相质谱条件进行研究和改进,所建方法准确度好,速度快,出峰时间为4.20min。

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