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公开(公告)号：CN112980990A
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN202110317491.2
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉激素胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明根据文献资料查阅和数据库搜索最终选择了本实施所需的13条候选内参基因，通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对13个内参进行基因稳定性评价，以及RefFinder网址进行综合分析结果，获得了适用于柳杉GA3胁迫下荧光定量内参基因cln‑miR6725、novel1和18S，以及ABA胁迫下荧光定量内参基因U6和novel16。为柳杉不同激素胁迫下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，因而具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112877466A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110293453.8
申请日：2021-03-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了激素胁迫下柳杉荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明通过检索文献资料和数据库选择并设计了本发明的15条候选内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对候选内参基因评价稳定性，并结合RefFinder进行综合分析，获得柳杉在SA、ABA、MeJA、GA3激素胁迫条件下的荧光定量最佳内参基因Actin、UBC、CYP和18S，填补了柳杉激素胁迫下没有内参基因的现状，为柳杉激素胁迫下的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉基因功能研究提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN112795631A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110283554.7
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。上述非生物胁迫包括干旱胁迫，热害胁迫，低温胁迫和盐胁迫，本发明筛选并设计了15条候选内参基因，通过5种算法(delta‑CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder)评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下荧光定量内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN111165276A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201911307106.5
申请日：2019-12-17
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进草坪提前成坪的方法，选用草种为优选混播黑麦草、高羊茅、草地早熟禾草种，比例为5∶3∶2，10千克草籽/亩，所述促进草坪提前成坪的方法包括以下步骤：步骤1：种植场地土壤进行翻土、清理与整地；步骤2：场地土壤施基肥；步骤3：再次对场地进行翻土和平整；步骤4：种子建植；步骤5：种子进行覆土镇压；步骤6：对已经种植的种子进行浇水；步骤7：出苗整齐后去除覆盖物和追肥；步骤8：对植株进行修剪；步骤9：起坪。该促进草坪提前成坪的方法大大提高了草坪生长速度，缩短草坪成坪周期，提前10d左右成坪，同时降低生产管理成本。其次，草坪根部牢靠，紧密度能增加10％左右，草皮质量高。
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公开(公告)号：CN112899352B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202110316713.9
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。本发明选取10个成熟且表达量较为丰富且稳定的miRNAs及3个常用miRNA的内参基因(5SrRNA，18SrRNA和U6)作为候选基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过5种算法评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因，填补了柳杉非生物胁迫条件下没有miRNA荧光定量内参基因的现状，为柳杉非生物胁迫条件下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉miRNA基因功能研究提供了理论基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112877466B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202110293453.8
申请日：2021-03-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了激素胁迫下柳杉荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明通过检索文献资料和数据库选择并设计了本发明的15条候选内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对候选内参基因评价稳定性，并结合RefFinder进行综合分析，获得柳杉在SA、ABA、MeJA、GA3激素胁迫条件下的荧光定量最佳内参基因Actin、UBC、CYP和18S，填补了柳杉激素胁迫下没有内参基因的现状，为柳杉激素胁迫下的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉基因功能研究提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN112980990B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202110317491.2
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉激素胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明根据文献资料查阅和数据库搜索最终选择了本实施所需的13条候选内参基因，通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对13个内参进行基因稳定性评价，以及RefFinder网址进行综合分析结果，获得了适用于柳杉GA3胁迫下荧光定量内参基因cln‑miR6725、novel1和18S，以及ABA胁迫下荧光定量内参基因U6和novel16。为柳杉不同激素胁迫下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，因而具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112980989A
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN202110317280.9
申请日：2021-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的miRNA荧光定量内参基因及其引物和应用，属于植物分子生物学领域。本申请筛选了13个内参基因的基因序列，通过5种算法(delta‑CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder)评估候选基因的稳定性，获得了柳杉不同组织的miRNA荧光定量内参基因：novel16、cln‑miR6725、novel1、U6、novel6和pab‑miR159a，并相应的设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，提高检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN111788977A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010616099.3
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高柳杉实生苗成活率的种植方法，属于农业育苗技术领域。该方法包括以下步骤：1)母树的选择；2)球果的采收；3)球果的阴干处理；4)种子的低温冷藏；5)播种前对种子进行消毒处理和浸种催芽处理；6)栽植前准备栽培基质并对栽培基质进行消毒处理；7)种子发芽处理；8)移栽；9)移栽后管理。本申请摆脱了柳杉播种繁殖的季节限制，可一年四季进行柳杉实生苗繁殖；并缩短了柳杉种子发芽的时间，提前了约7d，通过直接在培养箱中生根2-3cm或出现真叶再直接进行移栽，保证了株行距，使苗光照充足，有利于减少病虫害，同时提高了成活率50％左右，有利于优质柳杉资源的保存。
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公开(公告)号：CN111763683A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010616253.7
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种柳杉基因CfICE1及其应用，属于基因工程技术领域。本发明从柳杉组织中克隆得到一个新的ICE基因，命名为CfICE1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过构建表达载体PBI-CfICE1转拟南芥进行功能验证，发现CfICE1在拟南芥中超表达促使拟南芥抗寒性增强；通过qRT-PCR技术对CfICE1基因在不同柳杉组织及不同低温胁迫下表达量进行分析，结果表明4℃时CfICE1在柳杉的种子和幼叶中表达量最高。以上结果表明CfICE1基因参与柳杉生长发育和低温胁迫的响应，并可应用在植物的抗逆基因工程改良中，应用前景广阔。
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