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公开(公告)号：CN111763683B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202010616253.7
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种柳杉基因CfICE1及其应用，属于基因工程技术领域。本发明从柳杉组织中克隆得到一个新的ICE基因，命名为CfICE1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过构建表达载体PBI‑CfICE1转拟南芥进行功能验证，发现CfICE1在拟南芥中超表达促使拟南芥抗寒性增强；通过qRT‑PCR技术对CfICE1基因在不同柳杉组织及不同低温胁迫下表达量进行分析，结果表明4℃时CfICE1在柳杉的种子和幼叶中表达量最高。以上结果表明CfICE1基因参与柳杉生长发育和低温胁迫的响应，并可应用在植物的抗逆基因工程改良中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN112795631B
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202110283554.7
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。上述非生物胁迫包括干旱胁迫，热害胁迫，低温胁迫和盐胁迫，本发明筛选并设计了15条候选内参基因，通过5种算法(delta‑CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder)评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下荧光定量内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN111788977B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202010616099.3
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高柳杉实生苗成活率的种植方法，属于农业育苗技术领域。该方法包括以下步骤：1)母树的选择；2)球果的采收；3)球果的阴干处理；4)种子的低温冷藏；5)播种前对种子进行消毒处理和浸种催芽处理；6)栽植前准备栽培基质并对栽培基质进行消毒处理；7)种子发芽处理；8)移栽；9)移栽后管理。本申请摆脱了柳杉播种繁殖的季节限制，可一年四季进行柳杉实生苗繁殖；并缩短了柳杉种子发芽的时间，提前了约7d，通过直接在培养箱中生根2‑3cm或出现真叶再直接进行移栽，保证了株行距，使苗光照充足，有利于减少病虫害，同时提高了成活率50％左右，有利于优质柳杉资源的保存。
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公开(公告)号：CN112501142A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011266568.X
申请日：2020-11-12
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本申请公开了一种柳杉抗寒调控基因CfAPX及其应用，属于植物分子生物学和基因工程技术领域。本申请的柳杉抗寒调控基因CfAPX具有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。本申请通过实验发现CfAPX基因在低温胁迫下柳杉叶片中的基因表达量在‑16℃达到峰值。通过构建表达载体PBI121‑CfAPX对CfAPX进行功能验证，发现，转基因植株CfAPX基因的表达量上调，与野生型相比均达到了显著或极显著水平。因此，CfAPX基因可以调节植物抗坏血酸过氧化物酶活性，从而提高细胞清除活性氧，维持稳态的能力，进一步提高植株的抗逆性，对植物的生长发育具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118392917A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410376745.1
申请日：2024-03-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定与评价柳杉耐热性的方法，属于作物学技术领域。本发明测定在25℃、29℃、33℃、37℃、39℃、41℃、43℃的热胁迫处理下柳杉叶片的耐热性生理指标：相对电导率、半致死温度、丙二醛含量、SOD活性、POD活性、可溶性糖含量；通过主成分分析、回归分析的方法，对各生理指标数据进行标准化处理，计算其隶属函数值，对负向指标采用反隶属函数计算，根据各耐热相关指标的隶属函数值及权重，计算各家系耐热性综合指数，建立耐热性评价体系；根据耐热性评价体系进一步筛选得出结论：即在39℃高温处理9h后，根据柳杉叶片细胞膜相对电导率变化的大小快速鉴定与评价柳杉耐热性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112877465A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110284668.3
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。该荧光定量内参基因为UBI、CYP和SDH1基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明通过柳杉转录组数据筛选了12个候选内参基因基因序列，利用三款内参基因稳定性评测软件对候选内参基因的稳定性进行评估，获得了柳杉不同组织的实时荧光定量PCR的最适基因UBI、CYP和SDH1。并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN112877465B
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202110284668.3
申请日：2021-03-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。该荧光定量内参基因为UBI、CYP和SDH1基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。本发明通过柳杉转录组数据筛选了12个候选内参基因基因序列，利用三款内参基因稳定性评测软件对候选内参基因的稳定性进行评估，获得了柳杉不同组织的实时荧光定量PCR的最适基因UBI、CYP和SDH1。并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，并提高了检测结果的可信度。
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公开(公告)号：CN111788977A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010616099.3
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高柳杉实生苗成活率的种植方法，属于农业育苗技术领域。该方法包括以下步骤：1)母树的选择；2)球果的采收；3)球果的阴干处理；4)种子的低温冷藏；5)播种前对种子进行消毒处理和浸种催芽处理；6)栽植前准备栽培基质并对栽培基质进行消毒处理；7)种子发芽处理；8)移栽；9)移栽后管理。本申请摆脱了柳杉播种繁殖的季节限制，可一年四季进行柳杉实生苗繁殖；并缩短了柳杉种子发芽的时间，提前了约7d，通过直接在培养箱中生根2-3cm或出现真叶再直接进行移栽，保证了株行距，使苗光照充足，有利于减少病虫害，同时提高了成活率50％左右，有利于优质柳杉资源的保存。
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公开(公告)号：CN111763683A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010616253.7
申请日：2020-06-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种柳杉基因CfICE1及其应用，属于基因工程技术领域。本发明从柳杉组织中克隆得到一个新的ICE基因，命名为CfICE1，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过构建表达载体PBI-CfICE1转拟南芥进行功能验证，发现CfICE1在拟南芥中超表达促使拟南芥抗寒性增强；通过qRT-PCR技术对CfICE1基因在不同柳杉组织及不同低温胁迫下表达量进行分析，结果表明4℃时CfICE1在柳杉的种子和幼叶中表达量最高。以上结果表明CfICE1基因参与柳杉生长发育和低温胁迫的响应，并可应用在植物的抗逆基因工程改良中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN115927308A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210890298.2
申请日：2022-07-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N1/21 , A01H5/04 , A01H5/02 , A01H5/12 , A01H5/00 , A01H6/82 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物分子生物学和基因工程技术领域，具体公开了cfo‑miR159a在影响木质素合成中的应用，本发明从柳杉中获得cfo‑miR159a的前体序列片段，并在柳杉维管形成层不同时期和不同组织进行表达分析，最后构建过表达载体和沉默表达载体进行遗传转化功能验证，结论证明cfo‑miR159a对植物木质部发育及木质素的合成具有促进作用，对木材材性的改良具有重要影响，具有重要的应用价值和意义。
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