公开(公告)号：CN112980990A

公开(公告)日：2021-06-18

申请号：CN202110317491.2

申请日：2021-03-24

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  朱李娟 ,  张莹婷 ,  胡海亮

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了柳杉激素胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明根据文献资料查阅和数据库搜索最终选择了本实施所需的13条候选内参基因，通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对13个内参进行基因稳定性评价，以及RefFinder网址进行综合分析结果，获得了适用于柳杉GA3胁迫下荧光定量内参基因cln‑miR6725、novel1和18S，以及ABA胁迫下荧光定量内参基因U6和novel16。为柳杉不同激素胁迫下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，因而具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN112899352A

公开(公告)日：2021-06-04

申请号：CN202110316713.9

申请日：2021-03-24

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  朱李娟 ,  杨俊杰 ,  张莹婷

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。本发明选取10个成熟且表达量较为丰富且稳定的miRNAs及3个常用miRNA的内参基因(5SrRNA，18SrRNA和U6)作为候选基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过5种算法评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因，填补了柳杉非生物胁迫条件下没有miRNA荧光定量内参基因的现状，为柳杉非生物胁迫条件下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉miRNA基因功能研究提供了理论基础。

公开(公告)号：CN112899352B

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202110316713.9

申请日：2021-03-24

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  朱李娟 ,  杨俊杰 ,  张莹婷

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了柳杉非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其专用引物和应用，属于植物分子生物学技术领域。本发明选取10个成熟且表达量较为丰富且稳定的miRNAs及3个常用miRNA的内参基因(5SrRNA，18SrRNA和U6)作为候选基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过5种算法评估候选基因的稳定性，获得了适用于柳杉各非生物胁迫下miRNA荧光定量内参基因，填补了柳杉非生物胁迫条件下没有miRNA荧光定量内参基因的现状，为柳杉非生物胁迫条件下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉miRNA基因功能研究提供了理论基础。

公开(公告)号：CN112980990B

公开(公告)日：2023-01-17

申请号：CN202110317491.2

申请日：2021-03-24

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  朱李娟 ,  张莹婷 ,  胡海亮

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了柳杉激素胁迫下miRNA荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明根据文献资料查阅和数据库搜索最终选择了本实施所需的13条候选内参基因，通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对13个内参进行基因稳定性评价，以及RefFinder网址进行综合分析结果，获得了适用于柳杉GA3胁迫下荧光定量内参基因cln‑miR6725、novel1和18S，以及ABA胁迫下荧光定量内参基因U6和novel16。为柳杉不同激素胁迫下miRNA的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，因而具有重要的应用价值。