公开(公告)号：CN112877466A

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202110293453.8

申请日：2021-03-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  薛金玉 ,  张莹婷 ,  杨俊杰

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了激素胁迫下柳杉荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明通过检索文献资料和数据库选择并设计了本发明的15条候选内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对候选内参基因评价稳定性，并结合RefFinder进行综合分析，获得柳杉在SA、ABA、MeJA、GA3激素胁迫条件下的荧光定量最佳内参基因Actin、UBC、CYP和18S，填补了柳杉激素胁迫下没有内参基因的现状，为柳杉激素胁迫下的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉基因功能研究提供了理论基础。

公开(公告)号：CN112877466B

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202110293453.8

申请日：2021-03-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  薛金玉 ,  张莹婷 ,  杨俊杰

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了激素胁迫下柳杉荧光定量内参基因及其引物的应用，属于植物分子生物学领域。本发明通过检索文献资料和数据库选择并设计了本发明的15条候选内参基因，并设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物。通过delta‑CT、GeNorm、NormFinder和BestKeeper四个软件对候选内参基因评价稳定性，并结合RefFinder进行综合分析，获得柳杉在SA、ABA、MeJA、GA3激素胁迫条件下的荧光定量最佳内参基因Actin、UBC、CYP和18S，填补了柳杉激素胁迫下没有内参基因的现状，为柳杉激素胁迫下的相关功能基因的表达定量提供了有力的支持，为柳杉基因功能研究提供了理论基础。

公开(公告)号：CN112980989A

公开(公告)日：2021-06-18

申请号：CN202110317280.9

申请日：2021-03-24

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 徐进 ,  薛金玉 ,  杨俊杰 ,  张莹婷

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了柳杉不同组织的miRNA荧光定量内参基因及其引物和应用，属于植物分子生物学领域。本申请筛选了13个内参基因的基因序列，通过5种算法(delta‑CT、geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder)评估候选基因的稳定性，获得了柳杉不同组织的miRNA荧光定量内参基因：novel16、cln‑miR6725、novel1、U6、novel6和pab‑miR159a，并相应的设计了内参基因的实时荧光定量PCR引物，该引物特异性强，扩增效率高，能够大大的提高采用实时荧光定量检测柳杉基因时的检测效率，提高检测结果的可信度。