利用锌指核酶技术培育斑马鱼的方法及其在建立药物筛选模型中的应用

    公开(公告)号:CN102250936B

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201110144503.2

    申请日:2011-05-31

    Inventor: 顾爱华 周勇

    Abstract: 利用锌指核酶技术培育斑马鱼的方法及其在建立药物筛选模型中的应用,本专利使用这一技术构建了DNA修复酶Ogg1基因突变的斑马鱼转基因系,并以此为基础建立了脑保护药筛选的动物模型。本发明首先确定了Ogg1基因特异性锌指结合位点以及锌指蛋白序列,以组装的三联体锌指蛋白表达载体为模板,体外转录锌指蛋白编码RNA,并导入斑马鱼受精卵诱变。筛选得到的阳性Ogg1突变系鱼具有明显的神经元DNA易损性,可致脑部特异性缺陷。本发明同时提供将该脑神经元易损性的模型用于脑保护药物的方法。利用本发明的新模型及方法,为脑保护药物的筛选提供了经济快捷的新途径,有助于开发治疗脑损伤的药物。

    环状RNA circPROSC在颅缝早闭症治疗中的应用

    公开(公告)号:CN117257948A

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202310824559.5

    申请日:2023-07-06

    Abstract: 本发明公开了环状RNAcircPROSC在颅缝早闭症治疗中的应用。抑制环状RNAcircPROSC的物质在制备颅缝早闭症治疗药物中的应用,所述的环状RNA circPROSC的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明发现circPROSC的高表达可在体内外显著促进间充质干细胞的成骨分化,敲减circPROSC显示相反的结果。此外,通过AAV‑circPROSCshRNA靶向干预circPROSC的表达可显著缓解颅缝早闭小鼠模型冠状缝的过早融合的症状。本发明为以circPROSC为靶点,为颅缝早闭的微创治疗提供全新的方案,对临床实践具有潜在的有益意义。

    环状RNA标志物hsa_circ_0001788及其应用

    公开(公告)号:CN109295218B

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN201811508733.0

    申请日:2018-12-11

    Abstract: 本发明建立颅缝早闭患者circRNA表达谱,提供颅缝早闭患者血清circRNA标志物hsa_circ_0001788,揭示血清中hsa_circ_0001788对颅缝早闭的诊断价值,用于制备颅缝早闭患者诊断试剂盒,为临床上颅缝早闭患者的早期发现和治疗提供支持。血清circRNA具有稳定性好,不易降解等优点,有较高的辅助诊断价值,利于临床推广使用。本发明人采用circRNA芯片检测,以获取疾病特异和异常表达的血清circRNA表达谱,并应用qRT‑PCR的方法进行验证,具有严密的设计和评价体系。首次发现血清中hsa_circ_0001788作为一个重要的生物学检测指标,检测指标微创廉价,可应用于临床检测,在颅缝早闭临床的早期诊断、鉴别诊断具有重要作用,本发明也从分子水平上为颅缝早闭的诊断提供新的思路,有望提高颅缝早闭的早期诊断率。

    一种检测环境中多环芳烃化学物的质粒及应用

    公开(公告)号:CN103898162A

    公开(公告)日:2014-07-02

    申请号:CN201410105958.7

    申请日:2014-03-20

    Abstract: 本发明为一种检测环境中多环芳烃化学物的质粒及应用,涉及分子生物学及环境生物技术领域。本发明通过提取人源性AHR基因启动子,以含萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶双报告基因的CV060质粒为载体,插入特定序列的AHR基因启动子,构建了含AHR基因启动子的内参内置型双荧光素酶报告基因的重组慢病毒质粒。本发明的检测方法重复性好、灵敏度高、检测结果可靠,且操作简单方便,可广泛地应用于环境中多环芳烃类物质的检测。

    一种使用人工染色体重组技术培育心血管系统荧光转换斑马鱼的方法

    公开(公告)号:CN102250951B

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201110141405.3

    申请日:2011-05-30

    Abstract: 本发明公开了一种使用人工染色体构建转基因斑马鱼的技术及其辅助质粒。本专利使用这一技术构建了蓝色荧光转换黄色荧光的心血管系统转基因系。步骤包括:1)特异性人工染色体获得及目的基因的构建2)人工染色体重组插入目的基因3)重组的人工染色体导入斑马鱼受精卵4)阳性转基因系筛选。本技术发明是一种具有国际领先水平的细菌人工染色体重组工程技术,极大的提高了转基因构建效率,将为我国生物医学基础研究和药物研究提供有力的工具。

    重组人FSHR-57多肽蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN101863973A

    公开(公告)日:2010-10-20

    申请号:CN201010179522.4

    申请日:2010-05-21

    Abstract: 本发明涉及一种重组人FSHR-57多肽蛋白及其制备方法和应用,该多肽疫苗选取了卵泡刺激素受体(FSHR)N端57位氨基酸,含B细胞表位且有效避免与黄体生成素受体(LHR)、甲状腺刺激素(TSHR)的交叉反应。运用原核表达、结合切胶纯化及梯度透析复性的方法,制备出高纯度的FSHR-57蛋白多肽,经Non-reduced PAGE+Western blot,HPLC及质谱氨基酸测序鉴定,确认该方法制备的蛋白多肽准确无误且纯度高于97%。FSHR-57蛋白多肽安全性好,不干扰睾酮及雌二醇等性激素的水平,具较强的免疫原性,可以成为男性避孕疫苗的候选。

    检测环境化学物的雄性生殖毒性的制剂及模型建立方法

    公开(公告)号:CN101805751A

    公开(公告)日:2010-08-18

    申请号:CN201010129228.2

    申请日:2010-03-19

    Abstract: 本发明涉及一种双链siRNA及其应用,特别是涉及一种DNA损伤修复ogg1基因的双链siRNA,将其应用于小鼠睾丸微环境敲减基因表达,可提高雄性生殖系统对环境化学物的损伤作用的敏感性,从而提供一种快速、灵敏的检测环境化学物的雄性生殖毒性的方法。本发明作为环境化学物生殖毒性的检测的新方法,可以实现既灵敏又快速的反映化学物造成的雄性生殖危害,将有助于我们更准确的评价化学物的安全性,也有利于缩短药品的临床前生殖毒性实验周期。

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