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公开(公告)号：CN104946685A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510282338.5
申请日：2015-05-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/85 , C07K14/54 , C07K14/535 , C12N5/0784
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，分别公开了一种高效制备猪白细胞介素4(IL-4)和一种高效制备猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)重组蛋白的方法，以及利用这两种重组蛋白体外制备猪树突状细胞的应用。本发明方法简单，易操作，成本低，诱导细胞纯度高，具有良好应用前景和使用价值。
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公开(公告)号：CN101985635A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN201010544629.4
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了高效表达山羊生长激素GH的乳腺特异性表达载体，属于生物工程技术领域。GH的cDNA序列见SEQ ID NO.1。生长激素既可以促进乳腺导管形成，也可以促进山羊的乳腺上皮细胞的增殖，从而增加产奶量。将本发明构建的乳腺特异性表达载体pcGH采用脂质体法，导入体外培养的人乳腺癌细胞Bcap-37中，在转染后收集细胞培养上清；采用ELISA的方法检测细胞培养上清中的GH含量。结果显示与未转染pcGH的空白组细胞相比，转染pcGH组细胞GH表达量显著提高。表明pcGH载体可已在乳腺细胞上成功表达GH，为下一步生产转gh基因奶山羊奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN116665779B
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202310368843.6
申请日：2023-04-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: G16B30/10 , G16B45/00 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/64 , A61K31/7088 , A61P31/14 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种筛选家禽RNA病毒源siRNA的方法及其应用。本发明筛选家禽病毒源siRNA方法是基于NCBI GEO数据库中GSE数据集的小RNA与相应参考文献的病毒毒株序列进行比对。其次，通过基因组可视化软件IGV比对可知，IBVM41病毒源siRNA富集区为IBV M41 NSP10siRNA富集区序列。我们将IBVM41 NSP10siRNA富集区序列克隆至能高效表达siRNA的pSilencer4.1载体中，构建成PS‑M10质粒。最后，将PS‑M10质粒转染至巨噬细胞，再进行IBVM41感染试验，荧光定量PCR以及蛋白质印迹结果表明，PS‑M10可高效抑制IBV M41的复制，限制病毒的增殖。
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公开(公告)号：CN113980912B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202111251057.5
申请日：2021-10-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一株IBV病毒QX亚型毒株，并公开可复制IBV病毒QX亚型毒株的基因敲除细胞系及其构建方法和应用，挑选多株传代细胞系进行IBV病毒的感染，检测IBV病毒的复制载量和滴度，初步筛选能复制IBV病毒的细胞系；对所筛选出的细胞系利用siRNA干扰方法和/或基因敲除方法，干扰和/或敲除抑制病毒复制的相关基因，筛选得到使病毒大量复制的稳定传代细胞系。本发明构建一株敲除miRNA生成过程中相关酶的稳定传代细胞系可以极显著提高传染性支气管炎病毒QX亚型的复制量。该基因敲除的细胞系有望开发成为替代传统鸡胚繁毒的工具细胞系，应用细胞系繁殖的家禽病毒纯度高，杂质少，纯化简便且可以显著降低病毒的繁殖成本。
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公开(公告)号：CN116286978B
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310204900.7
申请日：2023-03-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/70 , C12N5/10 , C12N1/21 , C12N1/12 , C07K14/465 , A61K38/17 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了重组质粒、重组菌株或细胞系，重组钙结合蛋白及其应用，具体来源于鸡肠道黏液中的钙结合蛋白，可以在DF1细胞上抵抗M41以及IBDV的。本发明使用重组蛋白、重组质粒分别处理DF1细胞后，细胞中IBDV、IBV‑M41复制量明显降低，IBDV/IBV‑M41病毒的入侵及复制被抑制，且在体内实验上得到了印证。因此，该重组蛋白有望作为预防/治疗鸡传染性支气管炎病毒以及传染性法氏囊病毒的候选蛋白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110029079B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN201910236982.7
申请日：2019-03-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了表达分泌猪伪狂犬病毒蛋白优势抗原区的重组枯草芽孢杆菌及应用。通过蛋白结构分析获得gC和gD蛋白优势抗原区，并通过分子生物学技术构建以枯草芽孢杆菌分泌型质粒p43NMK为载体的重组质粒，电击转化枯草芽孢杆菌后筛选重组菌株。通过鼻腔免疫重组菌株可以显著提高局部黏膜免疫和系统免疫，该重组枯草芽孢杆菌有望成功开发成为预防猪伪狂犬病的鼻腔疫苗，并用于药物的研发。
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公开(公告)号：CN105907769B
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201610302187.X
申请日：2016-05-09
Applicant: 南京农业大学 , 南京莱福佳农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种杀虫毒素蛋白HS487。本发明还公开编码杀虫毒素蛋白的基因hs487。发明还公开了含有杀虫毒素蛋白基因hs487的重组载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。本发明还公开杀虫毒素蛋白基因hs487、上述的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在制备杀虫毒素蛋白HS487中的应用。本发明还公开杀虫毒素蛋白HS487的制备方法。本发明还公开制备方法制备得到的杀虫毒素蛋白HS487制剂。由嗜线虫沙雷氏菌R187‑2杀虫毒素蛋白HS487编码基因hs487推导其氨基酸序列，合成的杀虫毒素蛋白HS487对很多农业害虫有着很高的致病率。该杀虫毒素蛋白具有杀虫活性高、杀虫谱广、杀虫效率高的有益特点。
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公开(公告)号：CN110029079A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910236982.7
申请日：2019-03-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了表达分泌猪伪狂犬病毒蛋白优势抗原区的重组枯草芽孢杆菌及应用。通过蛋白结构分析获得gC和gD蛋白优势抗原区，并通过分子生物学技术构建以枯草芽孢杆菌分泌型质粒p43NMK为载体的重组质粒，电击转化枯草芽孢杆菌后筛选重组菌株。通过鼻腔免疫重组菌株可以显著提高局部黏膜免疫和系统免疫，该重组枯草芽孢杆菌有望成功开发成为预防猪伪狂犬病的鼻腔疫苗，并用于药物的研发。
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公开(公告)号：CN105907769A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610302187.X
申请日：2016-05-09
Applicant: 南京农业大学 , 南京莱福佳农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种杀虫毒素蛋白HS487。本发明还公开编码杀虫毒素蛋白的基因hs487。发明还公开了含有杀虫毒素蛋白基因hs487的重组载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。本发明还公开杀虫毒素蛋白基因hs487、上述的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌在制备杀虫毒素蛋白HS487中的应用。本发明还公开杀虫毒素蛋白HS487的制备方法。本发明还公开制备方法制备得到的杀虫毒素蛋白HS487制剂。由嗜线虫沙雷氏菌R187?2杀虫毒素蛋白HS487编码基因hs487推导其氨基酸序列，合成的杀虫毒素蛋白HS487对很多农业害虫有着很高的致病率。该杀虫毒素蛋白具有杀虫活性高、杀虫谱广、杀虫效率高的有益特点。
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公开(公告)号：CN102041271A
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN201010544656.1
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了高效表达类胰岛素生长因子IGF-1的乳腺特异性表达载体，属于生物工程技术领域。IGF-1的cDNA序列见SEQ ID NO.1。将本发明构建的乳腺特异性表达载体pIN在体外采用脂质体法转染到人乳腺癌细胞Bcap-37，转染后提取细胞上清蛋白和细胞蛋白；采用western blot和放免方法检测细胞上清蛋白和细胞蛋白中IGF-1含量。结果显示与未转染乳腺特异性表达载体pIN的对照组相比，转染乳腺特异性表达载体pIN组中，IGF-1表达量显著提高。表明pIN载体可已在乳腺细胞上成功表达IGF-1，为下一步生产转IGF-1基因奶山羊奠定坚实的基础。
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