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公开(公告)号：CN112724223B
公开(公告)日：2022-10-21
申请号：CN202011588887.2
申请日：2020-12-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/44 , C12N15/30 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K16/20 , G01N33/533 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种毕氏肠微孢子虫孢壁蛋白单克隆抗体的制备及其应用。基于重组蛋白EbSWP1制得的单克隆抗体对于检测毕氏肠微孢子虫具有良好的特异性，不与虾肝肠微孢子虫、兔脑炎微孢子虫、大肠杆菌等发生反应。本发明制备的单克隆抗体可与荧光素标记物偶联制得免疫荧光抗体，利用该抗体与环境、粪便中的毕氏肠微孢子虫做直接免疫荧光反应，可以快速、灵敏、准确地检验毕氏肠微孢子虫。与实验室最常用的PCR检测方法相比，本发明的免疫荧光检测方法操作简便，耗费时间短，且检测准确度高，以PCR结果为参考，本发明检测方法的准确率高于85％，该方法简便、快速、灵敏、准确的特点使其适用于基层检测应用。
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公开(公告)号：CN113552335A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202010446599.7
申请日：2020-05-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/532 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N23/04 , G01N23/20
Abstract: 本发明公开了一种用于定位隐孢子虫胞内不同寄生时期特异表达蛋白的免疫电镜样品的制备方法。本发明将感染有隐孢子虫卵囊的HCT‑8细胞样品在戊二醛‑多聚甲醛混合固定液中固定，然后经低熔点琼脂糖预包埋，乙醇梯度脱水，LR‑White树脂渗透，包埋，聚合，将样品包埋块超薄切片后进行免疫金标记和重金属染色，即可制得电镜观察用的隐孢子虫样本。通过本发明方法，制备的样品的反应免疫原性良好，隐孢子虫形态良好，结构完整，隐孢子虫的纳虫空泡边缘光滑，可以看清胞内时期的隐孢子虫内部结构的样品，能够为研究胞内寄生时期的隐孢子虫的形态及虫体蛋白的定位，有利于研究隐孢子虫的入侵机制、代谢通路、致病机制，为开发疫苗提供可能。
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公开(公告)号：CN111820185B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202010712347.4
申请日：2020-07-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明公开了一种IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁方法及其应用，所述扩繁方法为先将购买的IFN–γ基因缺陷杂合子交配，再将其子代中的纯合子和杂合子进行交配，再将子代中的雄性和雌性纯合子交配即可获得大量IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠，实现IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠的扩繁，同时获得的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠较直接购买的IFN–γ基因缺陷纯合子小鼠体质正常，可更好用于隐孢子虫体外感染模型建立，极低剂量即可造成快速、慢性感染，且过程中小鼠死亡率低，可以满足隐孢子虫感染需要较长研究周期的要求。而且扩繁后获得的FN–γ基因缺陷纯合子小鼠可再直接纯纯交配产后代，实现大量扩繁，无需再经过复杂的纯杂交配。
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公开(公告)号：CN119351466A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411503015.X
申请日：2024-10-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/30 , A61K39/002 , A61P33/02
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种弓形虫基因敲除疫苗虫株的构建方法及其应用，通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TGGT1_202920基因得到ΔTGGT1_202920虫株，该虫株具有在体外能够正常培养、在体内几乎无毒的特性；对动物免疫接种ΔTGGT1_202920虫株后，可以产生良好的免疫保护力，能抵抗野生型弓形虫的感染，能用于制备抗弓形虫病疫苗，以预防弓形虫感染。
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公开(公告)号：CN118546788B
公开(公告)日：2024-12-24
申请号：CN202410651467.6
申请日：2024-05-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酸脱氢酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用，该虫株(Δsdhα)通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TgSDHα得到；敲除TgSDHα后，显著影响弓形虫的生长，减缓虫体体外的增殖速度，并能降低弓形虫体内繁殖数量；Δsdhα虫株具有体外可以传代培养，体内几乎无毒力的特性，感染Δsdhα虫株的小鼠全部存活；对动物免疫接种Δsdhα虫株后可以产生良好的免疫保护力，能抵抗野生型弓形虫的感染。Δsdhα虫株能用于制备抗弓形虫病的疫苗，为防治弓形虫病提供安全、有效的疫苗候选。同时，TgSDHα可以作为弓形虫药物设计靶点，为防治弓形虫病提供更多有效药物靶标与基因资源。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118620731A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410507540.2
申请日：2024-04-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种泰泽隐孢子虫基因的弓形虫异源表达虫株及其应用。本发明通过基因编辑技术将泰泽隐孢子虫的Ctgp40和Ctgp15基因在弓形虫中进行异源表达，成功构建得到泰泽隐孢子虫基因的弓形虫编辑虫株；通过异源表达，在弓形虫中能表达并定位出CtGP40和CtGP15蛋白；进行动物免疫后，显示随着免疫后的天数增加，小鼠体内的IgG抗体水平也在不断增长，卵囊排泄强度明显减弱，减小阳性小鼠数量，降低感染性，且在免疫后不会影响小鼠生长，免疫后小鼠均未死亡，在感染泰泽隐孢子虫的过程中，发挥了一定的免疫保护作用，能够用于制备泰泽隐孢子虫疫苗虫株，防治泰泽隐孢子虫感染。
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公开(公告)号：CN114540508B
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202210228164.4
申请日：2022-03-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6848 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于牛中常见艾美耳球虫检测和虫种鉴定的巢式PCR方法及试剂盒。本发明采用牛的艾美耳球虫SSU rRNA基因作为检测靶序列，所述序列中具有保守区域和可变区域，相应扩增片段中包含多个单核苷多态性位点；本发明进一步通过设计巢式PCR引物，建立了牛中常见艾美耳球虫巢式PCR检测方法，可检测出不同的牛中常见艾美耳球虫，进行艾美耳球虫的虫种鉴定。采用本发明的检测方法能够最低检测到一个卵囊，其扩增效率高，检测灵敏，可以准确区分牛感染的不同艾美耳球虫，并确定引起发病的不同虫种，用于牛球虫病的精准防控。
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公开(公告)号：CN118436628B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202410470536.3
申请日：2024-04-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/167 , A61K31/277 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了二苯基脲类化合物在制备抗弓形虫药物中的应用。本发明通过对咪唑苯脲及二苯基脲类化合物的体外抗弓形虫的研究，得到7种能有效抑制弓形虫生长的化合物，对弓形虫的体外抑虫率高，能够显著抑制虫体噬斑的形成，很好地抑制弓形虫的增殖；其中二苯基脲类化合物：1,3‑双(3‑氟苯基)脲、1‑(3‑溴苯基)‑3‑(4‑氯苯基)脲、1‑(3‑氯苯基)‑3‑(4‑氯苯基)脲，细胞毒性较小，还能用于治疗小鼠感染的弓形虫病，显著抑制弓形虫在体内繁殖，且不会影响小鼠生长，具有显著的抑虫效果，可以用于制备和开发更多的抗弓形虫药物。
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公开(公告)号：CN116068177B
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202310034659.8
申请日：2023-01-10
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/577 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原，采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体；用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体，即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法，可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定，且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118360157B
公开(公告)日：2024-12-24
申请号：CN202410336425.3
申请日：2024-03-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/11 , C12N15/85 , C12N15/52 , C12N9/22 , C12N15/113 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酰辅酶A合成酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用。本发明提供一株弓形虫基因缺失疫苗虫株(Δscsα)，该虫株通过基因编辑技术敲除弓形虫琥珀酰辅酶A合成酶α亚基(TgSCSα)基因得到；弓形虫敲除TgSCSα后在体外仍可培养、在体内具有几乎无毒的特性；动物免疫接种Δscsα后，能够产生良好的免疫保护力，有效抵抗野生型弓形虫的感染。TgSCSα具有作为弓形虫疫苗设计靶点的潜力，能用于制备弓形虫基因缺失疫苗虫株。Δscsα是一株具备良好应用前景的候选疫苗虫株，可以为弓形虫病的防控提供更多选择和策略。
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