公开(公告)号：CN116840473A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202310581514.X

申请日：2023-05-23

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 冯耀宇 ,  孙连静 ,  肖立华 ,  李娜 ,  郭亚琼

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/535 ,  C07K16/20 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的双抗体夹心ELISA检测方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原，采用单克隆抗体制备技术，经过融合、克隆、筛选制备获得识别微小隐孢子虫胞内期所有阶段的单克隆抗体，作为检测抗体；利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原免疫新西兰兔，获得针对微小隐孢子虫的多克隆抗体，作为捕获抗体，并通过最佳稀释度的确定、封闭剂的选择、最佳孵育时间的确定等系列优化，建立了可用于临床样本中微小隐孢子虫的检测及鉴定的双抗体夹心ELISA检测方法及其试剂盒。该方法及试剂盒特异性较强，具有较好的灵敏度。

公开(公告)号：CN116068177B

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202310034659.8

申请日：2023-01-10

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖立华 ,  孙连静 ,  冯耀宇 ,  李娜 ,  郭亚琼

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/533 ,  G01N33/577 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原，采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体；用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体，即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法，可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定，且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN116068177A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202310034659.8

申请日：2023-01-10

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖立华 ,  孙连静 ,  冯耀宇 ,  李娜 ,  郭亚琼

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/533 ,  G01N33/577 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光试剂、试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明通过利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原，采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体；用荧光染料标记步骤S1所得抗微小隐孢子虫的单克隆抗体，即获得检测微小隐孢子虫的直接免疫荧光检测试剂。应用本发明试剂建立的直接免疫荧光检测方法，可用于临床粪便样本及环境中微小隐孢子虫的检测及鉴定，且敏感性高、特异性强、稳定性好、诊断速度快，具有良好的应用前景。