公开(公告)号：CN108411033A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810124222.2

申请日：2018-02-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  王凯莉 ,  邓权清 ,  蒋艳 ,  陈健文

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明属于植物病毒检测技术领域，具体公开了一种用于快速检测甘蔗线条花叶病毒的RT-LAMP试剂盒和方法。所述试剂盒包含一组检测甘蔗线条花叶病毒的RT-LAMP引物组，由一对外引物对F3、B3和一对内引物FIP、BIP组成；所述F3、B3、FIP、BIP的核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:4所示。所述检测方法包括提取待测样品总核酸、利用上述试剂盒进行RT-LAMP反应、荧光染色鉴定待测样品是否感染甘蔗线条花叶病毒等步骤。本发明试剂盒具有特异性强、灵敏度高的优点，能准确鉴定感染甘蔗线条花叶病毒的植株；检测方法操作简便，适合甘蔗线条花叶病毒的田间快速检测。

公开(公告)号：CN102329858B

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201110218585.0

申请日：2011-08-02

Applicant: 广州甘蔗糖业研究所 ,  华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  姜子德 ,  邓海华 ,  习平根 ,  刘睿 ,  李敏慧 ,  陈健文 ,  杨湛端 ,  陈仲华

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及甘蔗病原菌检测领域，提出甘蔗黑穗病菌巢式PCR快速检测方法，包括基因组DNA提取、第一轮PCR扩增、第二轮PCR扩增、PCR扩增产物检测步骤，其中第一轮PCR扩增中采用真菌核糖体基因转录间隔区ITS的通用引物ITS4和ITS5，第二轮PCR扩增中采用甘蔗黑粉菌核糖体基因转录间隔区ITS的特异引物Smut-L1和Smut-R2，本发明的实质性特点有：1、检测灵敏度极高，即使在甘蔗无黑穗病症状或者感染黑粉菌量极少时也能准确检测出黑穗病菌。2、特异性强，受其他菌类干扰小，准确率高。3、具有耗时短、检测速度快的特点，适用于甘蔗引种检疫、脱毒种苗质量检测及甘蔗黑穗病抗性鉴定早期无症状叶片检测等。

公开(公告)号：CN102204465A

公开(公告)日：2011-10-05

申请号：CN201110099531.7

申请日：2011-04-20

Applicant: 广州甘蔗糖业研究所 ,  华南农业大学

Inventor： 沈万宽 ,  姜子德 ,  陈健文 ,  习平根 ,  邓海华 ,  刘睿

IPC: A01G1/00 ,  A01G7/06

Abstract: 本发明涉及植物抗病性鉴定技术领域，提出一种甘蔗黑穗病抗性鉴定方法，首先用微量新鲜甘蔗黑粉菌冬孢子分离培养出甘蔗黑粉菌异型交配型（+、-）单倍体担孢子，然后经过菌株扩大培养、接种、发病率调查、抗性评价等步骤，本发明具有以下突出的实质性特点和显著的进步：1、只需极少量甘蔗黑粉菌冬孢子经分离培养，即可满足接种需要，工作量小；2、异型交配型菌株能够超低温保存，经活化、扩大培养后可作接种源，无需每次鉴定都重新采取菌种并分离培养；3、本发明抗性鉴定历期短、灵敏性高；4、还可利用本发明的方法，鉴别出参试品种所抗感的黑穗病生理小种类型，有效指导甘蔗抗黑穗病育种及蔗区品种合理配置。