公开(公告)号：CN117625532A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202311664001.1

申请日：2023-12-05

Applicant: 广东海洋大学 ,  华南农业大学

Inventor： 刘远佳 ,  陈建新 ,  亓文宝 ,  张桂红 ,  张新珩 ,  刘泽鑫 ,  区玮欣 ,  朱君海

IPC: C12N5/0786 ,  C12N5/071 ,  C12Q1/18 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种抗非洲猪瘟病毒药物筛选模型及筛选方法，涉及生物医药技术领域，该药物筛选模型的构建方法依次包括以下步骤：(1)使用猪肺泡巨噬细胞连续培养非洲猪瘟病毒至38代或以后，得非洲猪瘟病毒适应株；(2)将猪肺泡巨噬细胞培养至细胞贴壁，用PBS缓冲液清洗；(3)用非洲猪瘟病毒适应株按MOI＝1.2‑1.4的剂量感染猪肺泡巨噬细胞，得抗非洲猪瘟病毒药物筛选模型。本发明还公开了筛选抗非洲病毒药物的方法。本发明抗ASFV药物筛选模型及筛选方法可以快速、有效的筛选待测药物的体外抗ASFV活性，比较不同药物抗ASFV的活性强弱，为筛选出安全有效的抗ASFV药物提供了切实可行的方法。

公开(公告)号：CN114592090B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202210190570.6

申请日：2022-02-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张桂红 ,  高琦 ,  冯永智 ,  龚浪 ,  王衡 ,  郑泽中 ,  蔡孟楷

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型和Ⅱ型非洲猪瘟病毒的双重荧光定量PCR检测引物和探针及试剂盒，所述双重荧光定量PCR检测引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1～2和4～5所示。并进一步建立了检测方法和检测试剂盒。该方法特异性强，与其他病毒无交叉反应；灵敏度高，最低检测拷2贝数分别为1.07×10 copies/μL和3.13×104copies/μL；重复性好，Ct值变异系数均小于2％；应用该方法与OIE推荐的荧光定量PCR方法检测结果一致。本发明建立的双重荧光定量PCR为鉴别基因I型和II型ASFV提供了快速检测方法，有利于完善中国针对ASF制定的高效防控措施。(56)对比文件Thi Bich Ngoc Trinh 等.Development ofa novel real-time PCR assay targeting p54gene for rapid detection of African swinefever virus (ASFV) strains circulating inVietnam《.VetMed Sci.》.2021,第7卷(第6期),第2268-2272页.Carmina Gallardo 等. Enhanceddiscrimination of African swine fevervirus isolates through nucleotidesequencing of the p54, p72, and pB602L(CVR) genes《.Virus Genes》.2009,第38卷(第1期),摘要，第86页右栏第2段至第92页左栏第1段.

公开(公告)号：CN113797184B

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202110832036.6

申请日：2021-07-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王衡 ,  郭彦辰 ,  张桂红 ,  龚浪 ,  陈洋 ,  孙彦阔 ,  郑泽中 ,  罗依琢

IPC: A61K31/085 ,  A61K36/70 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开了丹叶大黄素在制备防治非洲猪瘟病毒的药物中的应用，本发明公开了丹叶大黄素具有显著的抗非洲猪瘟病毒的作用。其最大无毒剂量为40μM，对于非洲猪瘟病毒的感染和增殖能够有效抑制，能够作为防治非洲猪瘟的药物，在非洲猪瘟的防治方面具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN108309972B

公开(公告)日：2022-08-02

申请号：CN201710055364.3

申请日：2017-01-17

Applicant: 华南农业大学 ,  江西鹏创生物科技有限公司

Inventor： 陈建新 ,  田鸽 ,  李志萍 ,  曾振灵 ,  张桂红 ,  汤有志 ,  邱电 ,  张明昕 ,  吴倩倩

IPC: A61K31/366 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了广藿香酮在制备防治猪繁殖与呼吸综合征药物中的应用。从中药广藿香中提取获得广藿香酮，通过免疫荧光显微镜分析、RT‑PCR及Western blot等方法确证广藿香酮在Marc‑145细胞上具有良好的抗PRRSV活性，可作为有效成分制备防治猪繁殖与呼吸综合征的药物。

公开(公告)号：CN111117974B

公开(公告)日：2022-02-22

申请号：CN201911328787.3

申请日：2019-12-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张桂红 ,  易和友 ,  于之清 ,  马俊

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/869 ,  C12N9/22 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种可视化绿色荧光猪伪狂犬病毒及其构建方法，所述可视化绿色荧光猪伪狂犬病毒为：在伪狂犬病毒的次要骨架蛋白VP24的Met‑1/Gly‑2之间插入有荧光蛋白。本发明利用CRISPR/Cas9技术，将荧光蛋白EGFP引入PRV基因组，这样产生的重组病毒自身带有绿色荧光标签，无需抗体或者荧光素标记，便可在荧光下观测到单个病毒粒子的定位和运动，从而可以利用绿色荧光追踪病毒粒子的行踪。该重组PRV病毒为研究PRV病毒侵袭宿主的详细感染进程创造了条件。

公开(公告)号：CN106749553B

公开(公告)日：2020-12-11

申请号：CN201611015852.3

申请日：2016-11-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张桂红 ,  王衡 ,  记方晓 ,  孙彦阔 ,  冀池海 ,  曾梦

IPC: C07K14/11 ,  C12N15/70 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  C09K11/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明首先提供了猪流感病毒的血凝素重组蛋白的制备方法，通过去除HA的信号肽。根据HA序列设计一对带有HIS标签的引物，构建了带有6*His‑麦芽糖结合蛋白（MBP）组合标签的原核表达质粒。在大肠杆菌表达系统中成功获得以可溶形式表达的HA重组蛋白。该蛋白能够与H1N1亚型猪流感病毒HA鼠源抗体发生反应，说明了HA重组蛋白具有良好的抗原性，利用该凝素重组蛋白建立液相芯片检测技术，灵敏度比ELISA高，该方法的建立，将为开展猪流感病毒抗体的检测提供必要的技术补充，为其它疫病抗体液相芯片检测技术的研究奠定技术基础，为多种猪病抗体多重液相芯片检测技术的建立提供试验依据。

公开(公告)号：CN110438260B

公开(公告)日：2020-10-23

申请号：CN201910689509.4

申请日：2019-07-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王衡 ,  宋雪梅 ,  张桂红 ,  杨奎亮 ,  卢刚 ,  李中圣

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒核酸试纸条检测试剂盒，其含有一种用于检测非洲猪瘟的引物组，上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；其中，上游引物标记Biotin，下游引物标记FITC。本发明通过组织裂解液直接获取病毒DNA，无需核酸抽提步骤；通过高效核酸扩增酶减少PCR反应时间；对引物进行标记，通过核酸试纸条显色方法替代核酸琼脂糖电泳显色方法。本发明建立了适合临床使用的高效、快检非洲猪瘟病毒的方法，并且与传统的琼脂糖凝胶电泳方法相比，无需任何仪器设备,操作简单，具有更高的灵敏性。

公开(公告)号：CN111492985A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN201911312456.0

申请日：2019-12-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 邓启伟 ,  张桂红

IPC: A01K1/01

Abstract: 本发明公开了新型猪场管道式清污系统，包括上清污管道、下清污管道、盘塞链、圈舍地板、驱动转轮和斜面漏粪板，所述斜面漏粪板的底部与上清污管道的顶部连接，所述上清污管道底部四角处均连通有转移管道，所述转移管道的底部连通有下清污管道，所述上清污管道和下清污管道的内部均连接有塞盘链，所述驱动转轮的外表面连接有外壳，且驱动转轮通过转轴连接有驱动电机，本发明通过驱动转轮、上清污管道、下清污管道和塞盘链之间的配合可以将清污管道中地粪污一次性拉走，方便快捷，并且该清污设备安装维修方便，本发明利用管道式清除的方式，解决了槽型粪道底部和两侧平整度问题造成的清除困难的问题，同时降低了施工难度。

公开(公告)号：CN110964849A

公开(公告)日：2020-04-07

申请号：CN201911154632.2

申请日：2019-11-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周沛 ,  张桂红 ,  郝香琪 ,  王衡 ,  龚浪 ,  亓文宝 ,  符雪滢

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及病毒分析检测领域，具体涉及一种消除非洲猪瘟病毒检测假阳性的方法，是在提取待测样品DNA进行病毒粒子DNA检测之前，加入DNase I与待测样品共孵育。本发明利用Dnase I对样品进行预处理，有效区分了游离ASFV核酸和ASFV粒子，避免了实际检测中出现假阳性的现象，提高了检测的准确性。另外，本发明改善了PCR和qPCR的引物，进一步提高了对ASFV粒子的检测限。最后，本发明得到的PCR和qPCR试剂盒，能够快速采样检测，特异性灵敏，价格低廉，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN105853406B

公开(公告)日：2020-01-21

申请号：CN201610241098.9

申请日：2016-04-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈建新 ,  吴倩倩 ,  张桂红 ,  刘雅红 ,  陈耀 ,  亓文宝 ,  罗满林 ,  靳珍

IPC: A61K31/353 ,  A61P31/12 ,  A61P11/00 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了来源于葡萄籽提取物的原花青素在制备防治猪繁殖与呼吸综合征药物中的用途。药理试验表明，原花青素有效抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒在细胞的增殖，可作为药效成分配以辅助剂制成注射液或口服液防治猪繁殖与呼吸综合征。