公开(公告)号：CN110467663B

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN201910747933.X

申请日：2019-08-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  袁晓龙 ,  何颖婷 ,  李加琪 ,  张豪

IPC: C07K14/47 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了RSPO3基因在母猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以直径为3～5和7～10mm的两种卵泡为实验材料，采用测序技术研究H3K4me3与卵巢卵泡发育相关基因表达水平的关系。通过ChIP‑Seq发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因启动子区的H3K4me3富集程度有显著差异；通过qRT‑PCR发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因的表达量有显著差异；通过促进或抑制母猪卵巢颗粒细胞中H3K4me3的程度发现促进H3K4me3程度可促进RSPO3基因的转录，抑制H3K4me3程度可抑制RSPO3基因的转录；通过超表达或干扰RSPO3发现RSPO3可促进母猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋亡。

公开(公告)号：CN110467663A

公开(公告)日：2019-11-19

申请号：CN201910747933.X

申请日：2019-08-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  袁晓龙 ,  何颖婷 ,  李加琪 ,  张豪

IPC: C07K14/47 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了RSPO3基因在母猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以直径为3～5和7～10mm的两种卵泡为实验材料，采用测序技术研究H3K4me3与卵巢卵泡发育相关基因表达水平的关系。通过ChIP-Seq发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因启动子区的H3K4me3富集程度有显著差异；通过qRT-PCR发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因的表达量有显著差异；通过促进或抑制母猪卵巢颗粒细胞中H3K4me3的程度发现促进H3K4me3程度可促进RSPO3基因的转录，抑制H3K4me3程度可抑制RSPO3基因的转录；通过超表达或干扰RSPO3发现RSPO3可促进母猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋亡。

公开(公告)号：CN119614634A

公开(公告)日：2025-03-14

申请号：CN202411826951.4

申请日：2024-12-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 何颖婷 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  张哲 ,  高亚辉 ,  周尹祺 ,  李念 ,  李硕

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明提供了一种PAFAH1B1基因在卵巢颗粒细胞周期中的应用，涉及基因表达调控的技术领域。包括调控所述卵巢颗粒细胞中PAFAH1B1基因表达调控所述卵巢颗粒细胞周期，包括增加PAFAH1B1基因表达量或活性的步骤；或者包括减少PAFAH1B1基因表达量或活性的步骤；或者包括在受体细胞中促进或抑制PAFAH1B1基因表达产物与细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶结合的步骤。本申请验证了PAFAH1B1基因表达水平能够显著影响颗粒细胞的细胞周期，为调控颗粒细胞周期提供了一种简单、有效的新途径。揭示了PAFAH1B1基因影响细胞周期的分子机制及其应用，为后续调控哺乳动物卵巢颗粒细胞功能、卵泡发育及初情启动提供了参考。开发并验证了能够对PAFAH1B1基因表达起到敲低基因表达的干扰片段，为抑制PAFAH1B1基因表达提供了有效的新的研究材料。

公开(公告)号：CN118834938A

公开(公告)日：2024-10-25

申请号：CN202411082820.X

申请日：2024-08-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李加琪 ,  何颖婷 ,  袁晓龙 ,  张哲 ,  周小枫 ,  李硕 ,  杨景昊

IPC: C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  G01N21/76 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明公开了褪黑素在调控卵巢颗粒细胞中RSPO3启动子转录水平的应用。本发明通过实验发现，褪黑素可以提高卵巢颗粒细胞中RSPO3的mRNA的表达水平，提高RSPO3蛋白的表达水平，提高RSPO3启动子的转录活性，褪黑素还可以通过增加RSPO3启动子‑1450～‑950区染色可及性，促进H3K4me3与RSPO3结合，进而促进RSPO3的表达。因此，可将褪黑素用于调控卵巢颗粒细胞中RSPO3启动子的转录水平。

公开(公告)号：CN113388614A

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202110476520.X

申请日：2021-04-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  周小枫 ,  李加琪 ,  潘向春 ,  何颖婷 ,  袁晓龙 ,  张豪

IPC: C12N15/113 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开一种RSPO2基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以RSPO2为研究对象，通过构建RSPO2超表达载体和合成小干扰RNA(RSPO2‑siRNA)，分别将RSPO2超表达载体或RSPO2‑siRNA转染到卵巢颗粒细胞，然后检测与卵巢颗粒细胞凋亡、增殖以及E2分泌相关的信号通路基因mRNA以及蛋白水平的变化，最后再检测卵巢颗粒细胞的表型变化。结果表明，RSPO2可抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和促进增殖以及E2分泌。本发明通过探究RSPO2在卵巢颗粒细胞中的应用，对于研究卵巢卵泡闭锁机制以及初情启动等具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN111789966B

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN202010602776.6

申请日：2020-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  何颖婷 ,  张哲 ,  李加琪 ,  张豪 ,  陈赞谋

IPC: A61K49/00 ,  A61K31/428 ,  A61K31/445 ,  A61P15/08 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了组蛋白甲基化H3K4me3在小鼠卵巢发育中的应用。本发明从活体水平及蛋白水平研究了H3K4me3对小鼠卵巢卵泡发育的影响，证实了H3K4me3程度提高能够促进小鼠卵巢卵泡发育、抑制小鼠卵泡凋亡、增加小鼠的窝产仔数和产仔窝重；小鼠性成熟前降低H3K4me3程度，能够抑制小鼠血液中GnRH和促性腺激素释放激素LH和FSH的分泌。本发明将为进一步在分子层面探究H3K4me3靶向调控小鼠卵巢卵泡发育关键基因的机制，进而调控卵巢卵泡发育的机制奠定基础。

公开(公告)号：CN108715848B

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN201810386672.9

申请日：2018-07-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 辛晓萍 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  张哲 ,  何颖婷

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开一种转录因子CEBPα作为Kiss1启动子区的转录因子的应用，属于基因工程和细胞工程技术领域。本发明以转录因子CEBPα为研究对象，采用了生物信息学预测Kiss1启动子区潜在结合的转录因子CEBPα，研究该转录因子CEBPα在卵巢颗粒细胞中对Kiss1启动子区活性的影响，来达到该基因在卵巢颗粒细胞中的表达调控研究。本发明首次证实通过在猪卵巢颗粒细胞中转录因子CEBPα对Kiss1基因的表达调控和在卵巢颗粒细胞中的功能进行研究。本研究实验内容丰富，结果齐全、准确。

公开(公告)号：CN109852662B

公开(公告)日：2021-02-19

申请号：CN201811588889.4

申请日：2018-12-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  何颖婷 ,  张豪 ,  张哲 ,  钟玉宜

IPC: C12Q1/02

Abstract: 本发明公开一种组蛋白甲基化H3K4me3在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以H3K4me3为切入点，采用细胞生物学方法研究其对猪卵巢颗粒细胞功能的影响。本发明技术方案设计周详，结果可靠。为证实H3K4me3对猪卵巢颗粒细胞功能的影响，本发明从多层次、多角度验证，在细胞水平以及蛋白水平进行验证。本发明阐明了H3K4me3对猪卵巢颗粒细胞功能的影响：H3K4me3能够促进猪卵巢颗粒细胞的增殖，抑制猪卵巢颗粒细胞的凋亡，降低阻滞于GO/G1期的猪卵巢颗粒细胞比例；这些对研究组蛋白甲基化对卵巢卵泡发育及母猪繁殖性能的影响机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN111789966A

公开(公告)日：2020-10-20

申请号：CN202010602776.6

申请日：2020-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  何颖婷 ,  张哲 ,  李加琪 ,  张豪 ,  陈赞谋

IPC: A61K49/00 ,  A61K31/428 ,  A61K31/445 ,  A61P15/08 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了组蛋白甲基化H3K4me3在小鼠卵巢发育中的应用。本发明从活体水平及蛋白水平研究了H3K4me3对小鼠卵巢卵泡发育的影响，证实了H3K4me3程度提高能够促进小鼠卵巢卵泡发育、抑制小鼠卵泡凋亡、增加小鼠的窝产仔数和产仔窝重；小鼠性成熟前降低H3K4me3程度，能够抑制小鼠血液中GnRH和促性腺激素释放激素LH和FSH的分泌。本发明将为进一步在分子层面探究H3K4me3靶向调控小鼠卵巢卵泡发育关键基因的机制，进而调控卵巢卵泡发育的机制奠定基础。

公开(公告)号：CN110373416A

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201910747858.7

申请日：2019-08-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李加琪 ,  何颖婷 ,  张哲 ,  袁晓龙 ,  张豪

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了RBP1基因在母猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明是以RBP1为研究对象，采用了分子和细胞生物学方法研究其在母猪卵巢颗粒细胞中的应用：通过ChIP-Seq发现，在不同大小卵泡中RBP1基因启动子区的H3K4me3富集程度有显著差异；通过qRT-PCR发现，在不同大小卵泡中RBP1基因的表达量有显著差异；通过促进或抑制母猪卵巢颗粒细胞中H3K4me3的程度发现促进H3K4me3程度可促进RBP1基因的转录，抑制H3K4me3程度可抑制RBP1基因的转录；通过超表达或干扰RBP1发现RBP1可促进母猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋亡。