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公开(公告)号：CN104328119A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410654344.4
申请日：2014-11-17
Applicant: 华中农业大学 , 湖北百容水产良种有限公司
Abstract: 本发明公开了团头鲂生长性状相关的微卫星分子标记及应用，本发明采用分群分离法，实现分子标记与性状的关联分析，最终筛选出两个与生长性状显著相关的分子标记，Mam116的引物为F:5’-CTATTTACAGTTTCATGCTTTCCTC-3’，R:5’-ATCCCGTCCGCCGCTTACT-3’；Mam166的引物为F:5’-GGTACTGTTTGTGCTGGGC-3’，R:5’-CTGCTCACTCAACTTATTGTAGGTC-3’。本发明对这两个标记进行不同基因型性状的多重比较，以确定劣势和优势等位基因，在团头鲂性状相关育种中选择含有正效基因型的个体作为选育亲本，避开含有负效基因型的个体，可减小实验工作量，加快育种效率。
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公开(公告)号：CN102653785B
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201110051182.1
申请日：2011-03-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于鱼的育种技术领域，涉及分子标记技术领域。本发明具体涉及一种利用微卫星标记准确鉴定团头鲂混养家系的方法。其步骤包括：①采用人工繁殖的方法繁育团头鲂家系，54个家系子代混合放养在同一池塘；②采用荧光标记引物和巢式PCR扩增法分析亲本在12个微卫星位点的基因型，筛选出适合家系鉴定的有效微卫星；③分析混养家系子代在有效微卫星位点的基因型；④鉴定各子代的亲本来源。本发明首次在团头鲂上建立了亲子鉴定的方法，其鉴定准确率达到了98.4％。通过家系的筛选和鉴定，可以减少在团头鲂群体选育中存在的近亲繁殖现象，更有利于实现家系选育，从而加快选育的进程，提高选育效果。
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公开(公告)号：CN102653785A
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN201110051182.1
申请日：2011-03-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于鱼的育种技术领域，涉及分子标记技术领域。本发明具体涉及一种利用微卫星标记准确鉴定团头鲂混养家系的方法。其步骤包括：①采用人工繁殖的方法繁育团头鲂家系，54个家系子代混合放养在同一池塘；②采用荧光标记引物和巢式PCR扩增法分析亲本在12个微卫星位点的基因型，筛选出适合家系鉴定的有效微卫星；③分析混养家系子代在有效微卫星位点的基因型；④鉴定各子代的亲本来源。本发明首次在团头鲂上建立了亲子鉴定的方法，其鉴定准确率达到了98.4％。通过家系的筛选和鉴定，可以减少在团头鲂群体选育中存在的近亲繁殖现象，更有利于实现家系选育，从而加快选育的进程，提高选育效果。
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公开(公告)号：CN119570862A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411755446.5
申请日：2024-12-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/89 , A01K67/0276 , C12N15/113 , C12N15/55
Abstract: 本发明公开了一种快速获得基因型纯合的无肌间刺草鱼方法，该方法以runx2b基因为靶基因对野生型草鱼进行基因编辑，筛选突变成功的F0代个体培育至性成熟后，随后筛选发生突变且突变类型相同的F0代雌雄个体进行交配获得F1代，基因型检测出F1代中runx2b等位基因均纯合的个体，即为F1代无肌间刺草鱼新种质。由于草鱼性成熟需要4‑5年，选育一代的周期较长，本发明旨在利用基因编技术建立一种快速获得无肌间刺草鱼的方法，缩短获得纯合子的周期，为草鱼等经济鱼类的经济性状的遗传改良提供了方法，为鱼类肌间刺发生的分子机制研究提供支持，具有重要的科学研究和产业应用价值。
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公开(公告)号：CN115261324B
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202210826196.4
申请日：2022-07-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/0793
Abstract: 本发明公开了一种鱼类嗅觉神经元的培养方法，该方法将获取的团头鲂嗅囊组织置于PBS缓冲液中剥离边缘黏膜、清洗；向嗅囊组织中加入AIM消毒液，密封后放入冰上消毒，离心后向沉淀组织中加入胰蛋白酶‑EDTA消化液消化，之后加入中和培养基、离心；加入胶原酶工作液，缓慢吹打，再加入中和培养基，离心收集细胞上清液；将收集的细胞液过滤、离心、收集细胞沉淀，然后用中和培养基清洗、离心，加入生长培养基重悬浮，得到细胞悬液；将细胞悬液接种在六孔板中，密封后置于细胞培养箱中进行培养，加入神经细胞培养基继续培养，得到鱼类嗅觉神经元。本发明操作简单，重复性好，为在体外实验节约实验成本和时间，减少实验的繁琐性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116515907A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202211436647.X
申请日：2022-11-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/87 , C12N15/12 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种在草鱼中双gRNA位点敲除runx2b基因的方法及应用，该方法设计靶位点gRNA‑1序列和靶位点gRNA‑2序列；体外转录并纯化分别获得gRNA‑1和gRNA‑2；再以pT3TS‑nCas9n线性化质粒为模板，体外转录合成Cas9mRNA；将gRNA‑1、gRNA‑2和Cas9mRNA混合显微注射到草鱼1细胞期的受精卵中；培育草鱼至三个月时，筛选出有突变的草鱼培育成亲本F0代；继续繁殖培育得到突变品系。该方法简单易行，操作简单，获得草鱼基因突变品系，具有开展水产生物基因功能研究，揭示其遗传发育规律，发掘和利用遗传资源培育高产、抗病抗逆品种等重要的科学意义。
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公开(公告)号：CN115720874A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211292370.8
申请日：2022-10-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/85 , C12N15/12
Abstract: 本发明属于水产生物育种领域，具体涉及养殖经济鱼类无肌间刺种质创制方法及应用，以runx2b基因为靶基因对经济鱼类团头鲂进行基因编辑，挑选有突变的F0代小鱼培养成亲本鱼，通过F0代突变体雌雄性亲本交配繁育产生F1代，筛选出无肌间刺的团头鲂F1培养至成鱼，用于培育无肌间刺团头鲂新种质。本发明利用基因突变方法获得无肌间刺养殖经济鱼类团头鲂新种质，为解决我国青草鲢鳙鲤鲫鲂等重要养殖经济鱼类因肌肉中肌间刺存在而显著影响食用和加工提供了改良方法，也为后续研究肌间刺的分子形成机制提供基础，具有重要的科学研究价值和产业应用价值。
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公开(公告)号：CN115428752A
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN202211249647.9
申请日：2022-10-12
Applicant: 华中农业大学 , 湖北海大种业科技有限责任公司
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明属于鱼类的性别控制领域，公开了一种规模化生产全雌草鱼的方法，步骤包括：1）筛选生长快速、健康优良的雌鱼作为后备亲本2）采用异源精子刺激和冷休克处理的雌核发育方法，获得全雌二倍体苗种；3）采集鱼苗DNA，用草鱼性别分子标记Primer‑184检测是否为全雌；4）雌核发育草鱼苗种正常开口20天后，用雄性激素混合配合饲料投喂，持续60‑90天，使草鱼苗中XX♀雌鱼性逆转成为XX♂生理雄鱼；5）将全雌二倍体正常鱼种与上述生理雄鱼进行交配，规模化生产100％全雌草鱼。本发明，缩短了全雌草鱼的培育周期，规模化生产全雌草鱼，大幅度提高亩产量和养殖效益。适用于大规模的生产需求，更容易推广应用。
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公开(公告)号：CN114752664A
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN202210538110.8
申请日：2022-05-17
Applicant: 华中农业大学 , 镇江江之源渔业科技有限公司
IPC: C12Q1/6879 , C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及SNP标记领域，具体公开了一种鉴定刀鲚遗传性别的SNP标记及其引物和应用。本发明通过2b‑RAD测序方法成功筛选到刀鲚性别特异性SNP标记，该标记位于刀鲚LG18染色体上的第12186257位碱基。针对该SNP标记，设计引物利用常规PCR扩增和Sanger测序能够准确快速鉴定出刀鲚的遗传性别。与之前解剖检测、性腺切片观察相比，该技术具有准确、简单、快速，对鱼体伤害少等优点，解决了刀鲚性别鉴定的难题，将有助于大规模培育刀鲚全雌体系，为刀鲚繁养殖业的发展，提供有力依据。
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公开(公告)号：CN110684777A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201911104496.6
申请日：2019-11-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , A01K67/027
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了一段分离的核苷酸序列在肌间刺减少的斑马鱼构建中的应用，所述的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，利用本领域的常规方法，以SEQ ID NO.1为靶基因进行基因突变操作，筛选出发生突变的F0，对F0与野生型杂交产生的F1进行基因分型，筛选出突变体F1并自交，即可获得肌间刺数目显著减少70%以上且稳定遗传的斑马鱼少肌间刺品系。本发明利用一段分离的核苷酸序列首次获得了肌间刺减少的鱼类品系，且具有性状改良效果显著、育种时间短、遗传稳定、成本低等优点，具有科学研究的基础价值和应用价值，不仅能用于鱼类肌间刺发育机制研究，而且为获得多种鱼类少肌间刺的稳定遗传品系提供了方法。
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