一种单端孢霉烯B族毒素的合成方法

    公开(公告)号:CN103421857B

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201210246635.0

    申请日:2012-07-17

    CPC classification number: Y02P20/582

    Abstract: 本发明属于生物毒素合成技术领域,与生物发酵技术领域有关。本发明以大米颗粒为原料,经接种镰刀菌复苏、产分生孢子、分生孢子接种大米产毒培养基培养,培养基甲醇液提取、饱和、萃取、柱层析、水解和结晶等工艺过程,制备出一种单端孢酶类毒素-3Ac-DON和DON毒素结晶。一次结晶后毒素经核磁和质谱结构鉴定准确无误,含量不低于94%。传统提取工艺相比,本发明的一步法柱层析即可分离纯化出3Ac-DON毒素,步骤简单快捷产量高,制备的毒素性质稳定纯度高,显著降低了毒素合成成本,合成的3Ac-DON毒素经一步水解可得到DON,整个过程操作避免了色素干扰,简单,省时省力。得到的两种毒素均可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素领域。

    莫能菌素、盐霉素和拉沙洛西残留分析方法

    公开(公告)号:CN103424479B

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201310159816.4

    申请日:2013-05-03

    Abstract: 本发明属于兽药残留分析技术领域,公开了一种羧基化合物聚醚药物氢取代衍生反应高效液相色谱柱前衍生化反应分析方法。所述的聚醚类药物含有羧基基团与荧光试剂1-溴乙酰芘发生反应,产物具有极强的荧光活性。优化反应条件:以18-冠醚-6溶液为相转移催化剂,1-溴乙酰芘溶液作为衍生化试剂,30~70℃水浴150min,待冷却后经高效液相色谱仪检测,衍生产物在激发波长为360nm,发射波长为420nm时有最大的荧光强度,最小检出量为50μg/L,在200~1600μg/L范围内对峰面积呈线性响应,结果重现性良好,3个浓度、15次重复的变异系数小于7.8%,各项指标均能满足莫能菌素、盐霉素和拉沙洛西三种聚醚类药物残留分析的要求。

    一种快速检测空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药突变点的荧光定量PCR方法

    公开(公告)号:CN101348831B

    公开(公告)日:2011-06-01

    申请号:CN200810048093.X

    申请日:2008-06-19

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种检测空肠弯曲杆菌大环内酯类药物耐药相关基因突变的方法。本发明利用实时荧光定量PCRTaqMan探针技术,依据空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药突变区23S rDNA中V区的核酸序列,设计特异性的引物和探针,通过优化TaqMan实时荧光定量PCR反应体系和反应条件,以准确检测靶基因的相关耐药突变点。本发明能够快速准确地同时检测出空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药的两个主要突变位点,比目前已经报道的相关分子生物学检测方法具有更好的特异性和更高的灵敏度,比传统的测序和药敏实验方法操作简便、准确快速。本发明为耐大环内酯类空肠弯曲杆菌分子流行病学监测提供了有力的技术手段。

    一种快速检测空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药突变点的荧光定量PCR方法

    公开(公告)号:CN101348831A

    公开(公告)日:2009-01-21

    申请号:CN200810048093.X

    申请日:2008-06-19

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种检测空肠弯曲杆菌大环内酯类药物耐药相关基因突变的方法。本发明利用实时荧光定量PCR TaqMan探针技术,依据空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药突变区23S rDNA中V区的核酸序列,设计特异性的引物和探针,通过优化TaqMan实时荧光定量PCR反应体系和反应条件,以准确检测靶基因的相关耐药突变点。本发明能够快速准确地同时检测出空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药的两个主要突变位点,比目前已经报道的相关分子生物学检测方法具有更好的特异性和更高的灵敏度,比传统的测序和药敏实验方法操作简便、准确快速。本发明为耐大环内酯类空肠弯曲杆菌分子流行病学监测提供了有力的技术手段。

    一种鉴定丁酸梭菌的SYBR Green I荧光染料定量PCR方法

    公开(公告)号:CN119570958A

    公开(公告)日:2025-03-07

    申请号:CN202411819198.6

    申请日:2024-12-11

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定丁酸梭菌的SYBR Green I荧光染料定量PCR方法,属于分子检测技术领域。本发明提供了一种用于丁酸梭菌的qPCR鉴定的引物对,所述引物对包括上游引物和下游引物;所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明鉴定灵敏度高,检测限为7.2×102CFU/mL,且特异性强,重复性好。同时,本发明利用粗提裂解液裂解菌液获得细菌基因组,简化了基因组获得流程。本发明通过标准曲线换算直接获知样品中丁酸梭菌菌液浓度,有效解决了丁酸梭菌鉴定方法复杂、耗时长和效率低等问题,为丁酸梭菌相关研究提供更为便捷的鉴定方法。

    一株结肠弯曲菌噬菌体及其应用
    20.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119530173A

    公开(公告)日:2025-02-28

    申请号:CN202411724284.9

    申请日:2024-11-28

    Inventor: 郝海红 方启

    Abstract: 本发明公开了一株结肠弯曲菌噬菌体及其应用,涉及生物技术领域。该结肠弯曲菌噬菌体于2024年9月25日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国.武汉.武汉大学,保藏号为CCTCC NO.M 20242066。本发明从湖北省家禽养殖场粪便样本分离了一株结肠弯曲菌噬菌体,通过全基因组测序、电镜观察及生物学特性实验等对该噬菌体进行了基本表征及应用效果评估。结果表明:该噬菌体不仅复制快、易扩增,还具有良好的稳定活性。该噬菌体具有较宽的裂解谱,能够有效抑制弯曲菌的增殖,可以开发为抗菌产品,具有重要的市场应用价值。

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