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公开(公告)号：CN101343655A
公开(公告)日：2009-01-14
申请号：CN200810119096.8
申请日：2008-08-29
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种利用细胞间期核染色中心数鉴定杨树多倍体植株的方法，属于植物遗传育种领域。该方法包括以下步骤：采集待鉴别的杨树植株的幼嫩生长部位，依次进行固定，解离，水洗，染色，常规压片；观察统计间期细胞核内的染色中心数目；如果所鉴定杨树植株的间期细胞核的染色中心数目大于40，则该植株为三倍体等多倍体植株。本发明方法适合于具有分生组织细胞分裂不旺盛、所含细胞中期分裂相较少、染色体计数困难等特性的杨树实验材料的多倍体鉴定，还适于对杨树多倍体植株进行快速鉴定。本发明方法省却了预处理等制片技术环节，节约了制片与鉴定时间，对于实验材料细胞分裂相、制片技术以及显微观察仪器等要求不高，易于掌握和实施。
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公开(公告)号：CN101147465A
公开(公告)日：2008-03-26
申请号：CN200710064712.X
申请日：2007-03-23
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种诱导植物胚囊染色体加倍选育植物三倍体的方法，包括对植物雌花序授粉，用秋水仙碱进行处理，解除处理，果序管理，收获种子，播种育苗，染色体检测等步骤，其中，所述的授粉是当植物雌花序处于最佳授粉时期进行授粉；所述的处理是植物雌配子的胚囊发育处于由单核向八核发育的时期内，施加秋水仙碱处理雌花。本发明方法明确设置以最佳授粉时期为实施诱导胚囊染色体加倍处理的起始参照点，在柱头发育到最佳授粉时期时适时授粉，并进一步确定雌花发育至四核胚囊距最佳授粉时期的时间差，可以精确的控制胚囊染色体加倍的处理时间，从而增加胚囊染色体加倍的准确性和稳定性，提高三倍体的诱导效率，节约化学试剂和实验材料。
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公开(公告)号：CN101057555A
公开(公告)日：2007-10-24
申请号：CN200610113448.X
申请日：2006-09-28
Applicant: 北京林业大学
Inventor： 康向阳
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明提供一种对树木非离体状态下芽或枝叶加热处理的装置，包括袋体和使袋体内部空间升温的加热部分，其中袋体包括封闭端和开口端，封闭端和开口端之间构成用于容纳待加热处理树枝的封闭空间，开口端用于将袋体安置在树枝上，开口端通过挠性绳紧固于待处理树枝。本发明装置采用轻巧的结构，依靠树木待处理花枝自身的支撑创造袋内空间，容易架设安装在树枝上，通过将袋口直接绑缚在树木枝条上进行封口和固定，不但具备在室外对高大树木非离体枝条的花芽直接进行高温处理诱导配子染色体加倍，以及用于研究温度变化对树木枝叶或芽发育影响等功能，而且便于携带、保存和安装。
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公开(公告)号：CN116982551B
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202310992884.2
申请日：2023-08-08
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了杨树2n花粉的物理诱导方法。本发明利用低温为诱导剂诱导处理杨树花粉母细胞获得杨树2n花粉；进一步通过优化低温处理诱导杨树花粉染色体加倍技术条件，筛选有效处理时期、处理温度以及持续处理时间等最佳技术参数，最终获得高频率的杨树2n花粉，建立了低温诱导杨树花粉染色体加倍选育三倍体的技术体系，极大地提高了毛白杨2n花粉的比率，经过低温诱导处理的杨树雄花序能够正常散粉且花粉活力高，适用于培育三倍体的杂交授粉；相较于目前的秋水仙碱诱导和高温诱导方法，采用低温诱导2n花粉具有操作简单、成本低廉、相对安全性高等优点，在构建新型高效的杨树三倍体育种技术体系方面具有理论和实践意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115443908B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202211279677.4
申请日：2022-10-19
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开一种提高植物遗传转化效率的方法，对植物外植体受体材料进行分化培养处理，然后对分化培养处理后的受体材料进行遗传转化。本发明对带有切口的受体材料进行分化培养，在体视显微镜下适时观察材料切口的发育状态，通过石蜡切片在显微镜下观察受体材料细胞形态，通过EdU染色和荧光定量PCR确定细胞周期S期，精确判别遗传转化时机并及时实施遗传转化处理。采用本发明方法精确确定受体材料遗传转化最佳处理时期，基于离体培养条件下不同植物受体材料叶芽原基形成及发育进程不同的原理，对不同植物进行适时的遗传转化，实现叶芽原基的目标基因转化或修饰，提高植物遗传转化率、稳定性和可重复性，获得高转化率的遗传转化植株。
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公开(公告)号：CN106797885A
公开(公告)日：2017-06-06
申请号：CN201611195165.4
申请日：2016-12-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种诱导杨树不定芽染色体加倍的方法，包括对外植体进行愈伤组织的分化培养后再对愈伤组织进行秋水仙碱诱导培养。本发明方法根据离体培养叶片愈伤发育状态即时判别诱导分化处理的适宜时机，并对愈伤组织进行秋水仙碱诱导培养，然后进行不定芽再生培养、生根培养，获得杨树四倍体再生植株。本发明方法显著提高杨树四倍体的诱导率，增强施加诱导剂的时效性，同时减少嵌合体的产生，对其他植物四倍体诱导等也具有重要借鉴意义。
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公开(公告)号：CN102392074B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110363048.5
申请日：2011-11-16
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种直接鉴定高等植物DNA同源重组的方法，包括：(1)以待鉴定的植物为母本，诱导胚囊染色体加倍获得2n雌配子；(2)2n雌配子与父本植物雄配子杂交获得杂种三倍体；(2)筛选获得共显性分子标记引物；(3)以筛选的共显性分子标记引物进行PCR扩增；(4)扩增产物进行毛细管电泳分析：如果三倍体扩增产物中只出现母本的共显性分子标记之一，表明在该分子标记相关位点未发生同源重组；如果三倍体扩增产物中出现了母本的全部遗传信息，表明待鉴定母本植物在该分子标记相关位点发生了同源重组并形成异源双链DNA。本发明方法对于植物遗传分析、分子标记技术方法判别以及指导三倍体育种等具有重要的理论和应用价值。
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公开(公告)号：CN102392074A
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN201110363048.5
申请日：2011-11-16
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种直接鉴定高等植物DNA同源重组的方法，包括：(1)以待鉴定的植物为母本，诱导胚囊染色体加倍获得2n雌配子；(2)2n雌配子与父本植物雄配子杂交获得杂种三倍体；(2)筛选获得共显性分子标记引物；(3)以筛选的共显性分子标记引物进行PCR扩增；(4)扩增产物进行毛细管电泳分析：如果三倍体扩增产物中只出现母本的共显性分子标记之一，表明在该分子标记相关位点未发生同源重组；如果三倍体扩增产物中出现了母本的全部遗传信息，表明待鉴定母本植物在该分子标记相关位点发生了同源重组并形成异源双链DNA。本发明方法对于植物遗传分析、分子标记技术方法判别以及指导三倍体育种等具有重要的理论和应用价值。
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公开(公告)号：CN101343655B
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200810119096.8
申请日：2008-08-29
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种利用细胞间期核染色中心数鉴定杨树多倍体植株的方法，属于植物遗传育种领域。该方法包括以下步骤：采集待鉴别的杨树植株的幼嫩生长部位，依次进行固定，解离，水洗，染色，常规压片；观察统计间期细胞核内的染色中心数目；如果所鉴定杨树植株的间期细胞核的染色中心数目大于40，则该植株为三倍体等多倍体植株。本发明方法适合于具有分生组织细胞分裂不旺盛、所含细胞中期分裂相较少、染色体计数困难等特性的杨树实验材料的多倍体鉴定，还适于对杨树多倍体植株进行快速鉴定。本发明方法省却了预处理等制片技术环节，节约了制片与鉴定时间，对于实验材料细胞分裂相、制片技术以及显微观察仪器等要求不高，易于掌握和实施。
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