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公开(公告)号：CN107488650A
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201710749572.3
申请日：2017-08-28
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
CPC classification number: C12N9/2442 , C12N15/815 , C12N2800/22 , C12P19/04 , C12P19/12 , C12Y302/01014
Abstract: 本发明公开了一种番木瓜几丁质酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了番木瓜(Carica Papaya)中的几丁质酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达，获得番木瓜几丁质酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的番木瓜几丁质酶对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.18mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要木瓜蛋白酶20mg，理论上效率提高100倍以上；具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN107586768B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201711018444.8
申请日：2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种环状芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)中的壳聚糖酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳聚糖酶编码基因进行高效分泌表达，获得环状芽孢杆菌壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶对壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.77mg)降解5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要来源于枯草芽孢杆菌的中性蛋白酶150mg，理论上效率提高近200倍；具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN107586766A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201711013149.3
申请日：2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)中的壳聚糖酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳聚糖酶编码基因进行高效分泌表达，获得解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶对壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.23mg)降解5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要α-淀粉酶150mg，理论上效率提高600倍以上；具有良好的工业应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114807190A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202110110583.3
申请日：2021-01-27
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明提供了一种南极地衣链霉菌壳聚糖酶基因及其应用。本发明根据大肠杆菌密码子的偏好性，对链霉菌的壳聚糖酶编码基因进行了优化，优化后的核酸序列与原始核酸序列的同源性为73.39％，该壳聚糖酶SPAMC‑CSN在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达，获得的壳聚糖酶SPAMC‑CSN能高效降解壳聚糖，获得聚合度为2‑4的壳寡糖，其中壳三糖为主要降解产物；并且对不同脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，获得不同脱乙酰度的复杂壳寡糖。本发明提供的壳聚糖酶可用于壳寡糖及几丁寡糖等的规模制备，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN108977418A
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201810757957.9
申请日：2018-07-11
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了高效固氮慢生根瘤菌(Bradyrhizobium diazoefficiens)中的壳寡糖脱乙酰酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳寡糖脱乙酰酶编码基因进行分泌表达，获得高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶对可对壳寡糖非还原端的乙酰基进行脱除，从而获得特定结构的壳寡糖。这些经调控后的壳寡糖与调控前相比，可具有新的或更高的生物活性。因此，该酶及其脱乙酰产物均具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN108531470A
公开(公告)日：2018-09-14
申请号：CN201810219712.0
申请日：2018-03-16
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，主要涉及一种硫酸岩藻多糖裂解酶TFLFM及其制备方法和应用。本发明通过截短硫酸岩藻多糖裂解酶的氨基酸序列使其高效表达。本发明所用菌株为大肠杆菌BL21(DE3)，导入编码截短硫酸岩藻多糖裂解酶的基因，从而得到能够高效表达硫酸岩藻多糖裂解酶的重组大肠杆菌，并通过体外实验证实了酶活。
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公开(公告)号：CN107603966A
公开(公告)日：2018-01-19
申请号：CN201711012737.5
申请日：2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了热紫链霉菌(Streptomyces thermoviolaceus)中的几丁质酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达，获得热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.30mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要商品纤维素酶100mg，理论上效率提高300倍以上；具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN107586769A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201711018461.1
申请日：2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了热紫链霉菌(Streptomyces thermoviolaceus)中的几丁质酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达，获得热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.20mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要商品纤维素酶100mg，理论上效率提高约500倍；具有良好的工业应用前景。
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