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公开(公告)号：CN110846291B
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN202010034188.7
申请日：2020-01-14
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种热稳定性提高的胺脱氢酶突变体及其基因工程菌的构建和应用。本发明提供的胺脱氢酶突变体包括4种单点突变体和11种组合突变体，与野生型胺脱氢酶相比，其单点突变体和组合突变体在42℃下半衰期均更长；尤其是组合突变体，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果，其半衰期大约是野生型脱氨氢酶的5倍。通过本发明所提供的构建方法得到的胺脱氢酶突变体的热稳定性更好，在较高的温度下催化合成手性胺时，表现出优良的立体选择性、区域选择性和催化活性，具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN110951705A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911327073.0
申请日：2019-12-20
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种胺脱氢酶突变体、酶制剂、重组载体、重组细胞及其制备方法和应用。该胺脱氢酶突变体，由野生型胺脱氢酶的第104位的谷氨酸突变为丙氨酸后得到；或者，由野生型胺脱氢酶的第137位的天冬氨酸突变为脯氨酸后得到；或者，由野生型胺脱氢酶的第174位的缬氨酸突变为半胱氨酸后得到；或者，由野生型胺脱氢酶的第197位的缬氨酸突变为天冬氨酸后得到。上述胺脱氢酶的催化效率较高。
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公开(公告)号：CN110846291A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN202010034188.7
申请日：2020-01-14
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种热稳定性提高的胺脱氢酶突变体及其基因工程菌的构建和应用。本发明提供的胺脱氢酶突变体包括4种单点突变体和11种组合突变体，与野生型胺脱氢酶相比，其单点突变体和组合突变体在42℃下半衰期均更长；尤其是组合突变体，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果，其半衰期大约是野生型脱氨氢酶的5倍。通过本发明所提供的构建方法得到的胺脱氢酶突变体的热稳定性更好，在较高的温度下催化合成手性胺时，表现出优良的立体选择性、区域选择性和催化活性，具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114480342B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202111180303.2
申请日：2021-10-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型PET水解酶、重组载体、重组工程菌及其应用，突变型PET水解酶为如下(a1)或(a2)：(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽；(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90％同源性的多肽。本发明的突变型PET水解酶包括单点突变体和组合突变体，与野生型PET水解酶相比，其单点突变体和组合突变体在60℃下半衰期均更长；尤其是组合突变体，其半衰期大约是野生型的2倍，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。
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公开(公告)号：CN117821560A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202410037274.1
申请日：2024-01-10
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Phi29DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：采用环状双链DNA为模板，在含有扩增引物和dNTPs的反应体系中，以待测Phi29DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dNTPs中的dATP的剩余量，再根据Phi29DNA聚合酶的绝对活性定义，利用公式计算得到Phi29DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有同时测定Phi29DNA聚合酶聚合活性与链置换活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114480311A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202111180302.8
申请日：2021-10-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用，该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2)：(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽；(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90％同源性的多肽。本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体，与野生型邻苯二酚双加氧酶相比，其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长；尤其是组合突变体，其半衰期大约是野生型的3倍，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。
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公开(公告)号：CN113249349A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110690363.2
申请日：2021-06-22
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型醇脱氢酶、重组载体及其制备方法和应用，所述突变型醇脱氢酶是在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列上进行突变，突变位点选自T105N、G137S、A165E、S180D中的一种或一种以上的组合。本发明的突变型醇脱氢酶包括单点突变体和组合突变体，与野生型醇脱氢酶相比，本发明的单点突变体和组合突变体的酶活力均得到了提高；尤其是组合突变体，其活性提高了6倍，表现出单点突变体叠加效果；本发明的突变型醇脱氢酶具有优良的催化活性，能够用于催化醛/酮化合物还原，具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN111073871B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201911304476.3
申请日：2019-12-17
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种热稳定性提高的DNA聚合酶突变体及其构建方法和应用。本发明提供的DNA聚合酶突变体包括单点突变体和组合突变体，与野生型DNA聚合酶(AAA32368.1)相比，其单点突变体和组合突变体在65℃下半衰期均更长；尤其是组合突变体，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶(AAA32368.1)的3倍。基于此，本发明所提供的DNA聚合酶突变体的热稳定性更好，适于在较高的温度下单分子核序中应用。
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公开(公告)号：CN111073871A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911304476.3
申请日：2019-12-17
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种热稳定性提高的DNA聚合酶突变体及其构建方法和应用。本发明提供的DNA聚合酶突变体包括单点突变体和组合突变体，与野生型DNA聚合酶(AAA32368.1)相比，其单点突变体和组合突变体在65℃下半衰期均更长；尤其是组合突变体，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶(AAA32368.1)的3倍。基于此，本发明所提供的DNA聚合酶突变体的热稳定性更好，适于在较高的温度下单分子核序中应用。
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公开(公告)号：CN110982801A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911377567.X
申请日：2019-12-27
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种转氨酶突变体及其构建方法和应用。本发明提供的转氨酶突变体包括在野生型转氨酶(WP_0532423951.1)氨基酸序列的第259位、第431位、第264位、第269位及第381位进行单点突变和组合突变的多种突变体，与野生型转氨酶(WP_0532423951.1)相比，该突变体在55℃下半衰期更长，最优组合突变体的半衰期大约是野生型转氨酶(WP_0532423951.1)的5倍，热稳定性更好，适于在较高的温度下催化合成手性胺。通过本发明所提供的构建方法得到的转氨酶突变体在较高的温度下催化合成手性胺时表现出优良的立体选择性和催化活性，具有较好的应用前景。
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