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公开(公告)号:CN114181953B
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202111572371.3
申请日:2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用,属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足,本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法,并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签,通过HA标签来指示NS2A,同时为避免影响NS2A荧光信号的观察,对NS2A第30个氨基酸进行点突变,以干扰NS2A的茎环结构,消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号:CN117343149A
公开(公告)日:2024-01-05
申请号:CN202311196599.6
申请日:2023-09-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2的抗原肽、利用该抗原肽制备的多克隆抗体及其应用。本发明所述的抗原肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。同时本发明还公开了上述抗原肽的制备方法以及利用该抗原肽制备的多克隆抗体。本发明制备的多克隆抗体的灵敏度和特异性较高,能够特异性识别Nsp2蛋白,可用于Nsp2蛋白的检测及其蛋白功能鉴定、细胞定位等,对于研究Nsp2蛋白的生物学功能提供了重要的实验材料,并对猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测奠定了生物学基础。
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公开(公告)号:CN117164677A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202311189974.4
申请日:2023-09-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4的多肽片段、利用该多肽片段制备的多克隆抗体及其应用。本发明公开的多肽片段的氨基酸序列如SEQ ID N0.1和SEQ ID N0.2所示。同时本发明还公开了上述多肽片段的制备方法以及利用该多肽片段制备的多克隆抗体。本发明制备的多克隆抗体的灵敏度和特异性较高,能够特异性识别NSP4蛋白,可用于NSP4蛋白的检测及其蛋白功能鉴定、细胞定位等,对于研究NSP4蛋白的生物学功能提供了重要的实验材料,并对猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测奠定了生物学基础。
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公开(公告)号:CN116731199A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202310236325.9
申请日:2023-03-13
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N15/64 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及重组猪IgG Fc融合蛋白在非洲猪瘟病毒防控中的应用。本发明根据ASFV‑SY18(GenBank:MH766894.1)基因组序列合成抗原性蛋白目的基因,根据GenBank公布的序列合成猪源IgG Fc片段基因。将抗原性蛋白目的基因和猪源IgG Fc片段基因连接,将目的基因和与IgG Fc连接的目的基因构建杆状病毒表达载体pFast dual,将构建成功的质粒转化并提取Bacmid杆粒,转染至昆虫细胞,拯救可以表达重组融合蛋白的杆状病毒,在昆虫细胞盲传2代收获F2代重组杆状病毒,以进行后续重组蛋白表达。
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公开(公告)号:CN113135997A
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202110336260.6
申请日:2021-03-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12P21/02 , A23B4/20 , A23C3/08 , C12R1/865
Abstract: 本发明提供了一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,属于功能多肽筛选技术领域。为了克服现有技术的不足,本发明提供一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,该杂合肽融合了猪源抗菌肽cecropin P1的活性区域和牛源抗菌肽的活性区域的优势获得新型的杂合肽,通过人工合成杂合肽基因并将目的基因连接在质粒pYES2‑ɑ上获得新型杂合肽重组酵母菌株,使用半乳糖诱导其表达,上清液进一步纯化后即可用于食品保鲜,尤其对于新鲜猪肉保鲜和牛奶保鲜具有很好的效果。
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公开(公告)号:CN112646926A
公开(公告)日:2021-04-13
申请号:CN202011105829.X
申请日:2020-10-16
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种运用环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法结合的方法即时检测非洲猪瘟病毒的检测方法,属于传染病检测领域。为了克服现有非洲猪瘟病毒检测方法的不足,本发明提供一种非洲猪瘟病毒的即时可视化检测方法,其是运用环介导等温扩增方法同时联合横向流动试纸条检测ASFV,建立LAMP‑LFD方法检测ASFV。LAMP与LFD相互结合的技术,使LAMP扩增产物的检测可视化,检测结果明显直观,并具有高特异性、高灵敏度、操作简单的特点,适用于基层和现场使用。
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公开(公告)号:CN118127078A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410123235.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用,属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架,在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因,成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒,pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力,并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白,为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号:CN116179572A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310208576.6
申请日:2023-03-04
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/31 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K14/315
Abstract: 本发明涉及猪链球菌保护性抗原ESPss的基因序列、表达方法及其应用,属于动物免疫技术领域。本发明通过人工合成的ESPss蛋白的核苷酸序列;使用带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物对对核苷酸序列进行扩增,得到目的基因PCR产物和pET‑28a阳性质粒使用EcoRⅠ和XhoⅠ酶进行双酶切处理后连接后,诱导重组ESPss蛋白的表达,得到保护性抗原ESPss,其可以显著提高小鼠的抗体水平,可以显著提升宿主动物血清及脏器细胞因子IL‑4和IFN‑γ的表达水平,并为2型、7型和9型猪链球菌感染提供较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN113981151B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202111478453.1
申请日:2021-12-06
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的方法及其试剂盒,属于病毒分子检测领域。为克服临床上缺少对基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒鉴别的方法,本发明提供一种基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的鉴别方法以及引物和探针,所涉及引物和TaqMan探针是依据乙脑病毒的prM/M基因保守区和盖他病毒的E2基因保守区进行设计,其可以有效鉴别乙脑病毒和盖他病毒,具有较高特异性和灵敏度的优点,可以为乙脑病毒和盖他病毒基因型的快速检测、临床诊断以及流行病学调查提供更好的方法支持。
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公开(公告)号:CN119242595A
公开(公告)日:2025-01-03
申请号:CN202411435986.5
申请日:2024-10-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120株及其感染性克隆的构建与应用。为了克服现有的GIII型的JEV疫苗难以对GI型JEV提供完全的保护,且目前实际应用中缺少GIII型的JEV疫苗的技术不足,本发明提供一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120及其感染性克隆构建方法,所述弱毒疫苗株SD12‑F120的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述弱毒疫苗株SD12‑F120对GI型日本脑炎病毒具有良好的免疫原性和保护效果,为预防GI型日本脑炎病毒病疫苗的开发和疫苗株的筛选提供了新的选择。
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