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公开(公告)号：CN114778852A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210447079.7
申请日：2022-04-26
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , C12N15/70 , C12N15/57 , C12N9/50
Abstract: 本发明公开了一种检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法，该方法针对PRRSV JXwn06PLP2(46～323)基因序列设计特异性引物，构建原核表达质粒pET28a(+)‑PLP2‑StrepⅡ，在E.coli BL21中实现了高效可溶性表达。经过亲和层析柱与Superdex75分子筛纯化，获得了高纯度PLP2重组蛋白，将其作为包被抗原，建立了检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法。本发明发现PLP2可作为一种新的PRRSV诊断抗原，应用其建立的抗体检测方法重复性和特异性好，能够在PRRSV感染仔猪后第3～5天检测到PLP2抗体，可用于PRRS抗体检测和早期诊断。
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公开(公告)号：CN112877348A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110024959.9
申请日：2021-01-08
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/01 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒CD2v胞外域重组蛋白，并进一步公开其用于构建ELISA的应用，以及其制备的用于检测非洲猪瘟病毒的ELISA检测试剂盒。本发明方案基于目前在中国流行的毒株特点，构建了原核表达的CD2v胞外域重组蛋白，所述重组蛋白具有高获得量、高纯度、良好的反应原性，可诱导机体产生中和抗体，可进一步基于该重组蛋白构建检测非洲猪瘟病毒的ELISA试剂盒，所述试剂盒具有高度特异性、敏感性和可重复性，可作为一种可靠的检测方法用于非洲猪瘟病毒抗体的监测或病毒的鉴别。
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公开(公告)号：CN107422117B
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201710482895.0
申请日：2017-06-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种检测猪乙型脑炎病毒抗体的试剂盒，该试剂盒为化学发光酶免疫试剂盒，包括抗原蛋白，所述抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示或在其N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；抗原蛋白的包被浓度为0.5‑2μg/mL，包被液为0.05mol/L pH9.6 NaCO3‑NaHCO3缓冲液。本发明的试剂盒能够用于临床样本中猪JEV NS1抗体的快速检测。与商品化ELISA试剂盒相比，本方法试剂盒较目前应用最为广泛的ELISA试剂盒灵敏度大幅提升，从而降低了漏检率，而且精密度也更高，为我国猪群中乙型脑炎的流行病学调查提供了敏感的检测手段，可用于猪乙型脑炎病毒感染的早期诊断。
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公开(公告)号：CN107422117A
公开(公告)日：2017-12-01
申请号：CN201710482895.0
申请日：2017-06-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种检测猪乙型脑炎病毒抗体的试剂盒，该试剂盒为化学发光酶免疫试剂盒，包括抗原蛋白，所述抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示或在其N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；抗原蛋白的包被浓度为0.5-2μg/mL，包被液为0.05mol/L pH9.6 NaCO3-NaHCO3缓冲液。本发明的试剂盒能够用于临床样本中猪JEV NS1抗体的快速检测。与商品化ELISA试剂盒相比，本方法试剂盒较目前应用最为广泛的ELISA试剂盒灵敏度大幅提升，从而降低了漏检率，而且精密度也更高，为我国猪群中乙型脑炎的流行病学调查提供了敏感的检测手段，可用于猪乙型脑炎病毒感染的早期诊断。
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公开(公告)号：CN107308168A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710465206.5
申请日：2017-06-19
Applicant: 中国农业大学
IPC: A61K31/575 , A61P31/14
CPC classification number: A61K31/575
Abstract: 本发明提供了一种抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞内复制的药物。本发明在细胞水平研究了25-羟基胆固醇(25HC)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的影响，结果发现25HC能显著抑制PRRSV多个毒株的复制，并且抑制PRRSV复制周期的吸附和进入阶段，而不影响病毒基因组的合成和病毒粒子的释放，且25HC对PRRSV病毒粒子无直接灭活作用。25HC有望开发为防治PRRS的一种候选药物。本发明为猪繁殖与呼吸综合征的预防和治疗提供了新的药物，具有较好的市场价值和临床应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118638744A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410936888.3
申请日：2024-07-12
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒及其构建方法与应用。所述突变病毒是在猪繁殖与呼吸综合征病毒JXwn06毒株的基础上进行突变得到的，包含非结构蛋白nsp9 K541R、K336R、K336A、A394G、L396S、R401A、K541A或K541H突变位点。所述突变病毒感染宿主细胞后含有nsp9 K541R的突变株具有高保真特性，其余突变病毒具有低保真特性。所有突变的猪繁殖与呼吸综合征病毒，在细胞中增殖滴度与亲本毒相似，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114703179B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202210482181.0
申请日：2022-05-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及动物疫病检测技术领域，具体涉及检测PDCoV的RT‑RAA‑LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用。本发明以PDCoV的ORF1b基因为诊断靶标，设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PDCoV核酸的引物对与探针。使用本发明的引物对、探针、试剂盒和试纸条可以实现对PDCoV的快速检测，等温扩增所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行结果判读。整个检测过程无需昂贵的仪器设备，仅通过肉眼判读即可获得检测结果。本发明在基层和现场快速检测与甄别PDCoV感染方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116948022B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202310881787.6
申请日：2023-07-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/18 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了抗猪Gasdermin D蛋白单克隆抗体及其应用。本发明提供五株小鼠抗猪GSDMD蛋白的单抗，并建立了利用所述单抗对猪GSDMD蛋白进行免疫印迹和免疫荧光检测的方法。结果表明，五株单抗均能够特异性识别猪GSDMD全长蛋白(GSDMD‑FL)，其中15H6、19H3、23H10、27A10能进一步识别猪GSDMD蛋白被活化切割后所形成的具有膜成孔活性的GSDMD氨基端片段(GSDMD‑NT)，25E2识别猪GSDMD蛋白的羧基端片段(GSDMD‑CT)。本发明提供的单抗为开展猪GSDMD蛋白生物学功能研究、猪体内外细胞焦亡研究提供了必需试剂，具有广阔的商品化生产前景和良好的市场需求。
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公开(公告)号：CN117987377A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410159233.X
申请日：2021-04-06
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种荧光素酶标记猪繁殖与呼吸综合征病毒及其构建方法和应用。所述猪繁殖与呼吸综合征病毒为：基因序列中含有HiBiT序列的猪繁殖与呼吸综合征病毒。本发明通过将HiBiT序列插入猪繁殖与呼吸综合征病毒的序列中，构建得到了一种具有荧光酶特性，同时可以正常增殖的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒。该重组猪繁殖与呼吸综合征病毒具备较好的遗传稳定性，通过该重组病毒可以准确快速地实现病毒的定量检测和抗病毒药物的筛选。
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