一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基

    公开(公告)号:CN108342434B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN201810115846.8

    申请日:2018-02-06

    Abstract: 本发明公开了一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成:示蛋白胨(proteose peptone)1.5‑2.0g,酪蛋白胨1.5‑2.0g,酵母浸粉0.5‑0.75g,ZnSO4·7H2O 0.14‑0.28mg,Na2HPO4·12H2O 0.5‑0.75g,KH2PO40.03‑0.045g,葡萄糖1‑1.5g,余量为水;所述培养基的pH值为7.5‑8.0。所述腐败梭菌毒素是将腐败梭菌生产菌株接种于培养基中,收集培养物并离心,将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的10倍,产出投入比可提高至原传统工艺的20倍。并且,用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8和8倍。

    一种利用基因重组技术获得粗糙型布氏杆菌及其疫苗的生产方法

    公开(公告)号:CN101037663A

    公开(公告)日:2007-09-19

    申请号:CN200610126875.1

    申请日:2006-09-08

    Abstract: 本发明涉及动物布氏杆菌或称布鲁氏菌及其活疫苗的生产方法,制备该活疫苗的生产菌株是采用构建含氯霉素抗性基因的穿梭质粒,破坏与布氏杆菌S2菌株与S型形成相关的wboA基因,同时标记重组菌的基因的技术,成功构建了含有氯霉素抗性基因标记的重组布氏杆菌rS2株,以此作为生产菌株,按布氏杆菌活疫苗(S2株)生产方法生产出布氏杆菌活疫苗。此疫苗的使用将改变布氏杆菌疫苗株免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并将为布氏杆菌病的防控提供了一种良好的疫苗。

    一种兽用D型产气荚膜梭菌毒素及其制备方法与专用培养基

    公开(公告)号:CN107299070B

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN201710684340.4

    申请日:2017-08-11

    Abstract: 本发明公开了兽用D型产气荚膜梭菌毒素的制备方法及其专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成:大豆蛋白胨1~1.5g,酪蛋白胨1~1.5g,酵母浸粉0.5~0.75g,Na2HPO4·12H2O 0.5~0.75g、糊精1~1.5g,余量为水;所述培养基的pH值为8.0~8.5。所述D型产气荚膜梭菌毒素是将D型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中,收集培养物并离心,将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的45倍,产出投入比可提高至原传统工艺的30~225倍。并且,用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8.3和13.3倍。

    一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN109943507A

    公开(公告)日:2019-06-28

    申请号:CN201910230951.0

    申请日:2019-03-26

    Abstract: 本发明公开了一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用。所述类毒素制备方法如下:将A型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中发酵培养,得到发酵产物,然后将发酵产物在L-赖氨酸、甲醛水溶液和pH6.8下灭活脱毒,灭活脱毒合格的菌液离心上清即为类毒素。所述培养基包括如下物质:酪蛋白胨、酵母浸粉、CaCl2、ZnSO4·7H2O、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4、葡萄糖。按本发明方法制备的A型产气荚膜梭菌毒素的毒力最高可提至制苗标准的12.5倍,用其制备的类毒素在家兔上的一免、二免血清中和效价也分别最高可提至传统工艺的4和50倍,血清效价成本比可最高提至传统工艺的48.8、1216.4倍。

    同时表达ETX-CSA的重组菌及相关疫苗的生产方法

    公开(公告)号:CN109112152A

    公开(公告)日:2019-01-01

    申请号:CN201810938913.6

    申请日:2018-08-17

    Abstract: 本发明公开了同时表达ETX-CSA的重组菌及相关疫苗的生产方法。本发明重组菌的构建方法包括:将融合蛋白ETX-CSA的编码基因导入大肠杆菌,得到表达融合蛋白的重组菌;连接肽的氨基酸序列为SEQ ID No.1的第297-311位。本发明方法仅发酵一株菌即可同时获得两种毒素蛋白,将其制苗后可同时预防两种疾病。将其与C型产气荚膜梭菌类毒素制成联苗后能产生优异的免疫效果,三组分(S、C、D)的家兔血清效价分别可提高至规程标准的3、4、10倍。本发明方法稳定性好、耗时短、成本低,其中S、D组分的成本降为传统工艺的1/100,三组分(S、C、D)的效价成本比可分别提高为传统工艺的344、4、993倍。

    布鲁氏菌病CF-ELISA抗体检测试剂盒

    公开(公告)号:CN106596958B

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201611177517.3

    申请日:2016-12-19

    Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验(CF‑ELISA)诊断试剂盒,本试剂盒将补体结合试验(CFT)中的反应系统与酶联免疫吸附试验(ELISA)中的酶标记放大系统相结合。本试剂盒较传统补体结合试验诊断试剂而言,具有敏感性高、使用简便、快速、高通量,标准化程度高的特点,而较传统ELISA诊断试剂盒而言,具有特异性高、可检测各种布病特异性抗体的特点,是一种较为理想的新型布病诊断工具。本试剂盒主要组份:脂多糖LPS抗原包被板、强阳性对照血清、弱阳性对照血清、阴性对照血清、豚鼠补体、酶标记豚鼠补体C1q‑B单克隆抗体60G4、底物显色液、终止液、洗涤液。

    布鲁氏菌病CF‑ELISA抗体检测试剂盒

    公开(公告)号:CN106596958A

    公开(公告)日:2017-04-26

    申请号:CN201611177517.3

    申请日:2016-12-19

    CPC classification number: G01N33/577 G01N33/56911 G01N2333/23

    Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验(CF‑ELISA)诊断试剂盒,本试剂盒将补体结合试验(CFT)中的反应系统与酶联免疫吸附试验(ELISA)中的酶标记放大系统相结合。本试剂盒较传统补体结合试验诊断试剂而言,具有敏感性高、使用简便、快速、高通量,标准化程度高的特点,而较传统ELISA诊断试剂盒而言,具有特异性高、可检测各种布病特异性抗体的特点,是一种较为理想的新型布病诊断工具。本试剂盒主要组份:脂多糖LPS抗原包被板、强阳性对照血清、弱阳性对照血清、阴性对照血清、豚鼠补体、酶标记豚鼠补体C1q‑B单克隆抗体60G4、底物显色液、终止液、洗涤液。

    一种布鲁氏菌活疫苗及其生产方法

    公开(公告)号:CN102327606B

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201110261672.4

    申请日:2011-09-06

    Abstract: 本发明涉及一布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。疫苗是由重组布鲁氏菌rS2-ΔWboA株作为生产菌株。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失布鲁氏菌S2株菌WboA基因1-897bp之间的碱基序列,使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件,从而由光滑型转变为粗糙型。粗糙型重组菌株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。

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