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公开(公告)号:CN104774263A
公开(公告)日:2015-07-15
申请号:CN201510153293.1
申请日:2015-04-02
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontB,及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体4C-scFv的底物GFP-HIS6-SNAP25(62)-VAMP(57)-C,人源化抗B型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(4.38±0.445)×105L/mol,为生产抗B型肉毒毒素特效救治药物及快速检测B型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104531730A
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201410771046.3
申请日:2014-12-15
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C12N15/55 , C07K16/40 , A61K39/40 , A61P39/02 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体8B,它是从噬菌体抗体库Source bioscience筛选出来的,是全人源抗产气荚膜梭菌α毒素抗体,既可以实现中和毒素的治疗作用,同时克服了异源性抗体的多种副作用,免除了异源性抗体进行人源化改造的繁琐步骤和高成本,由于单链抗体分子量小,体内穿透能力强,迅速到达受损组织和细胞发挥抗毒素作用,因此达到经济和高效的双重目的。α毒素与产气荚膜梭菌其他类型毒素具有一定的同源性,该抗体药物有可能对其他类型的毒素具有抑制和治疗效果,也可作为检测试剂检测产气荚膜梭菌α毒素。
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公开(公告)号:CN103834664A
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201410117214.7
申请日:2014-03-27
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C07K14/485 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了重组表皮生长因子EGF基因,它是人工体外合成的,以组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以EGF为目的片段的融合表达蛋白质,并使EGF以无启动子的正确阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达三种物质串联的融合蛋白。在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,一步获得90%纯度的融合蛋白质,利用高特异性和高活性SUMO蛋白酶对所纯化的融合蛋白质进行酶切,使标签部分HS与EGF目的蛋白解离,并利用金属螯合介质将标签部分与EGF目的蛋白分离。获得了纯度达95%的无首位Met的天然结构和活性2.2╳108IU/mg的目的蛋白的。每毫克费用由1.05元降至0.32元。
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公开(公告)号:CN103805622A
公开(公告)日:2014-05-21
申请号:CN201410082516.5
申请日:2014-03-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了基因工程IFNα-2b融合蛋白质新型制备工艺,为解决无法去除错配异构体的现状,采用融合表达载体,将促进干扰素α-2b二硫键正确折叠的蛋白质及高效蛋白酶底物片段与干扰素α-2b基因融合表达,形成可溶性天然结构表达形式;目的蛋白以可溶性天然结构形式表达,活性高,无需复性处理,避免蛋白质异构体产生;蛋白质纯化工艺简洁,仅需一步金属螯合亲和层析产品纯度即可达到90%以上,去除融合蛋白片段,再利用该亲和层析获得纯度95%以上的终产品,产量高,活性明显提升,成本低;达全菌体蛋白的30%以上;获得了干扰素α-2b天然结构的表达产物,产品活性优于现有的国内和国际产品。
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公开(公告)号:CN106117352B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201610520546.9
申请日:2016-07-05
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体E3‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontAL,及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,在人源化抗A型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(1.92±0.47)×107L/mol,为生产抗A型肉毒毒素特效救治药物及快速检测A型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105924520B
公开(公告)日:2020-04-21
申请号:CN201610520548.8
申请日:2016-07-05
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体D2‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontAL,及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,在人源化抗A型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(6.89±0.65)×106L/mol,为生产抗A型肉毒毒素特效救治药物及快速检测A型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104861070B
公开(公告)日:2019-07-02
申请号:CN201510153593.X
申请日:2015-04-02
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C07K16/40 , A61K39/395 , A61P39/02 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontB,及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,人源化抗B型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(5.35±0.903)×105L/mol,为生产抗B型肉毒毒素特效救治药物及快速检测B型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN106117352A
公开(公告)日:2016-11-16
申请号:CN201610520546.9
申请日:2016-07-05
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
CPC classification number: C07K16/1282 , A61K39/00 , C07K2317/24 , C07K2317/622 , C07K2317/92 , G01N33/68 , G01N2333/33
Abstract: 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体E3‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontAL,及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,在人源化抗A型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(1.92±0.47)×107L/mol,为生产抗A型肉毒毒素特效救治药物及快速检测A型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103805621B
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201410082515.0
申请日:2014-03-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的新型制备工艺,构建以转硫酶A(TrxA)-组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以LHRH-PEA转膜肽-ONC(简称为LPO)为目的片段的融合表达蛋白质,并使这两部分蛋白质以正确的阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达六种物质串联的融合蛋白,粗提后,在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,SUMO蛋白酶酶切,制备的LPO蛋白质比常规方法制备的LPO蛋白对结肠癌HT-29细胞、卵巢癌OVCAR3细胞、子宫颈腺癌HeLa细胞及肝癌HepG-2细胞等肿瘤细胞系的抑制作用均有明显的提高。
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公开(公告)号:CN103834664B
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201410117214.7
申请日:2014-03-27
Applicant: 吉林大学 , 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C07K14/485 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了重组表皮生长因子EGF基因,它是人工体外合成的,以组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以EGF为目的片段的融合表达蛋白质,并使EGF以无启动子的正确阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达三种物质串联的融合蛋白。在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,一步获得90%纯度的融合蛋白质,利用高特异性和高活性SUMO蛋白酶对所纯化的融合蛋白质进行酶切,使标签部分HS与EGF目的蛋白解离,并利用金属螯合介质将标签部分与EGF目的蛋白分离。获得了纯度达95%的无首位Met的天然结构和活性2.2╳108IU/mg的目的蛋白的。每毫克费用由1.05元降至0.32元。
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