一种基于MXene的人源胚胎干细胞培养方法

    公开(公告)号:CN115820543A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211502112.8

    申请日:2022-11-28

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于MXene的人源胚胎干细胞培养方法,属于生物技术领域,包括量取15ml的8mol/L的HCl置于聚四氟乙烯反应釜内胆;称取1g的LiF加入到上述溶液中,并将内胆置于冰水浴中;称取1g的Ti3AlC2,缓慢加入到上述溶液中;将内胆置于油浴锅,设定35℃,反应24h;待反应结束,进行离心洗涤;与现有技术相比,本发明将新型二维材料MXenes与人胚胎干细胞结合创新。人胚胎干细胞作为治疗感音神经性聋的种子细胞,比鼠源神经干细胞研究更有临床意义。通过电生理检测并比较TCPS组与MXenes组再生神经元的静息膜电位、动作电位、自发突触后电流等指标,以直观的显示再生神经元成熟程度与连接程度,展示了MXenes对人胚胎干细胞再生神经元的促进效果。

    一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法

    公开(公告)号:CN113273545B

    公开(公告)日:2022-08-16

    申请号:CN202110194377.5

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法,属于生物技术领域。一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:生成Lgr5‑CreER阳性、GPA阳性且tdTomato阳性小鼠,使GPA在表达Lgr5的耳蜗支持细胞中特异性表达,在小鼠鼠龄到达3天和4天时,给小鼠注射他莫昔芬,在鼠龄10天时解剖耳蜗;对Myo7a阳性、tdTomato阳性细胞进行标记,并统计其数量;鉴定小鼠耳蜗中的毛细胞生成情况。

    一种生物因子及其在促进内耳毛细胞再生上的应用

    公开(公告)号:CN112175923B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202011060861.0

    申请日:2020-09-30

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明属于生物学内耳研究领域,具体公开了一种生物因子及其在促进内耳毛细胞再生上的应用。所述生物因子为单倍剂量状态下的组蛋白去泛素化酶USP16,所述生物因子具有促进内耳干细胞增殖分化为毛细胞的活性,氨基酸序列如SEQ NO.1所示。本发明人首次在内耳中发现USP16在小鼠内耳中的时空表达模式;后续发现该基因在小鼠毛细胞中敲低之后会导致毛细胞凋亡进而影响正常的听觉功能;最后发现在内耳Lgr5阳性内耳干细胞中敲低USP16基因后促进了内耳干细胞的增殖,导致了毛细胞的增生情况。本发明所述USP16基因为后续小鼠毛细胞再生的研究中奠定了重要基础。

    一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法

    公开(公告)号:CN113273545A

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN202110194377.5

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法,属于生物技术领域。一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:生成Lgr5‑CreER阳性、GPA阳性且tdTomato阳性小鼠,使GPA在表达Lgr5的耳蜗支持细胞中特异性表达,在小鼠鼠龄到达3天和4天时,给小鼠注射他莫昔芬,在鼠龄10天时解剖耳蜗;对Myo7a阳性、tdTomato阳性细胞进行标记,并统计其数量;鉴定小鼠耳蜗中的毛细胞生成情况。

    Rps14和Foxg1调控内耳干细胞增殖分化方法及其应用

    公开(公告)号:CN112899278A

    公开(公告)日:2021-06-04

    申请号:CN202110194253.7

    申请日:2021-02-20

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体的是Rps14和Foxg1调控内耳干细胞增殖分化方法及其应用,方法包括:一、Rps14基因对Lgr5+内耳干细胞增殖和分化的调控:1、OC‑1细胞培养;2、siRNA敲除Rps14基因;3、Lgr5+祖细胞的分离培养及Rps14基因敲除;4、Rps14基因敲除的Lgr5+祖细胞生物学效应,二、敲除Lgr5+祖细胞Foxg1对毛细胞增殖的影响。本发明将Lgr5‑EGFP‑CreERT2小鼠与Foxg1‑floxp小鼠杂交,在Lgr5+祖细胞中有条件地敲除Foxg1,发现Lgr5+祖细胞中敲除Foxg1能诱导新生小鼠耳蜗产生额外的IHCs。通过OC‑1细胞利用不同siRNA敲除Rps14基因,RT‑qPCR检测转染效果;分离培养Lgr5+内耳干细胞转染后检测增殖及分化,通过Lgr5+干细胞上进行成球分化实验表明敲减Rps14基因会抑制干细胞的增殖,对分化无影响。

    一种超声波响应的压电纳米纤维衍生水凝胶神经导管及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN117482282A

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202311407091.6

    申请日:2023-10-27

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 一种超声波响应的压电纳米纤维衍生水凝胶神经导管及其制备方法与应用,通过静电纺丝技术制备复合压电纳米纤维,通过模板法以复合压电纳米纤维为主结构制成神经导管内层,使温度响应性水凝胶前体溶液充满模板间隙,固化后移去模板得到压电纳米纤维衍生水凝胶神经导管,通过浸泡在神经营养因子溶液中可使其负载生物活性药物NGF。所述神经导管的压电纳米纤维内层具有一致对齐的表面拓扑结构,且在超声波振动下能产生电刺激,同时超声波温热效应下的局部升温能促进温度响应性水凝胶收缩进而可控地释放NGF,从而有效促进损伤部位的神经再生,本发明能够实现表面拓扑结构诱导、无线电刺激、生物活性药物控释等多重生物物理化学因素共同促进神经再生。

    一种Lhfpl5基因敲除鼠构建实验方法

    公开(公告)号:CN116606885A

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN202310140862.3

    申请日:2023-02-21

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 柴人杰 孙秋寒

    Abstract: 本发明公开了一种Lhfpl5基因敲除鼠构建实验方法,属于内耳领域。所述Lhfpl5是一种毛细胞立体纤毛HMGIC融合伙伴样5/LHFPL四聚氰胺亚家族成员5,该基因的突变会导致人类的耳聋,而在小鼠身上的类似基因的突变会导致耳聋和前庭功能障碍,并伴有Corti器官的严重退化。它在毛束的形态建成中起着重要作用。本发明首次在新生鼠体内通过病毒介导Lhfpl5在Lhfpl5‑/‑小鼠模型中重新表达,为小鼠听损基因治疗的研究奠定了重要基础。

    GPA和Helios在促进外毛细胞分化和成熟作用上的应用

    公开(公告)号:CN116286987A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310192135.1

    申请日:2023-03-02

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 柴人杰 孙秋寒

    Abstract: 本发明公开了GPA和HELIOS在促进外毛细胞分化和成熟作用上的应用,属于生物学内耳研究领域。具体公开了毛细胞成熟因子GPA和转录因子Helios在协同促进外毛细胞分化和成熟作用上的应用。所述毛细胞成熟因子GPA分别是Gfi1、Pou4f3和Atoh1,对毛细胞的成熟和存活是必要的。所述转录因子Helios是外毛细胞成熟的关键转录调控因子。本发明首次在内耳中发现GPA和Helios可以协同促进外毛细胞的分化和成熟。本发明所述GPA和Helios为后续小鼠外毛细胞分化和成熟的研究奠定了重要基础。

    Rps14基因的应用、药物和小鼠模型的构建方法

    公开(公告)号:CN116059234A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211617557.0

    申请日:2022-12-15

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 柴人杰 艾静如

    Abstract: 本发明公开了Rps14基因的应用、药物和小鼠模型的构建方法,属于生物技术领域,所述Rps14基因的核苷酸序列如SEQNO.1所示;与现有技术相比,本申请提出的带loxp位点的特异性Rps14转基因小鼠可用于在不同位点特异性研究Rps14过表达后调控的功能及其作用。在Lgr5阳性内耳干细胞中特异性过表达Rps14可促进异位毛细胞显著性增加,其有效作用可用于促进毛细胞损伤后的结构和功能修复,用于改善听力损失。Rps14可与其他已有报道的内耳基因协同调控,例如Atoh1、Gfi1、Pou3f4等,有效促进更多异位毛细胞的增生以及功能成熟。

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