尿液外泌体中CCL21的mRNA的检测方法、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN113151446A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110455428.5

    申请日:2021-04-26

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明涉及涉及生物技术领域,尤其是尿液外泌体中CCL21的mRNA的检测方法、试剂盒及应用,现提出如下方案,一种尿液外泌体中CCL21的mRNA的检测方法,所述方法包括从尿液中分离外泌体,抽提所述外泌体中的总RNA,在所述总RNA中逆转录所述CCL21的mRNA获得cDNA,利用荧光定量PCR检测所述cDNA;一种检测糖尿病肾病的标志物,所述标志物包括尿液外泌体中CCL21的mRNA和/或所述mRNA的表达产物;一种通过测定尿液外泌体中CCL21的mRNA的含量或表达水平来评估或预后监测糖尿病肾病炎症、纤维化的程度的试剂盒。本发明检测方法具有尿量取材少、稳定性好、操作简便且检测周期短的优点,能够用于尿液外泌体中CCL21的mRNA表达水平的快速检测。

    基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片

    公开(公告)号:CN103555839B

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201310535181.3

    申请日:2013-11-01

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于实时荧光PCR尿沉渣细胞肾脏纤维化相关mRNA检测芯片,该芯片通过对尿液中的总RNA提取并逆转录为cDNA后,将cDNA进行实时荧光PCR芯片反应、数据分析(ΔΔCt方法)、统计分析寻找差异表达mRNA。本发明可无创、快速、便捷、高效、灵敏、可重复地用于检测肾脏纤维化特异性mRNA,所建立的方法主要用于尿沉渣细胞mRNA检测,是一种无创性检测方法,其检测准确率高。此外,该方法消耗RNA样品少,检测样品浓度范围广,μg级别的RNA含量即可满足检测需求,该方法稳定性高,可重复性好。

    DNA芯片组合延伸检测碱基连续突变的方法

    公开(公告)号:CN102634587A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210128598.3

    申请日:2012-04-27

    Applicant: 东南大学

    Abstract: DNA芯片组合延伸检测碱基连续突变的方法,已知一段核酸序列的待检样本中的至少一个单碱基的各种可能变化的确定是通过一个杂交到固定的样本核酸序列上的至少一个碱基延伸的组合检测来确定的。本发明的最大优点是实现了分析的序列片段中至少一个碱基变化的同时检测。由于序列是已知的,在没有4个核苷酸全部加入到延伸反应体系的情况下,引物会延伸到与没有加入的核苷酸互补的核苷酸单体前终止。基于这个原理,按照不同序列检测的具体情况,可以设计不同的延伸方法,将荧光标记过的核苷酸单体延伸到序列需要检测的碱基位置,从而获得待检测信息。

    基于双抗体夹心免疫分析的抗体微阵列的构建方法

    公开(公告)号:CN101000350A

    公开(公告)日:2007-07-18

    申请号:CN200610161667.5

    申请日:2006-12-30

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 刘必成

    Abstract: 一种基于双抗体夹心免疫分析的抗体微阵列的构建方法,其特征在于构建步骤为:载体的制备;载体的活化;捕获抗体的点样固定;基于微阵列的免疫分析。依据本优化后的操作流程所构建的抗体微阵列,具有较好的可重复性(组内及组间变异<10%)和定量分析的能力(抗原浓度和信号强度的标准曲线相关性>0.95),为平行性、多因子蛋白质定量检测提供了可靠的技术平台。此外,点样后芯片保存稳定,活性至少可维持2个月,为该芯片的产业化和规模化提供了重要的条件。

    一种细胞外囊泡靶向肾脏的示踪体系及示踪方法

    公开(公告)号:CN118787759A

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202411151072.6

    申请日:2024-08-21

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种细胞外囊泡靶向肾脏的示踪体系及示踪方法,属于生物技术领域。所述方法包括:采用荧光染料标记来源于RAW264.7细胞的细胞外囊泡EVs,得到荧光标记的细胞外囊泡EVs;利用肾脏靶向配体修饰所述荧光标记的细胞外囊泡EVs,得到配体修饰的荧光标记的细胞外囊泡EVs;将所述配体修饰的荧光标记的细胞外囊泡EVs注入活体实验动物体内;利用活体成像技术观察活体实验动物体内的荧光分布情况,以确定细胞外囊泡EVs在活体实验动物体内器官的分布、代谢、运动情况。本发明采用上述的方法,确定了最佳荧光染料和配体,建立的示踪体系可用于构建药物递送平台,以及在制备诊断和/或治疗肾脏疾病的药物中应用。

    一种细胞外囊泡—白介素-10纳米靶向药物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN111249449B

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202010134391.1

    申请日:2020-02-28

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 刘必成 汤涛涛

    Abstract: 本发明公开了一种细胞外囊泡—白介素‑10纳米靶向药物及其制备方法和应用,该纳米靶向药物包括源自RAW 264.7巨噬细胞的细胞外囊泡和被包裹在所述细胞外囊泡内作为有效成分的白介素‑10。本发明的纳米靶向药物通过白介素‑10过表达质粒转染RAW 264.7巨噬细胞,再由地塞米松刺激转染后的巨噬细胞,从细胞培养液中提纯细胞外囊泡得到。本发明提供的细胞外囊泡—白介素‑10纳米靶向药物可以应用在制备肾脏抗炎药物或制剂中,不仅提高了IL‑10的稳定性,还可使其在肾脏病变部位富集,从而获得良好的靶向抗炎效果,在肾脏病的治疗中具有非常可观的应用前景。

    一种含通用碱基寡核苷酸序列及其在DNA杂交分析中的应用

    公开(公告)号:CN103484458A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310469720.8

    申请日:2013-10-10

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种含通用碱基寡核苷酸序列及其在DNA杂交分析中的应用。所述含通用碱基寡核苷酸序列包括基本碱基和通用碱基,所述基本碱基与目标序列完全互补,其中包括与目标序列SNV位点对应的基本碱基;所述通用碱基不能对应目标序列SNV位点,位于与目标序列SNV位点对应的基本碱基的一侧或两侧;所述基本碱基为A、G、C、T,所述通用碱基是与A、G、C、T都能形成氢键配对的核苷。本发明的最大优点是实现了DNA序列中单碱基错配的有效分析。

    一种外泌体-VEGF-A纳米药物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114848610A

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202210551830.8

    申请日:2022-05-18

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开一种外泌体—VEGF‑A纳米药物及其制备方法和应用,所述药物包括源自肾小管上皮细胞的外泌体和外泌体内包裹的VEGF‑A,VEGF‑A为所述药物的有效成分。本发明的纳米药物通过VEGF‑A和CD63过表达质粒转染肾小管上皮细胞,再从细胞培养液中提纯外泌体得到。本发明提供的外泌体—VEGF‑A纳米药物可以应用在制备急性肾损伤药物或制剂中,提高了VEGF‑A的稳定性,促进急性肾损伤后管周毛细血管的增殖修复,有助于治疗急性肾损伤向慢性肾损伤转化,保护肾脏,缓解肾脏纤维化,在肾脏病的治疗中具有非常可观的应用前景。

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