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公开(公告)号:CN111575333A
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN202010260868.0
申请日:2020-04-03
IPC: C12P33/20 , C12N9/24 , C12N11/089 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了人参皂苷的生物制备方法,包括:(1)通过组织培养方式诱导生产人参不定根;(2)将诱导的人参不定根转到旋转摇床中的液体培养基中培养;(3)将人参不定根从摇瓶转移到生物反应器中培养一段时间后添加茉莉酸甲酯诱导人参皂苷含量增加;(4)从诱导培养后的不定根中提取人参皂苷;(5)用β-葡萄糖苷酶作为转化酶以人参皂苷混合液为转化底物进行酶促转化反应。本发明提供了组合的人参皂苷的生物制备方法,包括组织培养、酶固定化和水解方法来获得稀有人参皂苷。本发明筛选到6种β-糖苷酶进行酶促水解并将它们组合使用,转化产物中稀有人参皂苷的含量明显提高。本发明生物制备方法可替代直接从人参中提取人参皂苷的方法。
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公开(公告)号:CN102943066A
公开(公告)日:2013-02-27
申请号:CN201210310372.5
申请日:2012-08-23
Applicant: 大庆麦伯康生物技术有限公司 , 东北林业大学大庆生物技术研究院 , 李玉花
IPC: C12N5/20 , C07K16/18 , G01N33/68 , G01N33/545 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种人载脂蛋白B100(ApoBl00)化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法。特别地,本发明提供了一种特异性识别人ApoB100的单克隆抗体,产生该单克隆抗体的杂交瘤,以及使用该单克隆抗体检测人ApoB100的高灵敏度的方法。本发明的试剂盒具有灵敏度高,检测范围宽,操作方便,同时生产成本低等特点。
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公开(公告)号:CN120005903A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510230295.X
申请日:2025-02-28
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N9/22 , C12N1/21 , A01H5/00 , A01H5/02 , A01H6/14 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开一种控制露地菊开花的基因及其应用,属于控制菊花花期技术领域。本发明为了提供一种调控露地菊的花期的方法。一种控制菊花开花的基因,所述基因的核酸分子如SEQ ID NO.3所示。为控制露地菊的花期提供更扎实的理论基础。
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公开(公告)号:CN118599892B
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202410763906.2
申请日:2024-06-14
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 露地菊甲基转移酶基因CmDRM2a和CmDRM2b在控制露地菊花色中的应用,属于基因工程技术领域。为挖掘能调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的甲基转移酶,对露地菊花色进行育种,本发明克隆了能够调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的甲基转移酶基因CmDRM2a和CmDRM2b,并获得只保留甲基转移酶CmDRM2a活性域的截短蛋白CmDRM2a‑cd,然后利用dCas9融合DNA甲基转移酶靶向修饰CmMYB6启动子区特定的区域,通过遗传转化方法确定甲基转移酶基因CmDRM2a、CmDRM2b和CmDRM2a‑cd的功能,成功地创制了表现出露地菊新花色的突变体,实现了花色表观遗传育种。
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公开(公告)号:CN118581137A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410763908.1
申请日:2024-06-14
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 露地菊甲基转移酶基因CmCMT2和CmCMT2cd在控制露地菊花色中的应用,属于基因工程技术领域。为挖掘能够调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的DNA甲基转移酶,进而对露地菊的花色进行育种,本发明克隆出了能够调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的甲基转移酶基因CmCMT2,并获得了只保留CmCMT2活性域的截短蛋白CmCMT2cd的序列,然后利用失活的Cas9融合CmCMT2或CmCMT2cd,并靶向修饰CmMYB6启动子区特定的区域,通过农杆菌介导的遗传转化方法确定了CmCMT2和CmCMT2cd的功能,并成功地创制了表现出露地菊新花色的突变体,实现了露地菊花色的表观遗传育种。
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公开(公告)号:CN109182439A
公开(公告)日:2019-01-11
申请号:CN201811077606.X
申请日:2018-09-15
IPC: C12P33/06
Abstract: 本发明公开了一种人参稀有皂苷Rg3的生物转化方法,包括:(1)将人参进行提取得到人参总皂苷提取液;(2)向人参总皂苷提取液中加入β-葡萄糖苷酶BglPm,a-L-阿拉伯呋喃糖酶Abf22-3,β-葡萄糖苷酶Bgp1或a-L-阿拉伯吡喃糖苷酶Bgp2中的任何一种或多种进行生物转化,得到含有人参稀有皂苷Rg3的转化产物。本发明通过向人参总皂苷提取液中加入β-葡萄糖苷酶,a-L-阿拉伯呋喃糖酶,β-葡萄糖苷酶或a-L-阿拉伯吡喃糖苷酶中的任何一种或多种酶进行生物转化,显著提高了人参稀有皂苷Rg3的转化效率,本发明生物转化方法对于环境友好、转化效率高、适合规模化生产应用。
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公开(公告)号:CN106148394A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201510252909.0
申请日:2015-05-18
Abstract: 利用露地菊脚芽为外植体的非组培遗传转化方法,属于植物基因工程技术领域。本发明利用植物非组织培养的方法,以植物脚芽为外植体通过真空渗透进行遗传转化,不仅速度快,操作简单,结构完整,能保持母本的优良性状,弥补了传统植物基因遗传转化方法操作复杂、转化周期长的不足之处。
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公开(公告)号:CN102943066B
公开(公告)日:2014-12-03
申请号:CN201210310372.5
申请日:2012-08-23
Applicant: 大庆麦伯康生物技术有限公司 , 东北林业大学大庆生物技术研究院 , 李玉花
IPC: C12N5/20 , C07K16/18 , G01N33/68 , G01N33/545 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种人载脂蛋白B100(ApoBl00)化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法。特别地,本发明提供了一种特异性识别人ApoB100的单克隆抗体,产生该单克隆抗体的杂交瘤,以及使用该单克隆抗体检测人ApoB100的高灵敏度的方法。本发明的试剂盒具有灵敏度高,检测范围宽,操作方便,同时生产成本低等特点。
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公开(公告)号:CN102898493A
公开(公告)日:2013-01-30
申请号:CN201110214567.5
申请日:2011-07-29
Abstract: 本发明提供了一种利用小型玻璃生物反应器(3~10L)培养人参不定根的方法。首先将长度约1.0cm的人参不定根培养在装有2.0L 1/2SH培养基的3L反应器内培养,该培养基含3.0mg/L IBA和20g/L蔗糖。定期分析人参不定根的生长和三种人参皂苷(Rg1、Re、Rb1)的累积,确定了人参不定根在生物反应器内的最佳收获周期为7周。3L生物反应器培养基中三种蔗糖浓度(20g/L、40g/L、60g/L)中,20g/L、40g/L两个浓度的蔗糖对人参不定根的人参不定根的生长和皂苷的累积优于60g/L蔗糖,两者无显著差别,但从节约角度考虑,应该选择20g/L蔗糖浓度用于生产。该浓度下,人参皂苷含量和产量分别为5.16mg/g、30.71mg。5和10L生物反应器内在初始接种量分别为:10、15、20g和20、25、30g中,最佳量分别为15和30g,其不定根的生长量分别为9.29和19.17g,皂苷含量分别为5.16和4.58mg/g。生物反应器内培养7周的人参与栽培4年的人参相比,人参皂苷Rg1和Re含量相差不大;栽培人参中Rb1的含量远高于生物反应器中培养得人参不定根中的含量。本发明可为人参不定根的小规模和进一步扩大化培养提供技术支持和参数,也可以作为大规模生产提供人参不定根种子生产方法。
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公开(公告)号:CN106148393A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201510252695.7
申请日:2015-05-18
Abstract: 通过转AtLEAFY基因获得露地菊‘火焰’早花品系,属于基因工程技术领域。本发明利用农杆菌介导的遗传转化方法,通过完善的遗传转化体系,并利用对生物安全的非抗生素标记PMI,筛选获得具有安全标记的露地菊‘火焰’的早花品系,不仅植株健壮,开花时间比野生型早9-11天,盛花期在9月底10月初左右,满足了节日用花的需求,具有很高园林绿化及观赏价值。
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