用于同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的多重PCR引物组

    公开(公告)号:CN103409558B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201310317342.1

    申请日:2013-07-25

    Abstract: 本发明公开了一套用于同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的多重PCR引物组。本发明的引物组由三对引物组成,其中,用于猪流行性腹泻病毒检测的引物序列为SEQ ID NO:1和2所示;用于猪传染性胃肠炎病毒检测的引物序列为SEQ ID NO:3和4所示;用于猪轮状病毒检测的引物序列为SEQ ID NO:5和6所示。应用本发明引物序列通过多重PCR方法可同时对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒的不同毒株进行检测,结果均为阳性,而对其他常见猪源病毒检测结果均为阴性,说明本发明的引物组特异性强、重复性好;对病毒cDNA梯度稀释后进行PCR检测,说明该引物灵敏度高。

    一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103013897A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210424842.0

    申请日:2012-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌菌影及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明选择干酪乳杆菌作为研究对象,通过分离干酪乳杆菌的噬菌体,预测并克隆其裂解基因,将含有克隆得到的裂解基因的重组载体转化干酪乳杆菌,诱导裂解基因表达后制成菌影。本发明以干酪乳杆菌菌影作为抗原传递载体使用,做到了真正意义上的安全可靠。同时,干酪乳杆菌细胞壁中的胞壁酰二肽具有很好的佐剂作用,能明显加强异质性抗原的免疫原性。此外,干酪乳杆菌菌影可通过发酵大量生产,冻干后在室温下可保存较长时间,为进一步应用于生产实践降低了成本,也为进一步设计新型安全有效的药物,特别是疫苗的递送系统,从而应用于预防及治疗疾病提供了一种新的思路和方法。

    传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原及纯化方法

    公开(公告)号:CN101580541A

    公开(公告)日:2009-11-18

    申请号:CN200910071261.1

    申请日:2009-01-14

    Abstract: 本发明提供的是一种传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原及纯化方法。从传染性胰腺坏病毒细胞培养液中进行病毒核酸(RNA)提取,以IPNV VP2基因的下游引物P2进行病毒基因组cDNA的合成,再利用IPNV VP2基因的上、下游引物,进行VP2基因的扩增,将扩增得到的IPNV VP2基因克隆到原核表达载体质粒pET30b中,并在大肠杆菌BL21菌株中进行表达得到传染性胰腺坏死重组VP2蛋白抗原。该抗原可以克服传染性胰腺坏死传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险,可作为一种疾病监测的诊断抗原。

    猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法

    公开(公告)号:CN1285609C

    公开(公告)日:2006-11-22

    申请号:CN200510009706.5

    申请日:2005-02-04

    Abstract: 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取,以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成,再使用TGEV N基因的上、下游引物,进行N基因的扩增,将扩增后的TGEV N基因克隆到原核表达载体质粒pProEXHTb中,并在大肠杆菌DH5α菌株中进行表达得到的猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原。该抗原可以克服猪传染性胃肠炎传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险,可作为一种疾病监测的诊断抗原。

    抗猪传染性胃肠炎重组N蛋白杂交瘤细胞株

    公开(公告)号:CN1740316A

    公开(公告)日:2006-03-01

    申请号:CN200510009883.3

    申请日:2005-04-08

    Abstract: 本发明提供的是一种抗猪传染性胃肠炎重组N蛋白杂交瘤细胞株。以纯化的重组TGEV N蛋白免疫BALB/c小鼠制备诊断用单克隆抗体。取免疫脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA方法进行筛选,经过3次克隆筛选,最终获得一株分泌抗重组TGEV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为E10F10D5,其染色体平均计数为87±10对,间接ELISA检测制备的腹水抗体效价达1∶12800。本发明以生物技术手段纯化重组TGEV N蛋白,制备诊断抗原,建立检测抗体的Dot-ELISA检测方法,制备快诊膜,缩短检测时间;建立间接ELISA检测方法,检测TGEV感染和抗体效价测定,为建立标准化诊断试剂盒奠定基础;为建立快速检测病毒抗原的诊断方法奠定物质基础。

    猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法

    公开(公告)号:CN1680433A

    公开(公告)日:2005-10-12

    申请号:CN200510009706.5

    申请日:2005-02-04

    Abstract: 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取,以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成,再使用TGEV N基因的上、下游引物,进行N基因的扩增,将扩增后的TGEV N基因克隆到原核表达载体质粒pProEXHTb中,并在大肠杆菌DH5α菌株中进行表达得到的猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原。该抗原可以克服猪传染性胃肠炎传统诊断方法中的抗原所存在的排毒、散毒的潜在危险,可作为一种疾病监测的诊断抗原。

    一株民猪源罗伊氏乳杆菌LRM2293及其在抗炎症反应中的用途

    公开(公告)号:CN119823891A

    公开(公告)日:2025-04-15

    申请号:CN202411856142.8

    申请日:2024-12-16

    Abstract: 本发明公开了一株民猪源罗伊氏乳杆菌LRM2293及其在抗炎症反应中的用途。所述的民猪源罗伊氏乳杆菌,命名为Lactobacillus reuteri LRM2293,保藏在中国典型培养物保藏中心,地址在中国.武汉.武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 20242331,保藏时间为2024年10月25日。研究发现,该罗伊氏乳杆菌LRM2293具有体外转化胆汁酸的能力,可作为益生菌的候选菌株。在体外,该罗伊氏乳杆菌LRM2293的培养上清液可降低IPEC‑J2细胞的炎症反应;在体内,LRM2293菌株可定殖在仔猪的各个肠段中,并且可以修复肠道屏障,减轻炎症仔猪的肠道损伤,不仅有望减少因抗生素滥用引发的抗菌耐药性问题,还为新型功能性产品的开发提供了技术手段。

    一株抗PEDV感染的民猪源唾液乳杆菌LSM231及其用途

    公开(公告)号:CN119799550A

    公开(公告)日:2025-04-11

    申请号:CN202411806144.6

    申请日:2024-12-09

    Abstract: 本发明公开了一株抗PEDV感染的民猪源唾液乳杆菌LSM231及其用途,属于微生物技术领域。所述的民猪源唾液乳杆菌,命名为Ligilactobacillus salivarius LSM231,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20242330,保藏时间为2024年10月25日。本发明所筛选的民猪源唾液乳杆菌,由于是肠道内共生益生菌,安全性能高,且通过以上实验结果表明该民猪源唾液乳杆菌LSM231具有较好的抑菌及耐酸耐胆盐特性,且具有显著的抗PEDV效果,能够减轻PEDV感染所引起的临床症状,促进仔猪生长,因此,可替代抗生素用于制备抗PEDV感染的微生态制剂。

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