高同源度多基因家族的表达谱的构建方法

    公开(公告)号:CN101096667B

    公开(公告)日:2011-06-08

    申请号:CN200710041192.0

    申请日:2007-05-24

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及高同源度基因家族中各个成员基因表达谱的构建方法。本发明将RT-PCR随机克隆与荧光实时定量PCR相结合,使用RT-PCR随机克隆获得各个成员基因的表达状态以及表达的基因的相对丰度,再使用实时荧光定量PCR获得各基因家族总体表达量,将两者结合得到基因家族所有成员基因的表达状态及各个表达的成员基因的表达谱的方法。本发明为多基因家族表达调控的研究提供了新的方法,同时也为禾本科作物醇溶蛋白含量的基因工程改造提供了理论指导。

    一种病毒诱导的基因沉默系统及其应用

    公开(公告)号:CN101418313A

    公开(公告)日:2009-04-29

    申请号:CN200810041437.4

    申请日:2008-08-07

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种特别是一种以烟草花叶病毒TMV为载体的病毒诱导的基因沉默系统。该系统是将目标基因DNA片段插入到烟草花叶病毒TMV外壳蛋白CP的终止密码子与3’非翻译区之间,并在烟草花叶病毒TMV外壳蛋白CP的终止密码子与3’非翻译区之间引入了多克隆限制性内切酶切位点,用于目标基因DNA片段的插入;在3’非翻译区前引入一段CP 3’末端的碱基序列,以增强沉默载体的稳定性。所述的目标基因DNA片段不大于1kb。利用本发明的基因沉默系统对目标基因进行沉默将更为经济可行、方便、有效。

    一种人源溶菌酶蛋白基因、其表达载体的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN115386561B

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202210501552.5

    申请日:2022-05-09

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种人源溶菌酶蛋白基因、其表达载体的构建方法及其应用,本发明运用PTF102载体与经过玉米密码子优化后人工合成的人源溶菌酶基因片段进行连接,通过农杆菌介导的玉米幼胚转化实验获得了表达人源溶菌酶蛋白的独立转基因事件。通过对后代样本进行生化成分的分析,发现人源溶菌酶蛋白可以在胚乳中稳定的表达,并且能够在成熟籽粒的胚乳中积累。经过密码子优化后的人源溶菌酶蛋白具有抑菌活性,对革兰氏阳性菌有明显的抑菌作用,而对革兰氏阴性菌的抑制作用不明显。

    能降低玉米中α醇溶蛋白的靶点基因及其应用

    公开(公告)号:CN113637677A

    公开(公告)日:2021-11-12

    申请号:CN202011391351.1

    申请日:2020-12-02

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种能降低玉米中α醇溶蛋白的靶点基因及其应用。该靶点基因为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列中任意一种或两种。本发明运用改造后的CRISPR/Cas9载体与同源比对后所选取的α醇溶蛋白19kD与22kD各基因簇上的20bp靶标分别进行连接,通过农杆菌介导的玉米幼胚转化实验获得了α醇溶蛋白基因编辑材料,通过对后代样本进行表型观察,发现一些转基因事件的籽粒有粉质不透明的胚乳,以及19kD和22kD醇溶蛋白含量的显著下降。同时也获得了α醇溶蛋白含量显著下降的自交系材料。而醇溶蛋白的下降可提升玉米籽粒中赖氨酸和色氨酸等必需氨基酸的含量,从而提高玉米的营养品质。

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